- आधार
- ईसी शोरबा
- नोवोबोसिन संशोधित ईसी शोरबा
- तैयारी
- ईसी शोरबा
- नोवोबोसिन संशोधित ईसी शोरबा
- उपयोग
- कुल और फेकल कोलीफॉर्म विश्लेषण
- क्यूए
- सिफारिशें
- संदर्भ
चुनाव आयोग शोरबा या शोरबा कोलाई एक चयनात्मक तरल संस्कृति माध्यम है। इस माध्यम को पानी और खाद्य नमूनों में सबसे संभावित संख्या तकनीक (एमपीएन) द्वारा कुल और फेकल कोलीफॉर्म की गिनती के लिए मानक तरीकों से सिफारिश की जाती है, जिसमें शामिल मुख्य एजेंट एस्चेरिचिया कोलाई है।
ईसी शोरबा ट्रिप्टीन, लैक्टोज, पित्त लवण, डिपोटेशियम फॉस्फेट, मोनोपोटेशियम फॉस्फेट, सोडियम क्लोराइड और पानी से बना है। इसका सूत्र रणनीतिक रूप से कुल और फेकल कोलीफॉर्म के विकास के पक्ष में है और अन्य सूक्ष्मजीवों के विकास को रोकने के लिए बनाया गया है।
चुनाव आयोग के शोरबा की तैयारी का चित्रण प्रतिनिधित्व। स्रोत: Pixabay.com
एस्चेरिचिया कोलाई जीवाणु पानी और खाद्य स्रोतों में एक संदूषक के रूप में मौजूद मुख्य फेकल कोलीफार्म है, जो महत्वपूर्ण गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल विकारों का कारण है।
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि Escherchia कोलाई के कई सीरोटाइप हैं; उनमें से हम एंटेरोहेमोरेजिक (ईएचईसी), एंटरोइनवेसिव (ईआईईसी), एंटिओपैथोजेनिक (ईपीईसी), एंटरोटॉक्सिजेनिक (ईटीईसी) और एंटरोएग्लिगेटिव (ईएईसी) का उल्लेख कर सकते हैं।
इस माध्यम में उन सभी के विकास की अनुमति देने की क्षमता है, लेकिन उन्हें एक-दूसरे से अलग करने में सक्षम होने के बिना। इसके लिए अतिरिक्त परीक्षण की आवश्यकता है।
कुल और fecal कोलीफॉर्म की खोज के लिए सबसे संभावित संख्या (MPN) द्वारा पानी और भोजन का सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन एक प्रोटोकॉल है जिसमें कई चरण होते हैं; प्रकल्पित चरण, पुष्टिकरण चरण और समापन चरण। ईसी शोरबा पुष्टिकरण चरण में उपयोग किया जाता है।
आधार
ईसी शोरबा
ईसी माध्यम कुल और फेकल कोलीफॉर्म के इष्टतम विकास के लिए आवश्यक पोषण तत्व प्रदान करने पर आधारित है, जहां एस्चेरिचिया कोलाई बैक्टीरिया शामिल हैं।
ये पोषक तत्व ट्रिप्टीन द्वारा प्रदान किए जाते हैं, पेप्टाइड्स और अमीनो एसिड का एक उत्कृष्ट स्रोत है। इसके अलावा, इसमें लैक्टोज भी होता है, एक किण्वनीय कार्बोहाइड्रेट जो ऊर्जा प्रदान करता है और यह दिखाने की अनुमति देता है कि क्या जीवाणु गैस का उत्पादन करते हैं।
दूसरी ओर, मध्यम में पित्त लवण होते हैं जो चयनात्मक चरित्र प्रदान करते हैं, क्योंकि यह ग्राम सकारात्मक सूक्ष्मजीवों के विकास को रोकता है जो नमूना में मौजूद हो सकते हैं।
इसी तरह, डिपोटेशियम फॉस्फेट और मोनोपोटेशियम फॉस्फेट पीएच संतुलन प्रणाली के रूप में कार्य करते हैं। यह प्रणाली आवश्यक है, क्योंकि शोरबा में निहित लैक्टोज माध्यम को अम्लीय करने के लिए जाता है जब यह सूक्ष्मजीवों द्वारा किण्वित होता है, लेकिन इसकी पूर्ति फॉस्फेट लवण द्वारा की जाती है।
इसलिए, ये तत्व आवश्यक हैं, क्योंकि अनियंत्रित अम्लता मांगी गई सूक्ष्मजीवों के समुचित विकास को प्रभावित कर सकती है।
इसके भाग के लिए, सोडियम क्लोराइड ऑस्मोटॉलिक रूप से मध्यम को स्थिर करता है, जबकि पानी मौजूद विलेय के लिए विलायक है और माध्यम को तरल स्थिरता प्रदान करता है।
नोवोबोसिन संशोधित ईसी शोरबा
ओक्रेंड और रोज़ ने ईसी शोरबा की एक किस्म बनाई, जिसे नोवोबीसिन संशोधित ईसी शोरबा कहा जाता है। संशोधन में पित्त लवण की सांद्रता को कम करने और 20 मिलीग्राम / डीएल को नोवोबीसिन शामिल किया गया।
यह संशोधन एन्टेरोहेमोरेजिक एस्चेरिचिया कोलाई स्ट्रेन (O157: H7) की वसूली का पक्षधर है।
यह बैक्टीरियल सीरोटाइप गंभीर रक्तस्रावी बृहदांत्रशोथ का कारण बनता है जो हेमोलिटिक यूरेमिक सिंड्रोम (एचओएस) को जन्म दे सकता है; जो बदले में तीव्र गुर्दे की विफलता उत्पन्न कर सकता है, उच्च मृत्यु दर के साथ जो बुजुर्गों में 50% तक पहुंच सकता है।
दूषित भोजन की खपत के कारण इस जीवाणु द्वारा प्रतिवर्ष होने वाली रुग्णता और मृत्यु दर के कारण, संयुक्त राज्य अमेरिका का कृषि विभाग (यूएसडीए) इस माध्यम के उपयोग की अत्यधिक अनुशंसा करता है।
तैयारी
ईसी शोरबा
निर्जलित माध्यम का 37.4 ग्राम वजन और आसुत जल के 1 लीटर में भंग। मिश्रण को 5 मिनट के लिए खड़े होने की अनुमति दी जानी चाहिए। इसके बाद, गर्मी स्रोत में, इसे अक्सर सरगर्मी करके भंग कर दिया जाता है।
एक बार भंग होने पर, यह एक डरहम ट्यूब के साथ पूर्वनिर्मित परीक्षण ट्यूबों में वितरित किया जाता है। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव में बाँझ।
माध्यम का पीएच 6.9। 0.2 होना चाहिए। निर्जलित माध्यम का रंग बेज है और तैयार माध्यम हल्का एम्बर है।
उपयोग होने तक शोरबा फ्रिज में रखा जाता है। उपयोग के समय, शोरबा कमरे के तापमान पर होना चाहिए।
दूसरी ओर, ईसी शोरबा भी डबल एकाग्रता में तैयार किया जा सकता है।
नोवोबोसिन संशोधित ईसी शोरबा
निर्जलित माध्यम के 36.7 ग्राम वजन और 1 लीटर पानी में भंग। बाकी तैयारी वही है जो ऊपर वर्णित है।
उपयोग
कुल और फेकल कोलीफॉर्म विश्लेषण
ईसी शोरबा पानी के नमूनों में, साथ ही साथ फार्मास्युटिकल उत्पादों और भोजन दोनों में, एनएमपी विधि द्वारा कोलीफॉर्म के अध्ययन के पुष्टिकरण चरण के लिए आदर्श है।
टर्बिड, गैस उत्पादक लैक्टोज ब्रॉथ्स को प्रकल्पित चरण में प्राप्त किया जाना चाहिए, 2% चमकीले हरे पित्त शोरबा और ईसी शोरबा में फिर से बीजारोपण किया जाना चाहिए।
कुल कोलीफॉर्म के लिए, ईसी शोरबा को 37 ° C पर 24 से 48 घंटों के लिए एरोबिक रूप से ऊष्मायन किया जाता है, और फेकल कोलीफॉर्म के लिए 44 ° C पर 24 से 48 घंटों के लिए एरोबिक रूप से इनक्यूबेट किया जाता है।
दोनों मामलों में इसकी व्याख्या निम्न प्रकार से की जाती है: गैस उत्पादन के साथ टर्बिड ट्यूब को सकारात्मक माना जाता है। यदि 24 घंटे में गैस का उत्पादन नहीं होता है, तो ऊष्मायन 48 घंटे तक जारी रहता है।
ईसी पॉजिटिव ब्रॉथ्स पूर्ण पुष्टिकरण चरण में जाते हैं, जिसमें मैक कॉनकी अगर, ईएमबी अगर या एंडो एगर जैसे चयनात्मक मीडिया पर रहते हैं।
यदि इस्तेमाल किया शोरबा novobiocin- संशोधित ईसी है, तो सकारात्मक ट्यूबों को सॉर्बिटोल के साथ मैक कॉनकी अगर पर फिर से शुरू करने की सिफारिश की जाती है।
क्यूए
तैयार माध्यम के प्रत्येक बैच को गुणवत्ता नियंत्रण होना चाहिए। सबसे पहले, माध्यम की बाँझपन का मूल्यांकन किया जाना चाहिए। इस अर्थ में, एक या दो शोरबा 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए एरोबियोसिस में टीका के बिना ऊष्मायन किया जाता है। अपेक्षित परिणाम एक पारदर्शी शोरबा है, बिना फाड़ या रंग परिवर्तन के।
दूसरा, ज्ञात उपभेदों की वृद्धि का मूल्यांकन किया जाना चाहिए, इसके लिए निम्नलिखित बैक्टीरिया का उपयोग किया जा सकता है: एस्चेरिचिया कोलाई, एटीसीसी 8739, एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, साल्मोनेला टाइफीमुरियम एटी 14028।
सभी मामलों में, संतोषजनक माइक्रोबियल विकास की उम्मीद है, ई। कोलाई के लिए गैस उत्पादन के साथ एक बादल शोरबा का अवलोकन और साल्मोनेला के लिए कोई गैस नहीं।
अन्य उपभेदों को नियंत्रण में शामिल किया जा सकता है: स्टेफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 25923, एंटरोकोकस फेसेलिस एटीसीसी 29212। इन उपभेदों को पूरी तरह से रोकना चाहिए।
सिफारिशें
-कोलीफॉर्म के अध्ययन के लिए डरहम ट्यूबों की नियुक्ति आवश्यक है।
स्टरलाइज़ करने से पहले टेस्ट ट्यूब में माध्यम को वितरित करें, उसके बाद कभी नहीं।
-अगर माध्यम 3 महीने से ज्यादा पुराना है तो इस्तेमाल न करें।
-अगर माध्यम की सामान्य विशेषताओं में कोई परिवर्तन देखा जाता है, तो इसका उपयोग न करें।
संदर्भ
- ब्रिटानिया प्रयोगशालाओं। ईसी माध्यम। 2015.Available पर: britanialab.com
- एंटरोहेमोरेजिक ई। कोलाई। खाद्य सुरक्षा और सार्वजनिक स्वास्थ्य केंद्र। 2010.Available पर: cfsph.iastate.edu
- नियोजन निगम ईसी माध्यम। पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
- Neogen। Novobiocin ने EC माध्यम को संशोधित किया। पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
- Jure M, Condorí S, Leotta G, Chinen I, Miliwebsky E, Allori C, Aulet O, de Castillo M. Detection, Escherichia coli का आइसोसेरियसोन प्रांत में कसाई से मीट ग्राउंड मीट से बनने वाले Escherichia coli का अलगाव और लक्षण वर्णन। टुकूमन से। माइक्रोबायोल रेव अर्ग; 2010, 42 (4): 284-287। पर उपलब्ध: www.scielo.org