TCBS अगर अत्यधिक चयनात्मक और अंतर ठोस संस्कृति का एक साधन, अलगाव और जीनस विब्रियो, विशेष रूप से विब्रियो कॉलेरी, वी parahaemolyticus और वी vulnificus इस तरह के प्रमुख रोगज़नक़ों के रूप में की बैक्टीरिया की खेती के लिए प्रयोग किया जाता है।
संक्षिप्त परिचय TCBS थियोसल्फेट साइट्रेट पित्त सुक्रोज के लिए है। इस आगर को विब्रियो के लिए एक चुनिंदा माध्यम के रूप में भी जाना जाता है। मूल सूत्र नाकानिशी द्वारा बनाया गया था और बाद में कोबायाशी द्वारा संशोधित किया गया था।
व्यावसायिक टीसीबीएस मध्यम और टीसीबीएस अगर प्लेट विबिरो हैजे के साथ बीजित है। स्रोत: फोटो 1: लेखक एमएससी द्वारा लिया गया। मारीलासा गिल / फोटो 2: मिक्रोआओ, जेजेएमएमसी, दावणगेरे, कर्नाटक, भारत
यह यीस्ट एक्सट्रैक्ट, मीट पेप्टोन, ट्रिप्टीन, सोडियम साइट्रेट, सोडियम थायोसल्फेट, ऑक्स पित्त, सुक्रोज, सोडियम क्लोराइड, फेरिक साइट्रेट, ब्रोमोथाइमॉल ब्लू, थाइमोल ब्लू और अगर से बना है।
यह रचना पानी, भोजन और मल के नमूनों से विब्रियो प्रजातियों के पर्याप्त विकास की अनुमति देती है; विब्रियो होलिसी के अपवाद के साथ, जो इस माध्यम पर नहीं बढ़ता है। इसके अलावा, टीसीबीएस माध्यम बैक्टीरिया के साथ अन्य, विशेष रूप से कोलीफॉर्म के विकास को रोकने में सक्षम है।
विब्रियो जीनस की कुछ प्रजातियों द्वारा उत्पादित गंभीर गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल और अतिरिक्त आंतों की समस्याओं के कारण, इसका निदान बहुत महत्वपूर्ण है। समुद्र या प्रदूषित पानी से कच्चे या अधपके खाद्य पदार्थ खाने से मनुष्य मुख्य रूप से संक्रमित होता है, लेकिन घाव के संक्रमण से भी।
इस वजह से, क्लिनिकल प्रयोगशालाओं को विशेष रूप से चावल के पानी की उपस्थिति के साथ तरल मल के नमूनों के स्टूल कल्चर अध्ययन में टीसीबीएस अगर शामिल करना चाहिए। खासकर अगर रोगी समुद्र के पानी के संपर्क में है या शेलफिश या मछली का सेवन कर रहा है।
आधार
खमीर निकालने, मांस पेप्टोन और ट्रिप्टीन इस माध्यम के पोषण स्रोत हैं। हालांकि, अधिकांश बैक्टीरिया के लिए टीसीबीएस एगर एक अमानवीय माध्यम है।
इसकी उच्च चयनात्मकता सोडियम साइट्रेट और बैल पित्त के अतिरिक्त द्वारा दी गई है; दोनों निरोधात्मक एजेंट हैं जो मध्यम को एक क्षारीय पीएच भी प्रदान करते हैं, साथ में वनस्पतियों के विकास को प्रतिबंधित करते हैं और अन्य प्रजातियों में वी। कोलेरा के विकास का पक्ष लेते हैं। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि विब्रियो कोलेरी अम्लता के प्रति बहुत संवेदनशील है।
इसके भाग के लिए, सोडियम क्लोराइड आसमाटिक रूप से माध्यम को संतुलित करता है। इसके अलावा, इसकी सांद्रता अधिक होने के कारण, यह एक निरोधात्मक एजेंट के रूप में भी काम करता है, जो हलोफिलिक बैक्टीरिया के विकास के पक्ष में है।
सुक्रोज किण्वित चीनी है, जो ब्रोमोथाइमॉल ब्लू और थाइमोल ब्लू पीएच इंडिकेटर्स के साथ मिलकर इस अंतर चरित्र को जन्म देती है। इस कारण से, इस माध्यम के साथ गैर-किण्वन से सुक्रोज किण्वन उपभेदों को अलग करना संभव है।
सुक्रोज किण्वन उपभेदों की कालोनियों पीले रंग में विकसित होती हैं और अम्ल उत्पादन के कारण मध्यम से हरे से पीले रंग में बदल जाती हैं। गैर-किण्वक पारभासी होते हैं और मध्यम मूल रंग (हरा) रहता है।
इसी तरह, इस माध्यम में एक विकासशील एजेंट के रूप में सल्फर और फेरिक साइट्रेट के स्रोत के रूप में सोडियम थायोसल्फेट शामिल हैं। दोनों हाइड्रोजन सल्फाइड (रंगहीन गैस) पैदा करने में सक्षम बैक्टीरिया दिखाते हैं। एच 2 एस थियोसल्फेट से बनता है और इसके बाद फेरिक साइट्रेट के साथ एक दृश्यमान काले अवक्षेप रूपों के साथ प्रतिक्रिया करता है।
अंत में, अगर वह माध्यम है जो ठोस स्थिरता प्रदान करता है।
तैयारी
निर्जलित माध्यम का 89 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। हीटिंग और लगातार सरगर्मी से विघटन में मदद करें। मिश्रण को 2 मिनट तक उबाला जा सकता है।
यह माध्यम स्वावलंबी नहीं है। घुलने के बाद, इसे सीधे बाँझ प्लेटों पर परोसा जाता है। जब वे जम जाते हैं, तो उन्हें प्लेटलेट्स पर उल्टे तरीके से व्यवस्थित किया जाता है और उपयोग करने तक रेफ्रिजरेटर (2-8 डिग्री सेल्सियस) में संग्रहीत किया जाता है।
तैयारी के बाद का माध्यम पीएच 8.6 after 0.2 पर रहना चाहिए।
निर्जलित माध्यम का रंग हल्का बेज या हरा-बेज है, और मध्यम का रंग वन हरा या नीला हरा है।
नमूनों को बोने से पहले प्लेटों को गर्म करने की अनुमति देना महत्वपूर्ण है।
उपयोग
विब्रियोस अलगाव के लिए सबसे आम नमूना डायरियल स्टूल है।
मल के नमूने, अगर उन्हें तुरंत चयनात्मक माध्यम पर नहीं रखा जा सकता है, को कैरी ब्लेयर माध्यम पर ले जाया जाना चाहिए।
संस्कृति की संवेदनशीलता को बढ़ाने के लिए, मल को पीएच 8.4 पर पेप्टोन पानी के माध्यम से पारित किया जा सकता है, जो अधिकतम 8 घंटे के लिए संवर्धन माध्यम के रूप में होता है, वहां से इसे टीसीबीएस माध्यम तक पहुंचाया जाता है।
यह भी ध्यान में रखा जाना चाहिए कि Vibrios के कुछ उपभेदों से प्रतिरक्षाविज्ञानी रोगियों में सेप्टिसीमिया हो सकता है, इसलिए उन्हें रक्त संस्कृतियों से अलग किया जा सकता है। इसी तरह, हैजा रोग के महामारी के प्रकोप होने पर समुद्र से पानी और भोजन के नमूनों का विश्लेषण किया जा सकता है।
बोया
अध्ययन के नमूने का इनोकुलम प्रमुख होना चाहिए, बुवाई को थकावट विधि द्वारा किया जाता है। एरोबायोसिस में 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर प्लेटें लगाई जाती हैं।
विब्रियो कॉलेरी की प्रकल्पित उपनिवेश आकार में, चिकनी, अपारदर्शी हैं, पतली सीमाओं के साथ और सुक्रोज के किण्वन के कारण पीले रंग के होते हैं।
वी। एलगिनोलिटिकस, वी। फ्लुवियलिस, वी। हैरेनी, वी। सिनसिनाटीन्सिस, वी। फर्नीसी, वी। मेट्सनिकिकोवी और कुछ वी। वल्निकस की प्रजातियाँ इसी तरह से विकसित होती हैं। अन्य नैदानिक रूप से महत्वपूर्ण Vibrios प्रजातियाँ जैसे V. parahaemolyticus, सुक्रोज को किण्वित नहीं करती हैं, जैतून के हरे उपनिवेश के रूप में विकसित होती हैं।
टीसीबीएस अगर प्लेट विब्रियो पैराहामोलिटिकस के साथ बीजित है। स्रोत: isis325 फ़्लिकर
दूसरी ओर, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि एरोमोनस और प्लासीओमोनस के कुछ उपभेद जो ऑक्सीडेज हैं (+) इस माध्यम में बढ़ सकते हैं, पीले रंग की कॉलोनियों का विकास कर सकते हैं जो चिकित्सक को भ्रमित कर सकते हैं। जबकि स्यूडोमोनास के कुछ उपभेद भी ऑक्सीकरण (+) के रूप में वी। पैराहामोलिटिकस की तरह हरे रंग की कॉलोनियों में बढ़ते हैं।
सीमा
ऑक्सीब्रिज परीक्षण जो वाइब्रियो जीनस के लिए सकारात्मक है, उसे टीसीबीएस अगर से प्राप्त कालोनियों से कभी नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि प्राप्त परिणाम एक गलत नकारात्मक होगा। बीच में यौगिक दृढ़ता से इस परीक्षण में बाधा डालते हैं। इसलिए, यह रक्त अगर पर उपसंस्कृति से बनाया जाना चाहिए।
क्यूए
यह साबित करने के लिए कि माध्यम अच्छी स्थिति में है, यह ज्ञात या प्रमाणित नियंत्रण उपभेदों को बोने के लिए सलाह दी जाती है, और निरीक्षण करें कि क्या वृद्धि अपेक्षित विशेषताओं से मिलती है।
इसके लिए आप निम्नलिखित चीजों का उपयोग कर सकते हैं:
-वीब्रियो हैजा-संतोषजनक वृद्धि (पीली कॉलोनियां, पारभासी सीमा)।
-वीब्रियो पैराहामोलिटिकस - संतोषजनक वृद्धि (ग्रीन सेंटर और पारभासी सीमा के साथ कॉलोनी)।
-वीब्रियो एल्गिनोलिटिकस एटीसीसी 17749 - संतोषजनक वृद्धि (कॉलोनी के चारों ओर एक ही रंग के हलो के साथ पीले रंग की कॉलोनियां)।
-इंटरोकोकस फेसेलिस ATCC 29212 - कुल या आंशिक अवरोध (छोटे पीले या पारभासी कालोनियों)।
-प्यूडोमोनस एरुगिनोसा एटीसीसी 27853- आंशिक या कुल अवरोध (नीली उपनिवेश)।
-ईशेरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922 - पूरी तरह से बाधित।
-प्रोटस मिराबिलिस एटीसीसी 43071-कुल या आंशिक निषेध। (छोटी कॉलोनियां ग्रीन सेंटर पारभासी सीमा)।
असिंचित माध्यम का ऊष्मायन अपरिवर्तित होना चाहिए।
संदर्भ
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