MACCONKEY AGAR: तर्क, तैयारी और उपयोग - जीवविज्ञान - 2025

MacConkey अगर एक ठोस माध्यम है जिसके ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया के अनन्य अलगाव की अनुमति देता है। इस कारण से, यह एक चयनात्मक माध्यम है और लैक्टोज किण्वन और गैर-किण्वन बेसिली के बीच भेद करने की भी अनुमति देता है, जो इसे एक अंतर माध्यम बनाता है। यह एक माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले संस्कृति मीडिया में से एक है।

इस माध्यम का उपयोग मुख्य रूप से एंटरोबैक्टीरियासी परिवार से संबंधित ग्राम नकारात्मक बेसिली के अलगाव के लिए किया जाता है, जिसमें अवसरवादी और एंटरोपैथोजेनिक प्रजातियां शामिल हैं।

MacConkey agar में दो प्रकार के बैक्टीरिया होते हैं। बाईं ओर लैक्टोज किण्वन कालोनियों, दाईं ओर गैर लैक्टोज किण्वन कालोनियों।

इसका उपयोग अन्य एंटेरिक बेसिली को अलग करने के लिए भी किया जा सकता है जो जठरांत्र संबंधी मार्ग में रहते हैं, लेकिन एंटरोबैक्टीरिया से संबंधित नहीं हैं, जैसे कि एरोमोनस एसपी, प्लेसीमोनस एसपी, अन्य।

अंत में, यह अन्य गैर-ग्लूकोज-किण्वन ग्राम-नेगेटिव बेसिली को अलग कर सकता है जो पर्यावरण, पानी या मिट्टी में पाए जाते हैं, लेकिन यह कभी-कभी अवसरवादी रोगजनकों जैसे स्यूडोमोनस एसपी, एसिनोटोबैक्टर्स एसपी, अल्कालजाइन्स एसपी, क्रोमोबैक्टीरियम वायलेसम, स्टेनोट्रॉफोमोनस माल्टोफिलिया और अन्य हो सकता है।

आधार

MacConkey agar

इस माध्यम की नींव को इसके घटकों के विवरण के माध्यम से समझाया जा सकता है, क्योंकि प्रत्येक का एक उद्देश्य है जो इसकी एक संपत्ति निर्धारित करता है।

पित्त लवण और क्रिस्टल वायलेट

इस अर्थ में, MacConkey agar की एक जटिल रचना है। सबसे पहले इसमें पित्त लवण और क्रिस्टल वायलेट शामिल हैं।

ये तत्व ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया और कुछ तेज़ ग्राम नकारात्मक बेसिली के विकास को रोकने के लिए जिम्मेदार हैं। बदले में, यह ग्राम नकारात्मक बेसिली के विकास का पक्षधर है जो इन पदार्थों से प्रभावित नहीं हैं। इसलिए यह एक चयनात्मक माध्यम है।

यह अन्य मीडिया की तुलना में थोड़ा सा चयनात्मक कहा जाता है जो ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को भी रोकता है और अधिकांश ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया को भी।

पेप्टोन्स, पॉलिपेक्टोन्स और लैक्टोज

इसमें ऐसे पदार्थ होते हैं जो इस वातावरण में विकसित होने वाले सूक्ष्मजीवों को आवश्यक पोषक तत्व प्रदान करते हैं, जैसे कि पेप्टोन, पॉलीपेक्टोन और लैक्टोज।

लैक्टोज माध्यम के लिए एक अंतर माध्यम होने के लिए महत्वपूर्ण बिंदु है, क्योंकि सूक्ष्मजीव जो कि लैक्टोज को किण्वित करने की क्षमता रखते हैं, वे मजबूत गुलाबी उपनिवेश विकसित करेंगे।

कुछ बैक्टीरिया धीरे-धीरे या कमजोर रूप से लैक्टोज को किण्वित कर सकते हैं, हल्के गुलाबी रंग की कॉलोनियों का विकास कर सकते हैं और लैक्टोज पॉजिटिव बने रह सकते हैं।

जो कि किण्वन नहीं करते हैं वे लैक्टोज ऊर्जा स्रोत के रूप में पेप्टोन का उपयोग करते हैं, अमोनिया का उत्पादन करते हैं, माध्यम को क्षारीय करते हैं। इस कारण से, उपनिवेशों की उत्पत्ति रंगहीन या पारदर्शी होती है।

PH संकेतक

रंग परिवर्तन एक अन्य आवश्यक यौगिक के माध्यम से प्राप्त किया जाता है जो मैककॉन्की अगर है। यह यौगिक पीएच संकेतक है, जो इस मामले में तटस्थ लाल है।

लैक्टोज का किण्वन मिश्रित एसिड के उत्पादन को उत्पन्न करता है। वे मध्यम को 6.8 से नीचे पीएच में अम्ल करते हैं।

यह पीएच संकेतक को एक गहरे गुलाबी रंग की ओर मुड़ने का कारण बनता है। अंतिम पीएच के आधार पर रंग की तीव्रता भिन्न हो सकती है।

आसुत जल, सोडियम क्लोराइड, और अगर

दूसरी ओर, इसमें आसुत जल और सोडियम क्लोराइड शामिल हैं जो मध्यम जलयोजन और आसमाटिक संतुलन प्रदान करते हैं। अंत में, माध्यम में अगर शामिल है, जो आधार है जो ठोस माध्यम की स्थिरता प्रदान करता है।

तैयार MacConkey agar माध्यम का अंतिम pH 7.1 key 0.2 तक समायोजित होना चाहिए।

तैयारी

MacConkey agar के एक लीटर के लिए, निर्जलित माध्यम का 50 ग्राम तौला जाना चाहिए, फिर एक फ्लास्क में रखा जाता है और एक लीटर आसुत जल में भंग होता है। खड़े होने के 10 मिनट के बाद इसे गर्म किया जाता है, 1 मिनट के लिए उबलने तक लगातार मिश्रण।

फ्लास्क को फिर आटोक्लेव में रखा जाता है और 20 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर निष्फल किया जाता है। समय के अंत में, इसे आटोक्लेव से हटा दिया जाता है और 45 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक पहुंचने तक ठंडा करने की अनुमति दी जाती है, बाद में एक लामिना का प्रवाह हुड के अंदर या बन्सेन बर्नर के सामने बाँझ पेट्री डिश में सेवा करने के लिए।

एक उलटे प्लेट धारक को जमने और स्टोर करने की अनुमति दें और उपयोग होने तक 2-8 डिग्री सेल्सियस पर रेफ्रिजरेटर में फ्रिज करें।

एक MacConkey agar प्राप्त करने के लिए जो प्रोटियस जीनस द्वारा निर्मित स्वारिंग प्रभाव को रोकता है, एक कम-नमक MacConkey agar का उपयोग किया जाता है।

पारंपरिक MacConkey agar का उपयोग

MacConkey Agar प्रयोगशाला में प्राप्त नैदानिक ​​नमूनों की बुवाई के लिए व्यवस्थित सभी संस्कृति मीडिया सेटों में शामिल है। यह खाद्य सूक्ष्म जीव विज्ञान और पर्यावरणीय सूक्ष्म जीव विज्ञान में भी उपयोगी है।

इस माध्यम में विकसित होने वाली ग्राम नकारात्मक छड़ की विविधता फेनोटाइपिक विशेषताओं को व्यक्त करती है जो प्रजातियों में विचारात्मक निदान करने में मदद करती है। उदाहरण के लिए उपनिवेशों का आकार, रंग, स्थिरता और गंध, कुछ ऐसी विशेषताएं हैं जो मार्गदर्शन कर सकती हैं।

इस माध्यम में, एस्चेरिचिया कोलाई, क्लेबसिएला एसपी और एंटरोबैक्टीरिया एसपी प्रजातियां मजबूत गुलाबी कालोनियों का निर्माण करती हैं, जो कि पित्त के एक क्षेत्र से घिरा हुआ है।

जबकि, Citrobacter Sp, Providencia sp, Serratia sp और Hafnia sp जैसे बैक्टीरिया 24 घंटे के बाद रंगहीन हो सकते हैं या 24 -48 घंटों में हल्के गुलाबी हो सकते हैं।

इसी तरह, जेनेरा प्रोटीन, एडवाडेसिएला, साल्मोनेला और शिगेला रंगहीन या पारदर्शी कालोनियों का निर्माण करते हैं।

MacConkey agar के अन्य संस्करण

MacConkey Agar के अन्य प्रकार हैं जिनके विशिष्ट उद्देश्य हैं। वे नीचे उल्लिखित हैं:

सोर्बिटोल के साथ मैककॉन्की अगर

इस माध्यम को एंटेरोचिया कोलाई उपभेदों के बाकी हिस्सों से एंटरोपैथोजेनिक स्ट्रेन (एंटरोहामोरेजिक एस्चेरिचिया कोलाई ओ 157: एच 7) को अलग करने के लिए डिज़ाइन किया गया था।

यह माध्यम सोर्बिटोल के लिए कार्बोहाइड्रेट लैक्टोज का आदान-प्रदान करता है। Enterohemorrhagic E. coli strains O157: H7 बाकी से अलग है क्योंकि वे किण्वन सोर्बिटोल नहीं लेते हैं और इसलिए पारदर्शी कालोनियां प्राप्त की जाती हैं, जबकि बाकी ई। कोलाई उपभेद किण्वन सोर्बिटोल और कालोनियों मजबूत गुलाबी होते हैं।

क्रिस्टल वॉयलेट के बिना MacConkey agar, और न ही नमक

यह आगर क्लासिक मैककोन्की अगर से अलग है, क्योंकि इसमें एक वायलेट क्रिस्टल नहीं है और ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया विकसित हो सकते हैं।

दूसरी ओर, नमक की अनुपस्थिति कुछ एंटिक बेसिली द्वारा उत्पादित अगर पर, जैसे कि प्रोटीअस जीनस के रूप में उत्पन्न होने वाले झुंड में उपस्थिति को रोकती है, और इस तरह ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया सहित मौजूद सभी जीवाणुओं को अलग करने की सुविधा प्रदान करती है।

सेफेरोझोन के साथ मैककॉन्की अगर

इस MacConkey Agar वैरिएंट को शुरुआत में Laribacter hongkongensis को अलग-थलग करने के लिए डिज़ाइन किया गया था और बाद में इसे Arcobacter butzleri के अलगाव के लिए उपयोगी पाया गया। दोनों थोड़ा घुमावदार ग्राम नकारात्मक छड़ें हैं जो सेफेरोफेजोन के लिए प्रतिरोधी हैं।

इन जीवाणुओं को हाल ही में एशियाई और यूरोपीय व्यक्तियों में गैस्ट्रोएंटेराइटिस और अधिग्रहित दस्त के कारण जोड़ा गया है, जो दो शक्तिशाली उभरते रोगजनकों के रूप में उभर रहे हैं।

एंटीबायोटिक जठरांत्र संबंधी मार्ग के साथ-साथ वनस्पतियों को बाधित करने की अनुमति देता है, जो इन जीवाणुओं के विकास का पक्षधर है, उन्हें किसी का ध्यान नहीं जाने से रोकता है, क्योंकि उन्हें बढ़ने के लिए 72 घंटे की आवश्यकता होती है।

MacConkey agar 10% v / v पर समुद्री जल से तैयार

यह संस्करण फिस्टल संदूषण के जीवाणु सेनेटरी संकेतक के मूल्यांकन के लिए उपयोगी है, जिसमें मनोरंजक नमकीन पानी (समुद्र तट और बे) में कुल कोलीफॉर्म और फेकल कोलीफॉर्म शामिल हैं।

कॉर्टेज़ एट अल ने 2013 में प्रदर्शित किया कि इस तरह से तैयार किए गए माध्यम खारे वातावरण में इन सूक्ष्मजीवों की वसूली को काफी बढ़ा देते हैं, इसकी तुलना में आसुत जल से तैयार मैककॉन्की अगर का उपयोग किया जाता है।

यह इस तथ्य के कारण है कि संशोधित माध्यम बैक्टीरिया की वृद्धि को उत्तेजित करता है जो शारीरिक रूप से विलंबता की स्थिति में हैं "व्यवहार्य लेकिन गैर-सांस्कृतिक", इसलिए वे पारंपरिक मीडिया में पुनर्प्राप्त करने योग्य नहीं हैं।

संदर्भ

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