पेप्टोन पानी: औचित्य, तैयारी और उपयोग - जीवविज्ञान - 2025

Peptone पानी एक तरल संवर्धन मध्यम, गैर-चयनित, मुख्य रूप से खाद्य पदार्थों के नमूनों मंदक या अन्य सामग्री के रूप में इस्तेमाल होता है। रासायनिक दृष्टिकोण से यह माध्यम बहुत सरल है, इसमें मांस पेप्टोन, सोडियम क्लोराइड और पानी होता है।

इसका एक निश्चित पोषण मूल्य है, जो नमूने को समृद्ध करने की अनुमति देता है। यदि गाली देने वाले बैक्टीरिया हैं, तो इस माध्यम में व्यवहार्यता को ठीक करने की शक्ति है। यह विशेष रूप से एंटरोबैक्टीरिया परिवार से संबंधित बैक्टीरिया की वसूली में उपयोगी है।

बोतलों में पेप्टोन पानी। स्रोत: एमएससी मारिलेस गिल

साल्मोनेलस की वसूली के मामले में, बुफ़े पेप्टोन वॉटर वेरिएंट के उपयोग की सिफारिश की जाती है; यह नमूने के लिए एक पूर्व-संवर्धन माध्यम के रूप में कार्य करता है, इस मामले में इसमें अन्य तत्व जैसे कि डिसोडियम फॉस्फेट और डिपोटेशियम फॉस्फेट होते हैं।

आम तौर पर पेप्टोन का पानी तटस्थ पीएच में तैयार किया जाता है, हालांकि अन्य प्रकार भी होते हैं जहां पीएच 8.5 8.5 ine 0.2 (क्षारीय) होना आवश्यक होता है, क्योंकि पृथक होने वाले जीवाणु क्षारीय होते हैं, जैसे कि निचला विब्रियो कोलरा।

इसके अलावा, इस माध्यम का उपयोग कार्बोहाइड्रेट किण्वन परीक्षणों के लिए आधार माध्यम के रूप में किया जा सकता है।

आधार

पेप्टोन बैक्टीरिया के विकास के लिए आवश्यक पोषक तत्व प्रदान करते हैं, विशेष रूप से नाइट्रोजन और शॉर्ट-चेन अमीनो एसिड, जबकि सोडियम क्लोराइड आसमाटिक संतुलन बनाए रखता है।

इसके अलावा, माध्यम औद्योगिक प्रक्रियाओं द्वारा क्षतिग्रस्त बैक्टीरिया कोशिकाओं को फैलाना, समरूप बनाना और मरम्मत करना संभव बनाता है।

एक मंदक के रूप में, यह आदर्श है, प्रभावी रूप से शारीरिक समाधान (एसएसएफ) या फॉस्फेट बफर समाधान (पीबीएस) की जगह।

बैक्टीरिया की वृद्धि इसकी कठोरता को देखकर स्पष्ट होती है।

तैयारी

घर का बना तैयारी (वाणिज्यिक नहीं)

पेप्टोन का 1 ग्राम और सोडियम क्लोराइड का 8.5 ग्राम वजन, आसुत जल के 1 लीटर में भंग। पीएच को 7.0 से समायोजित किया जाना चाहिए। इसके लिए, 1N सोडियम क्लोराइड का उपयोग किया जा सकता है।

वाणिज्यिक माध्यम का उपयोग कर तैयारी

निर्जलित माध्यम का 15 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। मिश्रण को होमोजिनाइज़ करें। यदि आवश्यक हो, तो कुल विघटन में मदद करने के लिए मिश्रण को 1 मिनट के लिए उबला जाता है। आवश्यकतानुसार 100 मिलीलीटर की बोतलों या 10 मिलीलीटर ट्यूबों में परोसें। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव।

एक रेफ्रिजरेटर में ठंडा और उपयोग या स्टोर करें। माध्यम का अंतिम पीएच 7.2 medium 0.2 है।

निर्जलित माध्यम का रंग हल्का बेज है और तैयार माध्यम हल्का एम्बर है।

किण्वन परीक्षणों की तैयारी

पिछली तैयारी के अनुसार-स्टरलाइज़ करने के लिए- कार्बोहाइड्रेट को 1% की अंतिम सांद्रता में जोड़ा जाना चाहिए, साथ ही एंड्रेड इंडिकेटर (एसिड फुकसिन) या फिनोल रेड (0.018 ग्राम / एल)। गैस निर्माण के निरीक्षण के लिए ट्यूब को डरहम बेल के साथ लगाया जाना चाहिए।

पेप्टोन पानी के अन्य प्रकार

बफ़र्ड या बफ़र्ड पेप्टोन पानी

इसमें कैसिइन, सोडियम क्लोराइड, डायहाइड्रोजेन पोटेशियम फॉस्फेट और सोडियम हाइड्रोजन फॉस्फेट डोडेकेहाइड्रेट के एंजाइमी हाइड्रोलाइजेट शामिल हैं। अंतिम पीएच 7.0 ± 0.2 है।

इसकी तैयारी के लिए, निर्जलित माध्यम के 20 ग्राम का वजन करें और आसुत जल के 1 लीटर में भंग करें। इसे लगभग 5 मिनट तक आराम दें। पूरी तरह से भंग होने तक 1 मिनट के लिए गरम करें।

आवश्यकतानुसार उपयुक्त जार में डालें। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव का उपयोग कर जीवाणुरहित करें।

-एकलिन पेप्टोन पानी

निर्जलित माध्यम के 25 ग्राम वजन और 1 लीटर पानी में भंग। जैसा कि ऊपर वर्णित है आगे बढ़ें। पीएच 8.3 से 8.7 तक होता है।

उपयोग

नमूना सीधे रखकर इनोकुलम किया जाता है।

इसका उपयोग नमूनों को पतला करने के लिए किया जाता है, खासकर जब यह संदेह होता है कि क्षतिग्रस्त बैक्टीरिया हो सकते हैं। आमतौर पर तनु 1:10 और 1: 100 होती है।

35-37 डिग्री सेल्सियस पर एरोबियोसिस में 24 घंटे के लिए सेते हैं।

मल के नमूने

साल्मोनेला के लिए मल के नमूनों के लिए, पूर्व-संवर्धन माध्यम के रूप में बफर या बफ़र्ड पानी के उपयोग की सिफारिश की जाती है।

ऐसा करने के लिए, इस प्रकार आगे बढ़ें:

यदि मल बनता है, तो नमूने का 1 ग्राम लें। यदि वे तरल हैं, तो 1 मिलीलीटर मल लें और 10 मिलीलीटर बुफ़े वाले पेप्टोन पानी के साथ एक ट्यूब में निलंबित करें। रेक्टल स्वैब के मामले में, स्वैब में मौजूद सामग्री को बफर पेप्टोन पानी के साथ ट्यूब में डिस्चार्ज करें।

सभी मामलों में, नमूना को अच्छी तरह से मिलाएं और होमोजिनाइज़ करें।

18 से 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर सेते हैं। बाद में एक संवर्धन शोरबा में उपसंस्कृति जैसे कि सेलेनाइट सिस्टीन शोरबा या टेट्राथिओनेट शोरबा 37 ° C पर 18-24 घंटे अधिक होता है। अंत में, साल्मोनेला के लिए चयनात्मक मीडिया में खेती करें, जैसे कि एसएस अगर, एक्सएलडी अगर, हेक्टोन अगार, अन्य।

भोजन के नमूने

पेप्टोन पानी का उपयोग एक संवर्धन माध्यम के रूप में या एक साधारण मंदक के रूप में किया जाता है, लेकिन अगर साल्मोनेला प्रजातियों की मांग की जाती है, तो इसका उपयोग पूर्व-संवर्धन माध्यम के रूप में किया जाता है, जैसा कि पहले ही वर्णित है।

निम्नानुसार भोजन आगे बढ़ें:

ठोस खाद्य पदार्थों के लिए नमूना के 25 ग्राम वजन और तरल खाद्य पदार्थों के लिए इसे 25 मिलीलीटर मापते हैं। प्लेस ने कहा कि पेप्टोन पानी के 225 मिलीलीटर वाले फ्लास्क में भाग। मिक्स और नमूना समरूप।

यदि माइक्रोबियल लोड अधिक होने का संदेह है, तो कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों (सीएफवी) की गिनती को सुविधाजनक बनाने के लिए धारावाहिक या दशमलव dilutions बनाया जा सकता है।

Dilutions की संख्या नमूना के प्रकार और विश्लेषक के अनुभव पर निर्भर करेगी।

यदि, इसके विपरीत, यह संदेह है कि माइक्रोबियल भार बहुत कम है, तो dilutions बाहर ले जाने के लिए आवश्यक नहीं है। इसके बाद, चयनात्मक मीडिया पर उपसंस्कृति।

समुद्र से भोजन के मामले में, जैसे कि शंख, मछली, दूसरों के बीच में, विब्रियो कोलेरे या विब्रियो की अन्य प्रजातियों की तलाश में, पीएच 8.5 (क्षारीय पेप्टोन पानी) में समायोजित पेप्टोन पानी का उपयोग किया जाना चाहिए।

क्यूए

तैयार प्रत्येक बैच से, 37 डिग्री सेल्सियस पर एरोबायोसिस में 24 घंटे के लिए एक से दो ट्यूबों को बिना टीकाकरण के ऊष्मायन किया जाना चाहिए। समय के अंत में, कोई भी मैलापन या रंग परिवर्तन नहीं देखा जाना चाहिए।

ज्ञात नियंत्रण उपभेदों का उपयोग उनकी प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए भी किया जा सकता है:

इसके लिए निम्नलिखित जीवाणु उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है: एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 8927, स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 6538, स्यूडोमोनास एरुगिनीन एटीसीसी 9027, साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एटीसीसी 1428, साल्मोनेला एंटरिटिडिस एटी 99।

सभी मामलों में एक संतोषजनक माइक्रोबियल विकास की उम्मीद की जाती है, जो माध्यम की अशांति से मनाया जाता है।

सीमाएं

-लहाइड्रेटेड माध्यम बहुत हीड्रोस्कोपिक है, इसलिए इसे नमी से दूर रखना चाहिए।

-किसी भी प्रकार की गिरावट देखने पर माध्यम का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए।

- निर्जलित संस्कृति माध्यम को 10 - 35 ° C के बीच संग्रहित किया जाना चाहिए

-तैयार किए गए माध्यम को प्रशीतित (2-8 डिग्री सेल्सियस) रखा जाना चाहिए।

संदर्भ

1. कैमाचो ए, जाइल्स एम, ऑर्टेगॉन ए, पलाओ एम, सेरानो बी और वेल्ज़क्वेज़ ओ। माइक्रोबायोलॉजिकल एनालिसिस ऑफ़ फूड्स के लिए तकनीक। 2009, दूसरा संस्करण। रसायन विज्ञान संकाय, यूएनएएम। मेक्सिको। रसायन विज्ञान संकाय के मैनुअल और दस्तावेज प्रशासक (AMyD) के लिए संस्करण, UNAM 1. यहाँ उपलब्ध है:
2. ब्रिटानिया प्रयोगशालाओं। बफेट पेप्टोन पानी। 2015.Available पर: britanialab.com
3. नियोजन प्रयोगशालाएँ। पेप्टोन पानी। पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
4. ब्रिटानिया प्रयोगशालाओं। पेप्टोन पानी। 2015.Available पर: britanialab.com
5. मर्क लेबोरेटरीज। बफर पेप्टोन पानी। पर उपलब्ध: merckmillipore.com
6. कोना प्रादेदिसा प्रयोगशालाएँ। क्षारीय पेप्टोन पानी। पर उपलब्ध: condalab.com
7. फोर्ब्स बी, साहम डी, वीसफेल्ड ए (2009)। बेली एंड स्कॉट माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोसिस। 12 एड। संपादकीय पानामेरिकाना एसए अर्जेंटीना।