इंडो अगर या इंडो मध्यम एक ठोस मध्यम, अंतर और चयनात्मकता संस्कृति के कुछ डिग्री के साथ है। मूल सूत्र 1904 में एंडो द्वारा गैर-किण्वन बैक्टीरिया से लैक्टोज-किण्वन को अलग करने के लिए बनाया गया था। शुरुआत में इसे साल्मोनेला टाइफी के अलगाव के लिए डिजाइन किया गया था, लेकिन बाद में माध्यम का उद्देश्य वर्दी की तलाश में बदल गया।
एंडो अगर का सिद्धांत बना हुआ है, लेकिन इसके निर्माण में वर्षों में अनगिनत बदलाव हुए हैं। वर्तमान में, यह माध्यम पशु ऊतक, लैक्टोज, डिपोटेशियम हाइड्रोजन फॉस्फेट, सोडियम सल्फाइट, बेसिक फुचिन और अगार के पेप्टिक पाचन से बना है।
A: Virgin Endo Agar B: सीडेड एंडो आगर, अगर के बीच में आप ई। कोली स्ट्रेन के मेटलिक शाइन को नोटिस कर सकते हैं। स्रोत: A: Strolch1983 / B: लेनकाएम
माध्यम का मुख्य उपयोग एंटरोबैक्टीरियासी परिवार और अन्य करीबी परिवारों से संबंधित ग्राम नकारात्मक बेसिली के अलगाव और भेदभाव से जुड़ा हुआ है।
लंबे समय तक इसका उपयोग पानी, डेयरी और खाद्य नमूनों में कोलीफॉर्म की पहचान में किया गया था, लेकिन आज इस माध्यम का उपयोग दूसरों द्वारा समान कार्यों के साथ विस्थापित किया गया है। हालांकि, कुछ माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशालाएं नैदानिक उत्पत्ति के नमूनों से एंटरोबैक्टीरिया के अलगाव के लिए इस अगर का उपयोग करती हैं।
आधार
एंडो एगर में पेप्टोन होते हैं जो अमीनो एसिड, नाइट्रोजन, कार्बन और ऊर्जा के स्रोत के रूप में काम करते हैं, जो कि सूक्ष्मजीवों के विकास के लिए आवश्यक हैं।
दूसरी ओर, अगरर का थोड़ा सा चयनात्मक चरित्र सोडियम सल्फाइट और बुनियादी फ़्यूचिन के अतिरिक्त द्वारा प्रदान किया जाता है; दोनों घटक आंशिक रूप से या पूरी तरह से अधिकांश ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकते हैं।
विभेदक चरित्र किण्वित कार्बोहाइड्रेट की उपस्थिति से दिया जाता है, जो इस मामले में लैक्टोज और मूल फुकसिन है, जो पीएच संकेतक के रूप में भी कार्य करता है।
ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया जो इस अग्र पर बढ़ते हैं और लैक्टोज को किण्वित करने में सक्षम हैं, मजबूत गुलाबी कालोनियों का निर्माण करेंगे; Escherichia कोलाई के पैथोग्नोमोनिक होने के नाते एक इंद्रधनुषी हरे रंग की धात्विक चमक के साथ गहरे लाल कालोनियों का निर्माण। यह कार्बोहाइड्रेट किण्वन से एसिड के उच्च उत्पादन के कारण है।
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि उपनिवेशों के आसपास का माध्यम भी एक मजबूत गुलाबी रंग में बदल जाता है। जबकि गैर-लैक्टोज किण्वन ग्राम नकारात्मक छड़ें मध्यम या रंगहीन के समान हल्के गुलाबी रंग की होती हैं।
डीपोटेशियम हाइड्रोजन फॉस्फेट मध्यम के पीएच को संतुलित करता है और एगर एक घटक है जो ठोस स्थिरता प्रदान करता है।
तैयारी
एंडो अगर
निर्जलित माध्यम का 41.5 ग्राम वजन और आसुत जल के 1 लीटर में भंग। मध्यम भंग होने तक मिश्रण को लगातार सरगर्मी के साथ गरम करें। एक आटोक्लेव में 121 डिग्री सेल्सियस पर 15 एलबी दबाव पर 15 मिनट के लिए बाँझ करें।
आटोक्लेव से हटाते समय, लगभग 45-50 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ठंडा करने की अनुमति दें, परोसने से पहले होमोजिनाइज़ करने के लिए मिश्रण को हिलाएं। बाँझ पेट्री डिश में 20 मिलीलीटर डालो।
प्लेटों को प्लेट में जमा करने से पहले प्लेट में जमने, पलटने और स्टोर करने की अनुमति दें या डार्क पेपर से लपेटें। तैयार माध्यम को सीधी रोशनी से बचाना बहुत जरूरी है। एक सर्वोत्तम अभ्यास वह सटीक मात्रा तैयार करना है जिसकी आपको आवश्यकता होगी।
यदि एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाता है, तो प्लेटों को उपयोग करने से पहले गर्म होने की अनुमति दी जानी चाहिए।
मध्यम का पीएच 7.2 से 7.6 के बीच होना चाहिए और तैयार माध्यम का रंग हल्का गुलाबी है।
एम-एंडो अगर वेरिएंट
एंडो एगर (एम-एंडो) का एक और संस्करण है जो मैकार्थी, डेलाने और ग्रासो के फार्मूले का पालन करता है, जिसमें अधिक यौगिक होते हैं और तैयारी के रूप में भिन्न होता है।
इस प्रकार में शामिल हैं: लैक्टोज, ट्रिप्टोज, कैसिइन का एंजाइमैटिक डाइजेस्ट, एनिमल टिशू का एंजाइमेटिक डाइजेस्ट, सोडियम क्लोराइड, डिबासिक पोटैशियम फॉस्फेट, सोडियम सल्फाइट, यीस्ट एक्सट्रेक्ट, मोनोबैसिक पोटैशियम फॉस्फेट, बेसिक फ्युचिन, सोडियम डीऑक्सीकलेट, लॉरिल सल्फेट सोडियम और अगर।
इस मामले में, निर्जलित माध्यम के 51 ग्राम वजन और 20 मिलीलीटर इथेनॉल युक्त आसुत जल के 1 लीटर में निलंबित कर दिया जाता है।
मध्यम आंच पर पूरी तरह घुलने तक हिलाते हुए थोड़ा गरम करें। इसे ज़्यादा गरम नहीं किया जाना चाहिए और इसे ऑटोक्लेव नहीं किया जाना चाहिए। एक बार मिश्रण सजातीय होने के बाद, बाँझ पेट्री डिश में परोसें और जमने दें।
उपयोग
कुछ देशों में, यह अभी भी भोजन और पानी के नमूनों में कुल और फेकल कोलीफॉर्म की गिनती करने के लिए उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से फेक संदूषण के मुख्य संकेतक के रूप में एस्चेरिचिया कोलाई की उपस्थिति।
एम-एंडो आगर को कीटाणुशोधन और अपशिष्ट उपचार कार्यक्रमों की निगरानी और नियंत्रण के साथ-साथ पीने के पानी की गुणवत्ता के मूल्यांकन के लिए अमेरिकन पब्लिक हेल्थ एसोसिएशन (APHA) द्वारा अनुशंसित किया गया है।
सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि झिल्ली निस्पंदन है, 2 से 4 घंटे के लिए लॉरिल सल्फेट शोरबा के साथ नमूने को समृद्ध करने के बाद।
यह सबसे संभावित संख्या तकनीक (एमपीएन) द्वारा भोजन और पानी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में ईएमबी अगर के विकल्प के रूप में भी इस्तेमाल किया जा सकता है, विशेष रूप से पूर्ण पुष्टिवादी चरण में बादल ईसी शोरबा से ई कोलाई की उपस्थिति को पुष्टि करने के लिए।
क्यूए
ज्ञात या प्रमाणित नियंत्रण उपभेदों को तैयार एंडो एगर बैच की गुणवत्ता का आकलन करने के लिए बोया जाता है।
इस उद्देश्य के लिए इस्तेमाल किए जाने वाले उपभेदों में शामिल हैं: एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 11775, एंटरोबैक्टर क्लोकै एटीके 13047, क्लेबसेला निमोनिया एटी 13883, साल्मोनेला टाइफीमुरियम एटीसीसी 14028, एसीसीसीसी 222222, एसीसीसीसी 2222। ।
उपभेदों को थकावट से उगाया जाता है और एरोबायोसिस में 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है।
अपेक्षित परिणाम हैं:
- एस्चेरिचिया कोलाई के लिए: मजबूत लाल कालोनियों, धातु की चमक के साथ।
- ई। क्लोके और के। निमोनिया के लिए कॉलोनियों को गुलाबी म्यूकोइड होना चाहिए।
- एस। टाइफिमुरियम, एस। फ्लेक्सनेरी और पी। मिराबिलिस के मामले में, उपनिवेश आमतौर पर गुलाबी या बेरंग होते हैं।
- अंत में, ई। फेकलिस आंशिक रूप से बाधित होने की उम्मीद है, इसलिए इसकी वृद्धि बहुत छोटी, मजबूत गुलाबी कॉलोनियों के साथ खराब होनी चाहिए।
सीमाएं
-एंडो माध्यम में कम चयनात्मक शक्ति होती है, इसलिए, यह संभव है कि कुछ ग्राम सकारात्मक सूक्ष्मजीव जैसे कि स्टेफिलोकोकस, एंटरोकोकस और यहां तक कि खमीर भी बढ़ सकते हैं।
-अन्य बेसिली एंटरोबैक्टीरियासी परिवार से संबंधित नहीं है, इस माध्यम में विकसित हो सकता है, जैसे स्यूडोमोनास एसपी और एरोमोनस एसपी। इन उपभेदों की विशेषताएं रंगहीन अनियमित उपनिवेश हैं।
-यह तैयार माध्यम प्रकाश के प्रति बहुत संवेदनशील है, इसलिए, लंबे समय तक इसका संपर्क संकेतक प्रणाली को बिगड़ता है, अपरिवर्तनीय रूप से माध्यम को नुकसान पहुंचाता है।
-मध्यम के घटकों को कार्सिनोजेनिक माना जाता है, इसलिए सीधे संपर्क से बचा जाना चाहिए।
- निर्जलित माध्यम बहुत हीड्रोस्कोपिक है और इसे अपने मूल कंटेनर में कमरे के तापमान पर, कसकर बंद और शुष्क वातावरण में रखा जाना चाहिए।
संदर्भ
- बीडी प्रयोगशालाओं। एंडो आगर। 2013.Available पर: bd.com
- नियोजन प्रयोगशालाएँ। एम एंडो आगर। पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
- एंडो आगर। विकिपीडिया, एक निशुल्क विश्वकोश। 7 सितंबर 2017, 08:27 यूटीसी। 28 फरवरी 2019, 22:55। पर उपलब्ध: en.wikipedia
- MercK प्रयोगशाला। एंडो अगर। 2019। उपलब्ध नहीं है: merckmillipore.com
- तकनीकी शीट प्रयोगशालाएँ। एम-एंडो एगर लेस। 2015.Available पर: liofilchem.net