- आधार
- रचना
- तैयारी
- अनुप्रयोग
- रक्त अगर की तैयारी के लिए एक आधार के रूप में
- बीजाणु बनाने वाले बैक्टीरिया के फैलाव को उत्तेजित करें
- तनाव का रखरखाव
- कॉलोनी गणना
- नैदानिक परीक्षण चला रहा है
- मनोरंजक खारे पानी (बीचेज) से मेसोफिलिक एरोबेस की रिकवरी
- संदर्भ
पोषक तत्व अगर एक गैर-चयनित मध्यम और कोई अंतर ठोस संस्कृति है। सभी प्रकार के बैक्टीरिया जो पोषण के दृष्टिकोण से मांग नहीं कर रहे हैं, इस माध्यम में बढ़ते हैं।
यह एक सरल माध्यम है और, इसके नाम के बावजूद, इसमें अन्य समान मीडिया की तुलना में कम पोषण मूल्य होता है, जैसे कि ब्रेन हार्ट इन्फ्यूजन एगर या ट्रायप्टिसेज़ सो एगर।
पोषक तत्व अगर पर कॉलोनी की गिनती
प्रयोगशाला में इसकी उपयोगिता बहुत विविध है। यह मुख्य रूप से उप-प्रजातियों के लिए उपयोग किया जाता है, उपभेदों को बनाए रखना, कॉलोनियों की गिनती करना, रक्त अगर तैयार करने के लिए एक आधार के रूप में, दूसरों के बीच में।
इसी तरह, अपने हल्के बेज रंग के कारण, कुछ जीवाणु उपभेदों द्वारा उत्पन्न पिगमेंट का उत्पादन असाधारण रूप से प्रतिष्ठित किया जा सकता है, जैसे कि स्यूडोमोनास एरुगिनोसा का हरा रंगद्रव्य, कमरे के तापमान पर सेरेशिया मार्सेकेन्स द्वारा निर्मित ईंट लाल रंगद्रव्य, स्टैफिलोकोकस का सुनहरा पीला वर्णक। aureus, दूसरों के बीच में।
इसके अलावा, यह बाजार में मिलने वाली सबसे सस्ती मीडिया में से एक है।
आधार
जैसा कि पहले ही ऊपर उल्लेख किया गया है, यह एक बहुत ही सरल माध्यम है जो प्रतिबंध के बिना और जटिल प्रतिक्रियाओं के बिना बैक्टीरिया के विकास के लिए पोषक तत्व प्रदान करने पर निर्भर करता है।
जैसा कि माध्यम पारभासी है, यह गहराई से बीजारोपण विधि द्वारा उपनिवेशों की गिनती के लिए आदर्श है।
रचना
यह मुख्य रूप से मांस के अर्क या खमीर निकालने, पेप्टोन या जिलेटिन अग्नाशयी पाचन, अगर-अगर, सोडियम क्लोराइड और आसुत जल से बना है।
मांस या खमीर निकालने और पेप्टोन कार्बन और खनिजों (नाइट्रोजन, फास्फोरस और सल्फर) के आवश्यक स्रोतों का प्रतिनिधित्व करते हैं, जो कि ऊर्जा और विकास कारकों के स्रोत के रूप में बैक्टीरिया द्वारा उपयोग किया जाएगा।
इसी तरह, अगर-अगार जिलेटिन की जगह लेने के लिए सभी ठोस संस्कृति मीडिया का आधार है, जो कि रॉबर्ट कोच द्वारा अपने मीडिया को ठोस स्थिरता देने के लिए इस्तेमाल किया गया पहला आधार यौगिक था।
आगर एक पॉलीसेकेराइड है जो गैलेक्टोज, गैलेक्टोमेन्नन, अगारोसे और एग्रोपेक्टिन से बना है। यह 40 ° C पर सेट होता है और 100 ° C के करीब पिघलता है।
अपने हिस्से के लिए, सोडियम क्लोराइड बैक्टीरिया के विकास के लिए आवश्यक ऑस्मोलैरिटी के साथ माध्यम प्रदान करता है।
अंत में, पानी lyophilized यौगिकों को हाइड्रेट और भंग करने का कार्य करता है। तटस्थ पीएच में समायोजित आसुत जल का उपयोग किया जाना चाहिए। नल के पानी का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए क्योंकि इसमें कैल्शियम और मैग्नीशियम होते हैं जो मध्यम में फॉस्फेट के साथ प्रतिक्रिया कर सकते हैं और अघुलनशील लवण बनाते हैं।
तैयारी
एक लीटर पोषक तत्व अगर के लिए, निर्जलित माध्यम के 31 ग्राम का वजन किया जाना चाहिए। इसे कुप्पी में रखें और आसुत पानी के एक लीटर में भंग करें। 5 मिनट खड़े होने के बाद, एक गर्मी स्रोत पर गर्म करें और 1 या 2 मिनट तक उबलने तक लगातार मिलाएं।
संस्कृति माध्यम तैयार करना।
फ्लास्क को फिर एक आटोक्लेव में रखा जाता है और 20 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर निष्फल किया जाता है।
आटोक्लेव में बंध्याकरण
समय के अंत में, इसे आटोक्लेव से हटा दिया जाता है और एक लामिना का प्रवाह हुड या बेंसन बर्नर का उपयोग करके बाँझ पेट्री डिश में परोसा जाता है।
यदि पेट्री डिश डिस्पोजेबल (प्लास्टिक) हैं, तो मध्यम को 50 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर वितरित किया जाना चाहिए, ताकि उन्हें अत्यधिक गर्मी से विकृत होने से बचाया जा सके।
उल्टे प्लेट धारक पर जमने और स्टोर करने की अनुमति दें और उपयोग करने तक 2-8 डिग्री सेल्सियस पर सर्द करें।
बीजों को बोने से पहले तड़का लगाना चाहिए। यदि वे दूषित या निर्जलित हैं, तो पोषक अगर प्लेटों का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए।
तैयार माध्यम का पीएच 7.3 medium 0.2 तक समायोजित किया जाना चाहिए।
अनुप्रयोग
यह माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में उपयोग किया जाने वाला सबसे सरल संस्कृति माध्यम है। गैर-मांग वाले जीवाणुओं की वृद्धि के लिए इसका सूत्रीकरण उत्कृष्ट है।
इसके मुख्य उपयोग नीचे दिए गए हैं:
रक्त अगर की तैयारी के लिए एक आधार के रूप में
इस माध्यम का उपयोग कभी-कभी रक्त एगर तैयार करने के लिए एक आधार के रूप में किया जाता है, हालांकि यह सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला आधार नहीं है।
बीजाणु बनाने वाले बैक्टीरिया के फैलाव को उत्तेजित करें
यह संस्कृति माध्यम विशेष रूप से बेसिलस एसपी जैसे बीजाणु बनाने वाले जीवाणुओं को उत्तेजित करने के लिए उपयोगी है।
इसके लिए, एरोबिओसिस में 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए बैसिलस जीनस का एक स्ट्रेन बोया और ऊष्मायन किया जाता है। एक बार जब कॉलोनियां बढ़ जाती हैं, तो प्लेट को तापमान तनाव के अधीन किया जाता है, अर्थात, ओवन का तापमान 44 डिग्री सेल्सियस तक बढ़ जाता है और 24 घंटे के लिए छोड़ दिया जाता है या 24 घंटे के लिए रेफ्रिजरेटर में रखा जाता है।
समय के अंत में, कल्चर के स्मीयर बनाये जाते हैं और उन्हें ग्राम के दाग के साथ या शैफेर-फुल्टन बीजाणु के दाग के साथ दाग दिया जाता है। एंडोस्पोरस (बेसिलस के अंदर बीजाणु) और एक्सोस्पोर्स (बैसिलस के बाहर बीजाणुओं) के साथ बेसिली उनमें देखी जाएगी।
तनाव का रखरखाव
अनुसंधान कार्य के लिए या शिक्षण प्रथाओं की तैयारी के लिए बैक्टीरिया बैंक (बैक्टीरियोटेका) का उपयोग करने के लिए कुछ शोध या विश्वविद्यालय शिक्षण सहायता प्रयोगशालाओं को यथासंभव नैदानिक महत्व के व्यवहार्य बैक्टीरिया को बनाए रखने की आवश्यकता होती है। छात्र इन सूक्ष्मजीवों में हेरफेर करना और पहचानना सीखेंगे।
पोषक तत्व अगर, साथ ही मस्तिष्क हृदय जलसेक अगर, इस उद्देश्य के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। अगर को तैयार किया जाता है, एक बैक्लाइट ढक्कन के साथ ट्यूबों में डाला जाता है और एक आधार पर झुका जाता है, इस तरह से कि एगर तल पर एक ब्लॉक और सतह पर एक बेवल बनाने (ठोस चोंच) को जमता है।
प्रत्येक ट्यूब को बीज और तारीख के लिए बैक्टीरिया के नाम के साथ लेबल किया जाता है। प्रत्येक बैक्टीरिया को बेवल पर बीज दिया जाएगा और 24 घंटों के लिए ऊष्मायन किया जाएगा। एक बार जब कॉलोनियां बढ़ जाती हैं, तो ट्यूब को कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जाता है।
बैक्टीरियोटेका को 1 से 3 महीने तक नवीनीकृत किया जाना चाहिए, ताकि संदूषण और माध्यम के निर्जलीकरण से बचा जा सके और साथ ही साथ बैक्टीरिया की मृत्यु भी हो सके।
इस तरह से केवल अचार रहित बैक्टीरिया को बनाए रखा जा सकता है।
कॉलोनी गणना
यद्यपि कॉलोनियों की गिनती के लिए विशेष साधन हैं, जैसे कि मानक गिनती अगर, पोषक तत्व अगर इस उद्देश्य के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, या तो एक ड्रिग्ल्स्की स्पैटुला के साथ सतह बोने से या गहराई से। इस कारण से यह भोजन और पानी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में बहुत उपयोगी है।
नैदानिक परीक्षण चला रहा है
क्योंकि यह एक ऐसा माध्यम है जिसमें रक्त, या कोई अन्य योजक नहीं होता है, यह उत्प्रेरक परीक्षण करने के लिए इस माध्यम पर उपनिवेशों को लेने के लिए आदर्श है।
इसी तरह, इसके हल्के रंग के कारण, बिना किसी रुकावट के, अगर के बीज वाले क्षेत्र पर सीधे ऑक्सीडेज परीक्षण करने का संकेत मिलता है।
मनोरंजक खारे पानी (बीचेज) से मेसोफिलिक एरोबेस की रिकवरी
समुद्र के पानी में मेसोफिलिक एरोबेस के मूल्यांकन के लिए 10% समुद्री जल से तैयार पोषक तत्व अगर है।
इस तरह, इन सूक्ष्मजीवों के साथ पानी के दूषित होने के वास्तविक स्तर की सराहना की जा सकती है, क्योंकि इस प्रकार के नमूनों में परिणाम को ओवरलैप किया जाता है जब पारंपरिक तरीके से तैयार किए गए संस्कृति मीडिया का उपयोग किया जाता है।
यह कॉर्टेज़ एट अल द्वारा प्रदर्शित किया गया था। 2013 में एक शोध कार्य में।
इसे इस तरह के अचानक परिवर्तन के कारण समझाया जा सकता है कि बैक्टीरिया एक अल्प-नमकीन वातावरण से कम नमक वाले वातावरण में जाते हैं, इसलिए सूक्ष्मजीव एक सुस्ती की स्थिति में प्रवेश करते हैं जिसमें वे व्यवहार्य होते हैं, लेकिन खेती योग्य नहीं होते हैं।
संदर्भ
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