आलू डेक्सट्रोज अगर: औचित्य, तैयारी और उपयोग - जीवविज्ञान - 2025

आलू अगर डेक्सट्रोज एक मध्यम, ठोस गैर है - चयनात्मक पोषक तत्व संस्कृति। बैक्टीरियल और फंगल प्रजातियां इसमें बढ़ सकती हैं, लेकिन इसका उपयोग विशेष रूप से फिलामेंटस कवक और यीस्ट के अलगाव के लिए किया जाता है। इसे अंग्रेजी अभिव्यक्ति आलू डेक्सट्रोज एगर के लिए पीडीए माध्यम के रूप में भी जाना जाता है।

यह विशेष रूप से फाइटोपैथोजेनिक कवक के अलगाव के लिए उपयोगी है, अर्थात, जो पौधों को प्रभावित करते हैं। संक्रमित सब्जियों से नमूनों को बोने के लिए, अन्य साधनों जैसे कि साबौद अगार या माल्टा-अगर का उपयोग किया जा सकता है, हालांकि, नियमित उपयोग के लिए, आलू का डेक्सट्रोज़ अगर पसंद किया जाता है, क्योंकि अधिक से अधिक स्पोरुलेशन प्राप्त किया जाता है।

आलू डेक्सट्रोज एगर पर एस्परगिलस नाइगर और सिनेमेस क्रमशः। स्रोत: एलेक्सेटरेलियन 006 अंग्रेजी विकिपीडिया / जोसेलरोज में

यह भी सौंदर्य प्रसाधन, दवा उत्पादों और कुछ डेयरी खाद्य पदार्थों के नमूनों में कवक कालोनियों की गिनती के लिए प्रयोग किया जाता है। इसी तरह, यह डर्मेटोफाइट्स की तलाश में त्वचा के स्क्रैपिंग के नमूनों की बुवाई के लिए उपयुक्त है, जो कि इस माध्यम में बहुत अच्छी तरह से विकसित होते हैं, जो उनके लक्षण वर्णक विकसित करते हैं।

आलू डेक्सट्रोज माध्यम प्रयोगशाला में तैयार करने के लिए एक बहुत ही सरल और आसान माध्यम है। इसमें शामिल है, जैसा कि इसके नाम का अर्थ है, आलू, डेक्सट्रोज़ और अगर-अगर का जलसेक। इसके अतिरिक्त, बैक्टीरिया के विकास को रोकने और फंगल प्रजातियों के लिए चयनात्मकता को बढ़ाने के लिए निरोधात्मक पदार्थों को जोड़ा जा सकता है।

आधार

आलू डेक्सट्रोज एगर एक संस्कृति माध्यम है जो फिलामेंटस कवक और खमीर के विकास के लिए आवश्यक पोषण तत्व प्रदान करता है।

ग्लूकोज के साथ आलू के जलसेक का संयोजन कवक के संतोषजनक विकास के लिए सही ऊर्जा स्रोत प्रदान करता है। जबकि आगर वह है जो माध्यम को एकरूपता प्रदान करता है।

अकेले माध्यम बैक्टीरिया के विकास को रोकता नहीं है, इसलिए यह एक गैर-चयनात्मक माध्यम है। इसे चयनात्मक बनाने के लिए, इसे निरोधात्मक पदार्थों जैसे टार्टरिक एसिड या एंटीबायोटिक दवाओं की आवश्यकता होती है।

तैयारी

-घरेलू (नॉन-कमर्शियल) आलू डेक्सट्रोज अगर की तैयारी

पेट्री डिशेस

इसे निम्नानुसार तैयार किया जाता है:

पहली जगह में, आलू को बहुत अच्छी तरह से धोया जाता है, जिससे उनके पास मिट्टी होती है। वे सब कुछ और खोल के साथ पतली स्लाइस में काट रहे हैं। 200 ग्राम आलू को तौला जाता है और आधे घंटे के लिए एक लीटर आसुत पानी में उबाला जाता है।

समय के अंत में, एक चीज़क्लोथ के माध्यम से सभी तैयारी को फ़िल्टर या तनाव दें।

प्राप्त तरल आसुत जल के साथ एक लीटर तक पूरा हो गया है। आगर-अगार का 20 ग्राम और डेक्सट्रोज का 20 ग्राम जलसेक में मिलाया जाता है, अच्छी तरह से मिलाया जाता है और 15 मिनट के लिए 15 पाउंड दबाव में 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव होता है।

50 ° C तक ठंडा होने दें और बाँझ पेट्री डिश में परोसें। तैयार किए गए प्लेटों को एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाता है।

Wedges

आलू डेक्सट्रोज अगर वेजेज भी तैयार किया जा सकता है।

इस मामले में, आटोक्लेव में स्टरलाइज़ करने से पहले, माध्यम के 12 से 15 मिलीलीटर ट्यूबों में रखे जाते हैं, बाद में उन्हें आटोक्लेव किया जाता है और जब वे छोड़ते हैं तब तक विशेष समर्थन पर झूठ होता है जब तक कि यह जम नहीं जाता। एक रेफ्रिजरेटर में स्टोर करें।

मध्यम 5.6, 0.2 के पीएच पर रहता है, हालांकि, कुछ प्रयोगशालाएं बैक्टीरिया के विकास को रोकने के लिए पीएच को 3.1 से order 0.1 तक कम करने के लिए 10% टैटारिक एसिड जोड़ती हैं।

इसी अर्थ में, अन्य प्रयोगशालाएं इसे कवक की खेती के लिए चयनात्मक बनाने के लिए और बैक्टीरिया के विकास को रोकने के लिए एंटीबायोटिक दवाओं को जोड़ना पसंद करती हैं।

-आयोजित आलू डेक्सट्रोज अगर की तैयारी

व्यावसायिक रूप से उपलब्ध निर्जलित माध्यम के 39 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। इसे 5 मिनट के लिए आराम करने दें।

मिश्रण पूरी तरह से भंग होने तक लगातार सरगर्मी के साथ गरम किया जाता है। इसके बाद, यह 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर एक आटोक्लेव में निष्फल है।

प्लेट्स या वेजेज तैयार किए जा सकते हैं। जैसा कि ऊपर वर्णित है आगे बढ़ें।

पीएच 5.6। 0.2 पर रहता है। यदि 3.1 का पीएच वांछित है, तो प्लेटों की सेवा करने से पहले बाँझ 20% टार्टरिक एसिड के 14 मिलीलीटर को जोड़ा जाना चाहिए।

कच्चा माध्यम बेज होता है और तैयार माध्यम हल्का सा एम्बर होता है जिसमें थोड़े बादल छाए रहते हैं या ऑप्सेंटेंट दिखाई देते हैं।

अनुप्रयोग

आलू डेक्सट्रोज अगर पर पौधे के नमूने बुवाई के लिए प्रक्रिया

-फली हुई पत्तियों से

पत्तियों को टुकड़ों में काट दिया जाता है।

50% अल्कोहल के साथ 50 सीसी ग्लास में, पत्तियों के टुकड़ों (दाग और स्वस्थ टुकड़े) को रखें, सतह को 20 से 30 सेकंड के लिए कीटाणुरहित करें। शराब को फेंक दें और 40 से 50 सेकंड के लिए 20% सोडियम हाइपोक्लोराइट जोड़ें यदि वे पतले पत्ते हैं और छाल और लॉग होने पर समय 80 सेकंड तक बढ़ाएं।

सोडियम हाइपोक्लोराइट को त्यागें और कीटाणुरहित टुकड़ों को एक बाँझ संदंश के साथ लें और उन्हें मध्यम (अधिकतम 10 टुकड़े) की सतह पर रखें। दिनांक निर्धारित करें और 20-30 डिग्री सेल्सियस पर सेते हैं।

फल और कंद के लिए

यदि फल मांसल है, तो कवक से प्रभावित फल खोलें और रोगग्रस्त और स्वस्थ दोनों हिस्सों से बाँझ स्केलपेल के साथ टुकड़े लें, और उन्हें अगर की सतह पर रखें।

यदि फल खट्टे होते हैं, जैसे कि नींबू या नारंगी, तो इसे खोलना चाहिए और इसके बीज बोए जाने चाहिए।

जब फल की सतह प्रभावित होती है और बीजाणु देखे जाते हैं, तो आदर्श प्लेट पर झंझरी विधि का उपयोग करना है; यह एक निष्फल और ठंडा "एल" के आकार वाले स्पैटुला के साथ बीजाणुओं को छूता है, और फिर अगर पर 2 से 3 बार ज़िगज़ैग सीडिंग करता है।

-नए अनाज के लिए

पत्तियों में वर्णित के रूप में उन्हें कीटाणुरहित किया जाता है और बाद में अगर पर रखा जाता है।

-उपाय शाखाओं और उपजी के लिए

छाल को काट दिया जाता है और बाद में स्वस्थ और रोगग्रस्त भाग के टुकड़े ले लिए जाते हैं और सीधे अगर पर बोए जाते हैं।

बीज वाली प्लेटों को 72 घंटे के लिए 20-30 डिग्री सेल्सियस पर एरोबिक रूप से ऊष्मायन किया जाता है।

आलू डेक्सट्रोज अगर पर त्वचा, बाल या नाखून पैमाने के नमूने बुवाई के लिए प्रक्रिया

डर्मेटोफाइट्स की तलाश में प्रभावित बाल, त्वचा के तराजू या नाखूनों को काटने के लिए नमूना को नंबर 11 स्केलपेल ब्लेड का उपयोग करना चाहिए। नमूना लेने से पहले, क्षेत्र को 70% शराब के साथ कीटाणुरहित किया जाना चाहिए।

-संकट का नमूना

पपड़ीदार घावों में, घाव के किनारे को स्क्रैप किया जाना चाहिए, क्योंकि कवक के वहां पाए जाने की अधिक संभावना है।

एक्सयूडेटिव घावों में, नमूना एक सूखे या गीले झाड़ू के साथ लिया जाता है। आलू डेक्सट्रोज अगर या सबौरड अगार पर तुरंत बोएं। परिवहन के साधनों से बचें।

नमूने का एक अन्य तरीका मारियाट और अदन कैम्पोस की कालीन वर्ग तकनीक के माध्यम से है। इस मामले में, प्रभावित क्षेत्र को बाद की खेती के लिए बाँझ ऊन के एक टुकड़े के साथ 5 बार रगड़ दिया जाता है।

नमूना सीधे संस्कृति माध्यम में रखा जा सकता है।

-हेयर सैंपल

पैथोलॉजी के आधार पर, प्रभावित भाग को काट दिया जा सकता है या उखाड़ा जा सकता है। नमूना को संस्कृति माध्यम में रखें।

-नमूना नमूना

प्रभावित नाखून का एक विशिष्ट हिस्सा स्क्रैप या कट किया जा सकता है। यह चोट के प्रकार पर निर्भर करेगा।

कल्चर के माध्यम से कवक के संपर्क की संभावना को बढ़ाने के लिए बुवाई से पहले नमूना को 1 मिमी टुकड़ों में काटें।

पहचान की प्रक्रिया

कॉलोनियों के मैक्रोस्कोपिक अध्ययन (उपस्थिति, रंग, स्थिरता, विकास की डिग्री) को पूरा करने के लिए प्लेट में प्राप्त कालोनियों को आलू डेक्सट्रोज अगर युक्त ट्यूबों में अलग किया जाता है।

सूक्ष्म अध्ययन (संरचनाओं और उनके संरचनाओं का अवलोकन) माइक्रोकल्चर या स्लाइड और स्लाइड के बीच माइक्रोस्कोप के तहत प्रत्यक्ष अवलोकन द्वारा किया जा सकता है।

कॉलोनी गणना

इस माध्यम का उपयोग पौधे, भोजन, कॉस्मेटिक या दवा के नमूनों में मौजूद कवक और खमीर के भार को निर्धारित करने के लिए भी किया जा सकता है। इस प्रयोजन के लिए, एंटीबायोटिक दवाओं के साथ पूरक आलू डेक्सट्रोज अगर का उपयोग किया जाता है, जैसे: (क्लोरैम्फेनिकॉल, क्लोरोटेट्रासाइक्लिन या दोनों)।

नमूने के 1 मिलीलीटर डालो - अधिमानतः पतला - एक बाँझ और खाली पेट्री डिश में, फिर आलू डेक्सट्रोज अगर का एक पैड पिघला और 45 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा करने की अनुमति दें। पेट्री डिश पर डालो और homogenized तक बारी बारी से। इसे तब तक आराम करने दें जब तक यह जम न जाए।

5 से 7 दिनों या उससे अधिक के लिए 20-25 डिग्री सेल्सियस (नए नए साँचे) या 30-32 डिग्री सेल्सियस (यीस्ट) पर एरोबिक सेते हैं, जो कवक के प्रकार और नमूने के प्रकार पर निर्भर करता है। दो प्लेटों का उपयोग दोनों तापमान रेंज में सेते हैं।

भोजन के नमूने में फंगल कालोनियों की गिनती। आलू डेक्सट्रोज अगर एंटीबायोटिक दवाओं के साथ पूरक। स्रोत: Pxhere.com फोटो / 777267

कवक उपभेदों का रखरखाव

आलू Dextrose Agar कई वर्षों के लिए व्यवहार्य कवक उपभेदों को बनाए रखने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।

इसके लिए, कवक आलू डेक्सट्रोज अगर की कड़ाही पर उगाया जाता है और एक बार कवक बड़ा हो गया है, यह खनिज तेल के साथ कवर किया गया है। तेल को 45 मिनट के लिए एक आटोक्लेव में निष्फल किया जाना चाहिए, और लगभग 300 से 330 साइबोल्ट का चिपचिपापन होना चाहिए। तेल बेवेल की नोक से 1 से 2 सेमी ऊपर होना चाहिए।

क्यूए

तैयार किए गए प्रत्येक बैच से, 1 या 2 प्लेटें लें और उन्हें 25 ° C पर 48 घंटों के लिए या 20 ° C पर 96 घंटों के लिए सेते हैं। एक अच्छा बाँझपन नियंत्रण वह होता है जिसमें कॉलोनी का विकास नहीं होता है।

ज्ञात या प्रमाणित नियंत्रण उपभेदों का भी उपयोग किया जा सकता है जैसे:

Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763, Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus brasiliensis ATCC 16404, Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533। सभी मामलों में अच्छी वृद्धि की उम्मीद है।

संदर्भ

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