- आधार
- पौष्टिक शक्ति
- चयनात्मक
- अंतर
- तैयारी
- अंडे की जर्दी पायस
- पोटेशियम टेल्यूराइट 1% w / v
- संस्कृति माध्यम तैयार करना
- उपयोग
- नैदानिक नमूने
- भोजन के नमूने
- पानी के नमूने
- क्यूए
- सिफारिशें
- संदर्भ
अगर बेयर्ड पार्कर एक ठोस माध्यम चयनात्मक और अंतर संस्कृति है। यह 1962 में कोएगुलस पॉजिटिव स्टेफिलोकोसी (स्टेफिलोकोकस ऑरियस) की पहचान और गिनती के लिए बनाया गया था।
यह कैसिइन, मांस के अर्क, खमीर निकालने, लिथियम क्लोराइड, ग्लाइसिन, सोडियम पाइरूवेट, पोटेशियम टेलराइट, अगर और अंडे की जर्दी इमल्शन के अग्नाशय हाइड्रोलाइजेट से बना है।
बेयर्ड पार्कर आगर पर विशिष्ट स्टेफिलोकोकस ऑरियस कालोनियों। स्रोत: डेज़ी जॉन
बेयर्ड पार्कर आगर एसुराइटस को कम करने और लेसिथिनसे उत्पन्न करने की क्षमता पर आधारित है। दोनों गुण इस प्रजाति के लिए विशिष्ट विशेषताओं के साथ एक कॉलोनी उत्पन्न करते हैं। इसलिए, यह इस सूक्ष्मजीव का पता लगाने में अत्यधिक प्रभावी है।
एस। ऑरियस की विशिष्ट कालोनियाँ काले या गहरे भूरे रंग की होती हैं, जिसमें रंगहीन सीमा होती है और एक प्रकाश प्रभामंडल होता है, जो उन्हें अन्य सूक्ष्मजीवों से अलग करता है। यह रोगज़नक़ नैदानिक नमूनों, पानी, सौंदर्य प्रसाधन, और कच्चे या पके हुए खाद्य पदार्थों में पाया जा सकता है।
इसका निदान या पता लगाने का अत्यधिक महत्व है, क्योंकि यह विभिन्न प्रकार के विकृति पैदा करता है, जैसे कि फूड पॉइज़निंग, स्केल्ड स्किन सिंड्रोम, टॉक्सिक शॉक सिंड्रोम, फोड़े, मेनिन्जाइटिस, सेप्टिसीमिया, एंडोकार्डिटिस, आदि।
आधार
पौष्टिक शक्ति
कैसिइन, अग्नाशय और खमीर निकालने के अग्नाशयी हाइड्रोलाइजेट पोषक तत्वों, विटामिन और खनिजों के स्रोत हैं जो सामान्य माइक्रोबियल विकास के लिए आवश्यक हैं, जबकि पाइरूवेट और ग्लाइसिन ऐसे यौगिक हैं जो स्टैफिलोकोकस ऑरियस के विशिष्ट विकास का पक्ष लेते हैं।
चयनात्मक
बेयर्ड पार्कर एगर चयनात्मक है क्योंकि इसमें ऐसे पदार्थ होते हैं जो एस के साथ विकास को बढ़ावा देते हैं, जबकि एस ऑरियस के विकास को बढ़ावा देते हैं। निरोधात्मक यौगिक लिथियम क्लोराइड और पोटेशियम टेलराइट हैं।
अंतर
यह माध्यम बाकी कोआगुलस के नकारात्मक स्टेफिलोकोसी से एस ऑरियस को अलग करना संभव बनाता है। एस। ऑरियस के पास काले या गहरे भूरे रंग की कालोनियों को बनाने के लिए टेल्यूरिक ब्लैक टेल्यूरियम को कम करने की क्षमता है।
इसी तरह, अंडे की जर्दी एंजाइम लेसितिण और लाइपेस की उपस्थिति को प्रदर्शित करने के लिए सबस्ट्रेट्स प्रदान करती है। एस। ऑरियस लेसितिण पॉजिटिव है और इसलिए कॉलोनी के चारों ओर एक स्पष्ट प्रभामंडल देखा जाएगा, यह दर्शाता है कि लेसिथिन हाइड्रोलाइज्ड था।
इस अर्थ में, चमकदार काले या गहरे भूरे रंग के उपनिवेशों के इस अग्र पर उपस्थिति उनके चारों ओर एक हल्के प्रभामंडल के साथ एस ऑरियस की उपस्थिति को इंगित करता है।
यदि एक वर्षा क्षेत्र बनता है तो यह लाइपेज गतिविधि का संकेत है। एस। ऑरियस के कुछ उपभेदों को लाइपेस सकारात्मक और अन्य को नकारात्मक माना जाता है।
इस घटना में कि एस ऑरियस लाइपेज पॉजिटिव है, काले या गहरे भूरे रंग की कॉलोनी के चारों ओर एक अपारदर्शी क्षेत्र देखा जाएगा, उसके बाद लेसितिण की क्रिया के कारण हल्का प्रभामंडल होगा।
इस माध्यम पर बढ़ने में सक्षम एस ऑरियस के अलावा अन्य बैक्टीरिया की कालोनियों में बिना किसी आसपास के प्रभामंडल वाले रंगहीन या भूरे रंग की कॉलोनियां विकसित होंगी।
एटिपिकल ब्लैक कॉलोनियों को रंगहीन सीमा के साथ या उसके बिना भी देखा जा सकता है, लेकिन हल्के प्रभामंडल के बिना। इन कॉलोनियों को ध्यान में नहीं रखा जाना चाहिए, वे एस ऑरियस के अनुरूप नहीं हैं।
तैयारी
अंडे की जर्दी पायस
एक ताजा चिकन अंडे लें, इसे अच्छी तरह से धोएं और इसे 2 से 3 घंटे के लिए 70% शराब में रखें। फिर अंडे को अयोग्य रूप से खोला जाता है और सफेद रंग को सावधानी से जर्दी से अलग किया जाता है। बाद में, 50 मिलीलीटर जर्दी ली जाती है और 50 मिलीलीटर बाँझ शारीरिक समाधान के साथ मिलाया जाता है।
पोटेशियम टेल्यूराइट 1% w / v
कुछ वाणिज्यिक घर 1% पोटेशियम टेल्यूराइट बेचने के लिए तैयार हैं। मध्यम जमने से पहले इसे माध्यम में जोड़ा जाता है।
प्रयोगशाला में इस घोल को तैयार करने के लिए, पोटेशियम टेलराइट का 1.0 ग्राम वजन और पानी के एक हिस्से में घोल दिया जाता है। इसके बाद, पानी की मात्रा 100 मिलीलीटर तक पहुंचने तक पूरी हो जाती है। निस्पंदन विधि द्वारा समाधान को निष्फल किया जाना चाहिए।
संस्कृति माध्यम तैयार करना
निर्जलित माध्यम का 60 ग्राम वजन और आसुत जल के 940 मिलीलीटर में भंग। लगभग 5-10 मिनट के लिए मिश्रण को बैठने दें।
विघटन प्रक्रिया में सुधार करने के लिए अक्सर मध्यम सरगर्मी करके गर्मी लागू करें। एक मिनट के लिए एक उबाल लाने के लिए। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव में बाँझ।
45 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक पहुंचने तक खड़े रहें और अंडे की जर्दी इमल्शन के 50 मिलीलीटर और 1% टेलराइट के 10 मिलीलीटर जोड़ें। अच्छी तरह से मिलाएं और बाँझ पेट्री डिश पर 15-20 मिलीलीटर डालें।
उपयोग करने तक रेफ्रिजरेटर में सॉल्वैंट्स और स्टोर में उलट, ऑर्डर को उलटने की अनुमति दें।
तैयार माध्यम का अंतिम पीएच 6.8 prepared 0.2 होना चाहिए।
एक नमूना बोने से पहले, कमरे के तापमान तक पहुंचने के लिए प्लेट की प्रतीक्षा करें। एक ड्रिग्ल्स्की स्पैटुला के साथ प्लेटों को सीढ़ियों से या सतह से बीजारोपण करके।
निर्जलित माध्यम का रंग हल्का तन है और तैयार माध्यम का रंग हल्का अम्बर है।
उपयोग
नैदानिक नमूने
नैदानिक नमूनों को सीधे प्लेट के एक छोर पर सामग्री के हिस्से का निर्वहन करते हुए बोया जाता है, और वहां से थकावट के बाद इसे छोड़ दिया जाता है। 35-37 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटे के लिए सेते हैं।
भोजन के नमूने
भोजन के नमूने का 10 ग्राम वजन और 0.1% पेप्टोन पानी के 90 मिलीलीटर में होमोजेनाइज करते हैं, यदि आवश्यक हो तो पतला तैयार किया जाता है। तैयार समाधान के 0.3 मिलीलीटर, और एक Drigalski रंग के साथ सतह पर बीज के साथ तीन प्रतियों में प्लेटों को इंजेक्ट करें। 35-37 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटे के लिए सेते हैं।
यह कार्यप्रणाली प्राप्त विशिष्ट उपनिवेशों को गिनने की अनुमति देती है और आदर्श होती है जब एस। ऑरियस की उपस्थिति 10 CFU प्रति g / ml नमूने के ऊपर संदिग्ध होती है।
यदि एस ऑरियस की मात्रा छोटी होने का संदेह है या वनस्पतियों के साथ बहुत कुछ है, तो यह कोशिश की जाती है कि 10% NaCl और 1% सोडियम पाइरूवेट के साथ trypticase सोया शोरबा में नमूना को समृद्ध किया जाए। यह एस। ऑरियस के विकास को बढ़ावा देगा और साथ-साथ वनस्पतियों के विकास को बाधित करेगा। टर्बिड ट्यूबों को बेयर्ड पार्कर एगर पर रखा जाता है।
पानी के नमूने
एक निष्फल वैक्यूम निस्पंदन प्रणाली में अध्ययन के 100 मिलीलीटर पानी को फ़िल्टर्ड किया जाता है, और बाद में 0.4 माइक्रोन माइक्रोप्रोसेस झिल्ली को एक बाँझ संदंश के साथ हटा दिया जाता है और एक बेयर्ड पार्कर प्लेट पर रखा जाता है। 35-37 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटे के लिए सेते हैं। यह तकनीक विशिष्ट एस ऑरियस कालोनियों की गिनती के लिए अनुमति देती है।
क्यूए
Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichocci coli ATCC 25922 या Proteus mirabilis ATCC 43071 जैसे ज्ञात उपभेदों का उपयोग बैरड पार्क की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है।
एस। ऑरियस एटीसीसी उपभेदों के मामले में, यह टेलराइट को कम करने के लिए जाना जाता है, और वे लाइपेस और लेसिथिनसे सकारात्मक हैं। इसलिए, एक संतोषजनक विकास होना चाहिए और एक काले केंद्र और एक रंगहीन सीमा के साथ उत्तल उपनिवेशों को विकसित करना चाहिए, जिसमें एक अपारदर्शी प्रभामंडल और एक हल्का बाहरी प्रभामंडल होता है।
इसके भाग के लिए, इस एपिडर्मिडिस को हल्के माध्यम के बिना, भूरे-भूरे से काले रंग की कॉलोनियों के साथ, इस माध्यम पर खराब रूप से विकसित होने की उम्मीद है।
ई। कोलाई और पी। मिराबिलिस के लिए यह पूरी तरह से या आंशिक रूप से बाधित होने की उम्मीद है। वृद्धि के मामले में, भूरे रंग के उपनिवेश एक अपारदर्शी क्षेत्र या हल्के प्रभामंडल के बिना विकसित होंगे।
सिफारिशें
-इस टेलाइट और अंडे की जर्दी को मिलाने के बाद मीडियम को गर्म नहीं करना चाहिए।
अंडे की जर्दी पायस की तैयारी और बीच में इसके अलावा संदूषण के लिए एक बहुत कमजोर कदम है। अत्यधिक सावधानी बरतनी चाहिए।
-अगर एस ऑरियस की विशिष्ट कालोनियों की उपस्थिति है, तो यह कहा जाता है कि उक्त तनाव पर कोगुलेज़ परीक्षण बढ़ाकर पुष्टि की जानी चाहिए।
-अगर कोगुलस के साथ संदिग्ध परिणाम हैं, तो अन्य पुष्टिकरण परीक्षणों को माउंट किया जाना चाहिए।
-बाहर काली कॉलोनियों के साथ ठेठ एस ऑरियस कालोनियों की उपस्थिति को भ्रमित न करने के लिए सावधान रहें।
संदर्भ
- विकिपीडिया योगदानकर्ता। बेयर्ड-पार्कर आगर। विकिपीडिया, एक निशुल्क विश्वकोश। 15 मार्च, 2017, 19:36 यूटीसी। पर उपलब्ध है: wikipedia.org/ 18 फरवरी, 2019 तक पहुँचा।
- बीडी प्रयोगशालाओं। बेयर्ड पार्कर आगर। 2006.Available पर: bd.com
- ब्रिटानिया प्रयोगशालाओं। बेयर्ड पार्कर एगर बेस। 2015.Available पर: britanialab.com
- फ्रांसिस्को सोरिया मेलगुइज़ो प्रयोगशालाएँ। 2009. बेयर्ड पार्कर आगर। पर उपलब्ध:
- ब्रिटानिया प्रयोगशालाओं। पोटेशियम टेलराइट। 2015.Available पर: britanialab.com
- भोजन संचालकों में नासोफरीज़ियल स्मीयर में अलारकोन-लावेन एम, ओयेरेजो सी, एस्कुडेरो सी, सेर्दा-लील एफ, वैलेंज़ुएला एफ। कैरोटोटॉजेनिक स्टैफिलोकोकस ऑरियस टाइप ए। रेव मेड चिली 2017; 145: 1559-1564
- वेनेजुएला के मानक वाचा 1292-89। (1989)। फूड्स। स्टैफिलोकोकस ऑरियस के अलगाव और गणना। यहाँ उपलब्ध है: sencamer.gob.ve