XLD AGAR: तर्क, तैयारी और उपयोग - जीवविज्ञान - 2025

XLD अगर या सिलोज़ लाइसिन desoxycholate मध्यम अगर एक चयनात्मक एंड एंट्रोपेथोजंस के अलगाव के लिए अंतर ठोस संस्कृति है। शिगेला जीनस के अलगाव को सुधारने के लिए टेलर ने XL agar (Xylose, Lysine) फॉर्मूला तैयार किया।

उन्होंने पाया कि इस जीनस को एंटरोपैथोजेन के अलगाव के उद्देश्य से अधिकांश मीडिया में बाधित किया गया था। इसके बाद, सोडियम डेक्सिकाइलेट, सोडियम थायोसल्फेट और फेरिक अमोनियम साइट्रेट को इसकी चयनात्मकता बढ़ाने के लिए जोड़ा गया। शिगेला और साल्मोनेला दोनों के अलगाव के लिए यह सूत्र उपयोगी साबित हुआ है।

शिगेल्ला, साल्मोनेला की कॉलोनियों का अंतर और एक्सएलडी अगर पर कोलीफॉर्म। ए। शिगेला एसपी, बी। साल्मोनेला एसपी, सी। कोलीफॉर्म। स्रोत: ए। द्वारा: सीडीसी / अमांडा मूर, एमटी; टॉड पार्कर, पीएचडी; ऑड्रा मार्श, सौजन्य: पब्लिक हेल्थ इमेज लाइब्रेरी बी। Https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/Salmonella_species_growing_on_XLD_agar_-Showing_H2S_production_-Detail.jpg C. By: CDC / Dr. जेजे किसान, सौजन्य: पब्लिक हेल्थ इमेज लाइब्रेरी

XLD agar यीस्ट एक्सट्रैक्ट, सोडियम डीऑक्सीकोलेट, Xylose, लाइसिन, लैक्टोज, सुक्रोज, सोडियम थायोसल्फेट, फेरिक अमोनियम साइट्रेट, सोडियम क्लोराइड, फिनोल रेड और अगर से बना है। XLD Agar और SS Agar duo का उपयोग ज्यादातर बैक्टीरियोलॉजी प्रयोगशालाओं में शिगेला और सालिसेला के लिए fecal नमूनों का अध्ययन करने के लिए किया जाता है।

अन्य प्रयोगशालाएँ अन्य उपलब्ध विकल्पों में से CHROMagar साल्मोनेला और XLD अगर के संयोजन को पसंद करती हैं। ये जोड़ी डबल पेट्री डिश में तैयार की जा सकती है। एक तरफ वे XLD agar और दूसरी तरफ दूसरे चुने हुए माध्यम को रखते हैं।

आधार

-उत्तरदायी शक्ति

XLD agar में यीस्ट एक्सट्रैक्ट होता है, जो इस आगर पर उगने वाले सूक्ष्मजीवों के लिए पोषक तत्वों के स्रोत के रूप में कार्य करता है। इसके अलावा, कार्बोहाइड्रेट (ज़ाइलोज़, सुक्रोज़ और लैक्टोज़) की उपस्थिति बैक्टीरिया को ऊर्जा प्रदान करती है जो उन्हें किण्वित कर सकती है।

-मध्यम की संवेदनशीलता

एक निरोधात्मक पदार्थ के रूप में, यह सोडियम डीओक्सीकोलेट को प्रस्तुत करता है; यह ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकता है, इस माध्यम को एक चयनात्मक चरित्र देता है।

-विभिन्न शक्ति

ठेठ शिगेला कालोनियों

जैसा कि पहले ही उल्लेख किया गया है, एक्सएलडी अगर में जाइलोज होता है; शिगेला जीनस के अपवाद के साथ इस माध्यम में बढ़ने वाले सभी जीवाणुओं द्वारा इस कार्बोहाइड्रेट को किण्वित किया जाता है।

यह उन विशेषताओं में से एक है जो इसे अपना अंतर चरित्र देता है, चूंकि शिगेला कालोनियों को लाल कालोनियों के विकास से बाकी हिस्सों से अलग किया जाता है, जबकि अन्य बैक्टीरिया पीले रंग की कॉलोनियों का उत्पादन करते हैं।

साल्मोनेला के विशिष्ट उपनिवेश

जीनस साल्मोनेला भी xylose को किण्वित करता है, शुरू में पीले रंग की कॉलोनियों का निर्माण करता है। हालांकि, कार्बोहाइड्रेट xylose को कम करने के बाद, यह लाइसिन को अपने एंजाइम लाइसिन डेकारोक्सिलेज के लिए हमला करता है। लाइसिन का डिकार्बोजाइलेशन क्षार उत्पन्न करता है जो कॉलोनी के रंग और आसपास के माध्यम को मूल लाल में बदल देता है।

यह व्यवहार केवल साल्मोनेला द्वारा किया जाता है, क्योंकि कोलिफोर्मेस जो कि डिकार्बोसाइलेट लाइसिन माध्यम को अलग नहीं कर सकता है। इसका कारण यह है कि कोलीफॉर्म भी लैक्टोज और सुक्रोज उपस्थित को किण्वित करता है; इसलिए, इन बैक्टीरिया में पीले रंग की कॉलोनी छोड़कर, एसिड का उत्पादन बहुत अधिक है।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि साल्मोनेला जीनस सुक्रोज या लैक्टोज को किण्वित नहीं करता है।

एच का उत्पादन

XLD agar H ₂ S- साल्मोनेला प्रजातियों का उत्पादन करने की भी अनुमति देता है; इसके लिए, यह सोडियम थियोसल्फेट और एक प्रतिक्रिया डेवलपर द्वारा प्रस्तुत सल्फर के स्रोत पर निर्भर करता है, जो कि फेरिक अमोनियम साइट्रेट है।

उत्तरार्द्ध एच ₂ एस (रंगहीन गैस) के साथ प्रतिक्रिया करता है और लोहे के सल्फेट के दृश्यमान अघुलनशील काले अवक्षेप बनाता है। इस अर्थ में, साल्मोनेला कालोनियों की विशेषताएं एक काले केंद्र के साथ लाल होंगी।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि एच ₂ एस गठन प्रतिक्रिया होने के लिए, एक क्षारीय पीएच की आवश्यकता होती है। यही कारण है कि अन्य Enterobacteriaceae जो H ₂ S का निर्माण करते हैं, वे इस माध्यम में ऐसा नहीं कर सकते हैं या खराब नहीं कर सकते हैं, क्योंकि मौजूद कार्बोहाइड्रेट को किण्वित करने से उत्पन्न उच्च अम्लता प्रतिक्रिया को बाधित या बाधित करती है।

-सोडियम क्लोराइड, अगर और फिनोल लाल

अंत में, सोडियम क्लोराइड आसमाटिक संतुलन बनाए रखता है; अगर ठोस जमने वाला एजेंट है और फिनोल लाल, पीएच परिवर्तनों का पता लगाता है, जिससे कॉलोनियों और माध्यम का रंग बदल जाता है।

तैयारी

निर्जलित एक्सएलडी माध्यम का 55 ग्राम वजन और 1 लीटर पानी में घोलें। उबलते बिंदु तक पहुंचने तक मिश्रण को गर्म करें और हिलाएं। ज़्यादा गरम न करें, क्योंकि गर्मी माध्यम को नुकसान पहुंचाती है और एक उपसर्ग बनाती है जो विशिष्ट कालोनियों के आकारिकी को बदल देती है।

इस माध्यम को स्वत: स्फूर्त नहीं होना चाहिए। भंग करते समय, इसे 50 डिग्री सेल्सियस पर पानी के स्नान के लिए पारित किया जाना चाहिए। ठंडा होने पर, इसे सीधे बाँझ पेट्री डिश पर परोसा जाना चाहिए। उन्हें सिंगल प्लेट या डबल प्लेट में डाला जा सकता है। उन्हें जमने के लिए छोड़ दिया जाता है और उपयोग होने तक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाता है।

उपयोग से पहले तापमान। चूंकि यह एक गैर-बाँझ माध्यम है, इसलिए इसे उपयोग की तारीख के करीब तैयार करने की सिफारिश की जाती है।

मध्यम का अंतिम पीएच 7.4 pH 0.2 होना चाहिए। तैयार किए गए माध्यम का रंग नारंगी-लाल, पारभासी, बिना वेग के होता है।

यदि आपके पास Xylose Lysine (XL) बेस एगर है, तो आप सोडियम डीऑक्सीकोलेट, सोडियम थायोसल्फेट और आयरन अमोनियम साइट्रेट जोड़ सकते हैं। इस तरह, एक्सएलडी अगर फार्मूला प्राप्त होता है।

अनुप्रयोग

एक्सएलडी अगर का उपयोग एंटरोपैथोजेन की वसूली के लिए किया जाता है, मुख्य रूप से जीनस शिगेला और दूसरा जीनस साल्मोनेला के लिए। यह मल, पानी और खाद्य नमूनों के मूल्यांकन के लिए उपयोगी है।

नमूनों के प्रकार

मल

मल के नमूनों को सीधे XLD agar पर बोया जा सकता है, जिससे पृथक कालोनियों को प्राप्त करने के लिए सामग्री का अच्छा वितरण हो सकता है।

साल्मोनेला रिकवरी में सुधार करने के लिए, एक्सएलडी अगर को साल्मोनेला संवर्धन मीडिया से अलग किया जा सकता है।

खाना

भोजन के लिए, साल्मोनेला और शिगेला के लिए समृद्ध शोरबा का उपयोग किया जा सकता है। साल्मोनेला के लिए आप सेलेनाइट सिस्टीन शोरबा, उज्ज्वल हरी टेट्राथिओनेट शोरबा, दूसरों के बीच में उपयोग कर सकते हैं।

शिगेला के मामले में, इसे शिगोला शोरबा के साथ 0.5 of / ml के साथ नोवोबीकोइन के साथ समृद्ध किया जा सकता है, 16-20 घंटों के लिए 42 ° ° 1 ° C पर ऊष्मायन किया जाता है।

पानी

जल विश्लेषण में, झिल्ली निस्पंदन तकनीक और एक्सएलडी अगर के उपयोग की सिफारिश की जाती है, दूसरों के बीच।

रोपण और पहचान की स्थिति

बीज वाले माध्यम को 24 से 48 घंटों के लिए 35 ° C पर एरोबिक रूप से ऊष्मायन किया जाता है।

प्रत्येक जीनस के विशिष्ट कालोनियों को देखा जाता है, संदिग्ध कॉलोनियों को उनकी पहचान के लिए जैव रासायनिक परीक्षणों से गुजरना चाहिए।

क्यूए

माध्यम के गुणवत्ता नियंत्रण का मूल्यांकन करने के लिए, निम्नलिखित जीवाणु उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है: साल्मोनेला टायफिम्यूरियम एटीसीसी 14028, साल्मोनेला एन्टिटिडिस एटीसीसी 13076, साल्मोनेला एबोनी डीएसएम 4224, शिग्ला फ्लेक्सीनेरी एटीसीसी 12022, शिगेला सोननेई एटीसीसी 25931, एस्चेरिशिया कॉलोनी एटी 2525 25 एटीसी 2500।, क्लेबसिएला निमोनिया एटीसीसी 33495।

जीनस साल्मोनेला को इस केंद्र पर एक काले केंद्र या पूरी तरह से काले रंग की कॉलोनियों के साथ लाल कालोनियों को पेश करने की विशेषता है। जबकि, शिगेला जीनस में कॉलोनियों को लाल होना चाहिए, अर्थात माध्यम का रंग।

एस्चेरिचिया कोलाई के मामले में, यह पूरी तरह से या आंशिक रूप से बाधित होने की उम्मीद है; यदि यह बढ़ता है तो उपनिवेश पीले होते हैं। प्रोटीन मिराबिलिस के लिए, गुलाबी केंद्र के साथ या बिना काले केंद्र के साथ खराब वृद्धि की उम्मीद है। अंततः क्लेबसिएला जीनस पीले कालोनियों के रूप में विकसित होगा।

अंतिम विचार

शिगेल्ला की रिकवरी के लिए इसकी उच्च दक्षता के लिए एक्सएलडी अगर का व्यापक रूप से बैक्टीरियोलॉजी प्रयोगशालाओं में उपयोग किया जाता है और जीनस साल्मोनेला की भी अच्छी वसूली होती है।

Rall et al। (2005) ने अपने काम में "तीन संवर्धन शोरबा का मूल्यांकन और मुर्गी पालन में साल्मोनेला का पता लगाने के लिए पांच ठोस मीडिया" का प्रदर्शन किया, जिसमें 3 क्लासिक मीडिया का परीक्षण किया गया (उज्ज्वल हरा अगर, एसएस आगर और एक्सआर अगर), एक्सएलडी अगर की सबसे अच्छी रिकवरी दर थी।

वसूली प्रतिशत निम्नानुसार थे: उज्ज्वल हरी अगर के लिए 13.8%, एसएस के लिए 27.6% और एक्सएलडी के लिए 34.5%। 48% रिकवरी के साथ रामबच अगार और 79.3% के साथ CHROMagar केवल क्रोमोजेनिक मीडिया से आगे निकल गया।

संदर्भ

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