अगर biggy एक ठोस माध्यम चयनात्मक और अंतर संस्कृति है। इसे मुख्य कैंडिडा प्रजातियों की पहचान में अलग और सहायता करने के लिए डिज़ाइन किया गया था। इसका नाम BIGGY अंग्रेजी बिस्मथ ग्लूकोज ग्लाइसिन खमीर में संक्षिप्त नाम से आया है।
मूल सूत्र निकर्सन द्वारा बनाया गया था, यही वजह है कि इस माध्यम को निकर्सन एगर के रूप में भी जाना जाता है। वर्तमान में यह खमीर निकालने, ग्लाइसिन, डेक्सट्रोज, अमोनियम साइट्रेट, बिस्मथ साइट्रेट, सोडियम सल्फाइट और अगर से बना है।
BIGGY अगर का ग्राफिक प्रतिनिधित्व। स्रोत: Flickr.com
BIGGY agar प्रजाति सी। अल्बिकैंस, C. ट्रॉपिकलिस, C. क्रुसी और C. केफिर के विभेदन के लिए तैयार किया जाता है, लेकिन अन्य प्रजातियाँ भी बढ़ती हैं जैसे कैंडिडा ग्लेब्रेटा, C. parapsilosis, C. guilliermondii, Trichosporun sp, Geotrichum कैंडम। और सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया।
इसकी अच्छी संवेदनशीलता और विशिष्टता है, हालांकि, जब इसी तरह के फ़ंक्शन के साथ अन्य मीडिया के साथ तुलना की जाती है, तो यह चोलनगर द्वारा पार किया जा रहा है, दूसरे स्थान पर है। इस कारण से, कई प्रयोगशालाएं उत्तरार्द्ध को पसंद करती हैं, हालांकि यह बहुत अधिक महंगा है।
यह स्पष्ट होना चाहिए कि BIGGY agar, साथ ही अन्य समान साधनों का उपयोग, एक त्वरित अभिज्ञेय पहचान में मदद करता है, लेकिन कभी पुष्टि नहीं करता है। इसलिए, अतिरिक्त पहचान विधियां उपलब्ध होनी चाहिए; उदाहरण के लिए, Vitek 32 और API 20 पहचान प्रणाली।
आधार
BiGGY agar को विशेष रूप से जीनस कैंडिडा के खमीर के अलगाव के लिए आंशिक रूप से चयनात्मक माध्यम माना जाता है, हालांकि अन्य जेनेरा विकसित हो सकते हैं।
यह एक विभेदक माध्यम भी है क्योंकि इसमें शामिल प्रजातियों के आधार पर, उपस्थिति, रंग, आकार और आकार के संदर्भ में विभिन्न विशेषताओं को देखा जाएगा। उपनिवेशों में विभिन्न रंगों के विकास के कारण इसे एक क्रोमोजेनिक माध्यम माना जाता है।
यीस्ट कालोनियों का रंग अगर में बिस्मथ सल्फाइट की उपस्थिति के कारण होता है। निकर्सन ने महसूस किया कि जीनस कैंडिडा के यीस्ट बिस्मथ सल्फाइट की एक कोशिकीय कमी को अंजाम देते हैं, इसे बिस्मथ सल्फाइड (अघुलनशील काले पदार्थ) में बदल देते हैं। इससे हल्के भूरे से काले रंग की कॉलोनियां निकलती हैं।
इस अगर में खमीर निकालने और डेक्सट्रोज होता है, जो खमीर के विकास के लिए बुनियादी पोषक तत्वों और ऊर्जा का स्रोत प्रदान करता है। ग्लाइसिन एक खमीर विकास उत्तेजक है, जबकि यह कुछ बैक्टीरिया के विकास को रोकता है।
इसी अर्थ में, अमोनियम और बिस्मथ साइट्रेट, साथ ही सोडियम सल्फाइट बैक्टीरिया के विकास के अवरोधक के रूप में कार्य करते हैं। Agar वह एजेंट है जो मध्यम ठोस स्थिरता देता है।
तैयारी
निर्जलित संस्कृति माध्यम के 45 ग्राम वजन करें और आसुत जल के एक लीटर में भंग करें। मिश्रण को हिलाएं और गरम करें, 1 मिनट के लिए उबलने तक पूरी तरह से उबालें। यह संस्कृति माध्यम स्वावलंबी नहीं है।
पानी के स्नान में लगभग 45 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा होने पर, बाँझ पेट्री डिश पर 20 मिलीलीटर डालना।
निर्जलित माध्यम का रंग पीला-भूरा होता है और तैयार पीले रंग का सफेद जेल होता है, जिसमें एक हल्का फड़कता हुआ अवक्षेप देखा जा सकता है।
पीएच 6.8। 0.2 होना चाहिए।
तैयार माध्यम को एक रेफ्रिजरेटर (4 डिग्री सेल्सियस) में संग्रहीत किया जाना चाहिए और प्रकाश से संरक्षित किया जाना चाहिए। जैसा कि यह एक ऐसा माध्यम है जिसे जल्द से जल्द इस्तेमाल नहीं किया जा सकता है। इसकी तैयारी के 3 दिन पहले इसके उपयोग की सिफारिश की जाती है।
उपयोग
प्लेटों को 24 (48 और 72 घंटे) के लिए कमरे के तापमान (25 डिग्री सेल्सियस) पर ऊष्मायन किया जाता है, और ऊष्मायन समय को 5 दिनों तक बढ़ाया जा सकता है।
कैंडिडा की प्रत्येक प्रजाति कुछ विशेषताओं को विकसित करती है जो उन्हें एक दूसरे से अलग करती है। माध्यम के निर्माता प्रत्येक प्रजाति के लिए निम्नलिखित विशेषताओं का वर्णन करते हैं:
-कैंडिडा अल्बिकंस कॉम्प्लेक्स: इस अग्र पर चिकनी, गोल, भूरे या काले रंग की कॉलोनियों के रूप में विकसित होता है, थोड़ी सी मायसेलियल बॉर्डर के साथ। इस अपवाद के साथ कि गहरा रंग बीच में नहीं फैलता है।
-कैंडिडा ट्रॉपिकलिस: उज्ज्वल, छोटे, गहरे भूरे रंग की कालोनियों के साथ एक काला केंद्र और थोड़ी सी मायसेलियल सीमा। गहरे रंग बीच की ओर फैलते हैं, एक विशेषता जो इस प्रजाति की विशिष्ट है, 72 घंटों के लिए ऊष्मायन के बाद।
-कंडीदा क्रुस्सी एक भूरी से काली सीमा के साथ बड़ी, सपाट, खुरदरी दिखने वाली कालोनियों को विकसित करती है।
-कैंडिडा पैराक्रूसि: मध्यम आकार की कॉलोनियों, ज्यादातर समय किसी न किसी, सपाट। रंग चमकीले गहरे लाल भूरे रंग से हल्के लाल भूरे रंग में भिन्न हो सकते हैं। उपनिवेशों की सीमा व्यापक, पीली पड़ चुकी है।
-कैंडिडा स्टेलैटॉइड: मध्यम, सपाट कालोनियों, गहरे भूरे, लगभग काले विकसित करता है। माइसेलियल विकास बहुत दुर्लभ है।
2003 में Yücesoy और Marol द्वारा किए गए एक अध्ययन से पता चला है कि CHROMagar माध्यम में BIGGY agar की तुलना में विभिन्न Candida प्रजातियों के भेदभाव और पहचान के लिए बेहतर संवेदनशीलता और विशिष्टता है।
क्यूए
बाँझपन नियंत्रण के लिए, निर्जन प्लेटों को 24 से 48 घंटों के लिए अंधेरे में 25 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है, यह उम्मीद की जाती है कि किसी भी प्रकार की वृद्धि नहीं हुई है, या रंग परिवर्तन नहीं हुआ है।
माध्यम के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए अनुशंसित एटीसीसी उपभेद हैं:
कैंडिडा एल्बिकैंस एटीसीसी 60193 कॉम्प्लेक्स, कैंडिडा ग्लैब्रेटा एटीसीसी 2001, कैंडिडा क्रूसि एटीसीसी 34135। उन सभी में, जैसा कि ऊपर वर्णित है, विकास की उम्मीद है।
निम्नलिखित उपभेदों का भी उपयोग किया जा सकता है:
एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, स्यूडोमोनास एरुगिनोसा एटीसीसी 27853 और स्टेफिलोकोकस एपिडर्मिडिस एटीसीसी 12228। पहले दो में, कुल अवरोध अपेक्षित है, लेकिन आंशिक रूप से बढ़ने के मामले में कॉलोनियां क्रीम रंग की होंगी।
एस। ऑरियस के मामले में, यह पूरी तरह से बाधित होने की उम्मीद है, लेकिन अगर यह आंशिक रूप से बढ़ता है, तो इसके उपनिवेश सफेद होते हैं।
सीमाएं
कुछ बैक्टीरिया इस माध्यम में बढ़ने में सक्षम होते हैं और एक कैंडिडा कॉलोनी का अनुकरण करते हुए, रंग में अंधेरा भी कर सकते हैं, लेकिन जब कॉलोनी को सूँघते हैं और इसे माइक्रोस्कोप के नीचे देखते हैं, तो यह आसानी से त्याग दिया जाता है।
तालिका: Yücesoy M और Maa S. के कार्य के अनुसार BIGGY agar पर कुछ खमीर की उपनिवेशों की विशेषताएँ ।
स्रोत: खमीर प्रजातियों की पहचान के लिए चोमेगर कैंडिडा और बिग एगर का मारोल एस। प्रदर्शन। एन क्लिन माइक्रोबायोल एंटीमाइक्रोब। 2003; 2 (8): 1-7
संदर्भ
- Yücesoy M, Marol S. CHROMAGAR कैंडिडा का प्रदर्शन और खमीर प्रजातियों की पहचान के लिए BIGGY agar। एन क्लिन माइक्रोबायोल एंटीमाइक्रोब। 2003; 2 (8): 1-7।
- एमसीडी एलएबी। तकनीकी डाटा शीट बड़ा अगार। यहाँ उपलब्ध है: mcdlab.net/
- लैब नोजेन। बड़ा अगार। पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
- कोना प्रादेदिसा प्रयोगशालाएँ। बड़े आगर। पर उपलब्ध: condalab.com
- बीडी प्रयोगशालाओं। BD BiGGY Agar (बिस्मथ ग्लूकोज ग्लाइसिन खमीर आगर)। 2011.Available पर: bd.com