- सूक्ष्मजीव अलगाव तकनीक
- खरोंच या लकीर
- माध्यम या लेप के साथ संलयन
- सीरियल की तनु
- संवर्धन प्रक्रिया
- अद्वितीय या अनन्य तकनीक
- कस्टम तकनीक
- महत्त्व
- संदर्भ
सूक्ष्मजीवों के अलगाव इन विट्रो निवास स्थान में एक करने के लिए उनके प्राकृतिक निवास स्थान से निकालने और ब्याज की रोगाणुओं की प्रजातियों को अलग करने के लिए प्रयोग किया जाता तकनीक का एक सेट शामिल है। ये तकनीक सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन के लिए कई बुनियादी और आवश्यक उपकरणों का एक सेट है।
अधिकांश सूक्ष्मजीव जो ज्ञात हैं और जिन्हें विज्ञान द्वारा परिभाषित किया गया है, वे हैं जिन्हें अलग किया जा सकता है और कंटेनरों में रखा जाता है जो अनुकरण करते हैं, भाग में, उन स्थानों की आंतरिक स्थिति जहां वे रहते हैं।
पेट्री डिश के अंदर एक ठोस माध्यम पर पृथक बैक्टीरिया जैसे सूक्ष्मजीवों की कालोनियों की विशिष्ट छवि (www.pixabay.com पर nadya_il द्वारा छवि)
सूक्ष्मजीवों के अलगाव का अभ्यास करने वाले पहले पुरुषों में से एक एंटोन वान लीउवेनहॉक (1632-1723) थे, जिन्होंने सैकड़ों सूक्ष्मदर्शी के तहत उन्हें ध्यान से देखने के लिए बड़ी संख्या में स्थानों और पारिस्थितिक तंत्रों से रोगाणुओं के नमूने एकत्र किए थे। ।
हालांकि, यह 19 वीं शताब्दी के दौरान लुइस पाश्चर और रॉबर्ट कोच के वैज्ञानिकों के समय तक नहीं था, उन कठोर अभ्यासों को शुरू किया गया था जो विशिष्ट सूक्ष्मजीवों को अलग करने के लिए काम करते थे, ताकि सभी उन्हें विस्तार से अध्ययन करने में सक्षम हो सकें। ।
लीउवेनहॉक के विपरीत, इन शोधकर्ताओं ने पर्यावरण में रोगाणुओं की अन्य प्रजातियों से परिभाषित प्रजातियों को अलग करने पर ध्यान केंद्रित किया। इसके अलावा, वे अपने प्राकृतिक वातावरण के बाहर उन्हें यथासंभव लंबे समय तक जीवित रखने में रुचि रखते थे।
आज, जीवमंडल पर लगभग किसी भी वातावरण से प्राप्त कई अलग-अलग सूक्ष्मजीवों के अलगाव और वृद्धि के लिए सटीक तकनीकों का विकास किया गया है।
सूक्ष्मजीव अलगाव तकनीक
सभी सूक्ष्मजीव अलगाव जंगली में एक नमूने के संग्रह से शुरू होते हैं जहां ब्याज के सूक्ष्मजीव पाए जाते हैं। ये स्थान जानवरों या पौधों के ऊतकों, मिट्टी या सब्सट्रेट, पोखर, समुद्र, त्वचा जैसे सतहों आदि में घाव हो सकते हैं।
नमूना को एक कंटेनर को छूने या समर्थन करने के लिए लिया जाता है, जिसमें सतह पर सूक्ष्मजीवों की वृद्धि के लिए उपयुक्त आवश्यकताओं के साथ एक माध्यम होता है जिससे इसे अलग करने के लिए वांछित होता है। इस कंटेनर में आपको रोगाणुओं की "संस्कृति" के रूप में जाना जाता है।
आम तौर पर, प्राकृतिक आवासों से प्राप्त होने वाली पहली फसल निस्संदेह एक "मिश्रित फसल" है, अर्थात्, जो कि विभिन्न प्रकार के रोगाणुओं की एक बड़ी संख्या से बना है।
हालांकि, सूक्ष्मजीवों की अधिकांश प्रजातियां प्रयोगशाला में एक दूसरे से अलग हो सकती हैं, सूक्ष्मजीव संस्कृतियों को प्राप्त करने की कोशिश करती हैं जहां केवल ब्याज की प्रजातियां बढ़ती हैं या दूसरे शब्दों में, "शुद्ध संस्कृतियां" प्राप्त होती हैं।
संक्षेप में, "शुद्ध संस्कृतियों" को प्राप्त करने के लिए की जाने वाली प्रक्रिया को "सूक्ष्मजीवों के अलगाव" के रूप में जाना जाता है।
सूक्ष्मजीवों के अलगाव के लिए बड़ी संख्या में तकनीकें हैं, और विशेष रूप से एक विशेष प्रकार के सूक्ष्मजीव के लिए कुछ विशिष्ट भी हैं। अन्य मामलों में, प्राकृतिक वातावरण से नमूना एकत्र करके केवल एक शुद्ध संस्कृति प्राप्त करना संभव है।
मिश्रित संस्कृति मीडिया में पाए जाने वाले ब्याज की प्रजातियों को अलग करने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली अलगाव तकनीकें हैं:
खरोंच या लकीर
शायद यह सूक्ष्मजीवों को अलग करने के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि है। इस तकनीक में एक पेट्री डिश जैसे कांच के कंटेनर में सूक्ष्मजीव के विकास के लिए आवश्यक सभी पोषण संबंधी यौगिकों के साथ एक बाँझ ठोस माध्यम तैयार करना शामिल है।
एक ठीक उपकरण का उपयोग करते हुए, आम तौर पर कहा जाता है, मिश्रित संस्कृति में अलग-थलग किए जाने वाले सूक्ष्मजीव को छुआ जाता है, फिर, बाँझ ठोस माध्यम में, उस उपकरण की नोक जिसके साथ सूक्ष्मजीव को छुआ गया था, को पूरे तरफ से स्लाइड करना शुरू कर दिया गया था। लाइसेंस प्लेट।
यह सघन या उत्तेजित माध्यम की सतह पर आगे-पीछे किया जाता है, जैसे कि यह एक ज़िग-ज़ैग हो। यह आमतौर पर तब तक किया जाता है जब तक कि प्लेट पर अग्र के व्यास का लगभग एक तिहाई कवर नहीं हो जाता।
माध्यम या लेप के साथ संलयन
इस विधि के लिए, माध्यम का एक कमजोर स्थान जहां एकत्रित रोगाणुओं को जीवित किया जाता है, उस बिंदु तक ले जाया जाता है, जहां माध्यम के प्रत्येक मिलीलीटर के लिए केवल कुछ सौ कोशिकाएं रहती हैं, जहां वे पतला थे।
इस कमजोर पड़ने से कुछ मिली लीटर लिया जाता है और इसे मीडियम में मिलाया जाता है जो कि जमने से पहले कंटेनर में डाल दिया जाएगा। जैसा कि अगरबत्ती और तरल माध्यम के बीच एक मिश्रण बनाया जाता है जहां सूक्ष्मजीव होते हैं, वे माध्यम में डूबे रहते हैं और केवल तब तक दिखाई देते हैं जब तक वे एक कॉलोनी के रूप में विकसित नहीं होते हैं।
जैसा कि वे एक उपनिवेश के रूप में विकसित होते हैं, उन्हें अन्य सूक्ष्मजीवों से अलग करना आसान होता है जैसे कि अन्य तरीके जैसे खरोंच।
सीरियल की तनु
इस पद्धति में उस माध्यम के धारावाहिक फैलाव बनाने होते हैं जहां सूक्ष्मजीव पाए जाते हैं। इसका एक उदाहरण है लैक्टोकोकस लैक्टिस या लैक्टोबैसिलस एसिडोफिलस को शुद्ध करने के लिए किए गए तनुकरण, बैक्टीरिया जो कि पनीर और दही के उत्पादन के लिए जिम्मेदार हैं।
लगभग 1 मिली लीटर खट्टा दूध या पहले किण्वित दही युक्त ट्यूब से लिया जाता है और इस मिलीलीटर को सूक्ष्मजीवों के बिना बाँझ दूध में डाला जाता है। बाद में, उक्त दूध का लगभग एक मिलीलीटर लिया जाता है और इस प्रक्रिया को दोहराया जाता है।
यह लगभग तीन या चार बार लगातार दोहराया जाता है, जिससे लैक्टोकोकस लैक्टिस या लैक्टोबैसिलस एसिडोफिलस को दूषित माध्यमों से पृथक माध्यम में प्राप्त करने की बहुत संभावना है, जो अन्य रोगाणुओं का प्रतिनिधित्व कर सकता है।
साइट की विस्तृत तस्वीर और सूक्ष्मजीवों को अलग करने के लिए विशिष्ट सामग्री (www.pixabay.com पर Sintija Valucka द्वारा छवि)
संवर्धन प्रक्रिया
यह पद्धति संस्कृति मीडिया में सूक्ष्मजीवों को विकसित करने वाली स्थितियों के साथ प्राप्त की जाती है, जो ब्याज की प्रजातियों के विकास को उत्तेजित या सुविधाजनक बनाती हैं, और कई मामलों में, ऐसी परिस्थितियों में जो अन्य दूषित सूक्ष्मजीवों के विकास को रोकती हैं।
जीनस साल्मोनेला के बैक्टीरिया सेलेनियम से समृद्ध संस्कृति मीडिया में विकसित होते हैं, क्योंकि ये सूक्ष्मजीव इसे चयापचय करने के लिए सेलेनियम को सेलेनियम में बदल देते हैं। माध्यम में सेलेनाइट से साल्मोनेलस के अलावा अन्य सूक्ष्मजीवों के लिए पोषक तत्वों को आत्मसात करना मुश्किल हो जाता है।
अद्वितीय या अनन्य तकनीक
यह रोगाणुओं को अलग करने के लिए शायद सबसे कठिन और सबसे कम प्रभावी तकनीक है। इसमें माध्यम (नमूना) की एक बूंद डालना जहां सूक्ष्मजीवों को एक बाँझ आवरण पर रखा जाता है, और फिर इसे माइक्रोस्कोप चरण पर रखा जाता है।
बाद में, अवलोकन करते समय, एक एकल कोशिका को बाँझ माइक्रो-पिपेट की मदद से हटा दिया जाता है। ड्रॉप को एक अन्य बाँझ आवरण पर रखा जाता है जिसे सूक्ष्मजीव के लिए उपयुक्त तापमान पर लगाया जाता है। अंत में, इसे फिर से वृद्धि दिखाने के लिए माइक्रोस्कोप के नीचे मनाया जाता है।
यदि पुन: अवलोकन पर नए सेल को व्यक्तिगत सेल से विकसित किया गया है, तो इन्हें पूरी तरह से अलग शुद्ध संस्कृति प्राप्त करने के लिए बाँझ संस्कृति के माध्यम से जोड़ा जाता है।
कस्टम तकनीक
ग्रह पृथ्वी पर अनगिनत विभिन्न रोगाणु हैं जो लगभग सभी ज्ञात पारिस्थितिक तंत्रों में बिखरे हुए हैं। कुछ सूक्ष्मजीवों को एक्सट्रीमोफिल्स के रूप में जाना जाता है और उनके विकास और विकास के लिए अद्वितीय परिस्थितियों की आवश्यकता होती है।
अलगाव के लिए ये चरम स्थितियां लाभप्रद और हानिकारक दोनों हैं, हालांकि, वे केवल इन सूक्ष्मजीवों के विकास की अनुमति देते हैं, इन विट्रो को फिर से बनाना मुश्किल हो सकता है।
महत्त्व
सूक्ष्मजीवों के अलगाव ने विज्ञान और चिकित्सा के क्षेत्र के लिए सबसे महत्वपूर्ण अग्रिमों में से एक का प्रतिनिधित्व किया है। इसने मानवता को विभिन्न माइक्रोबियल रोगजनकों के खिलाफ प्रभावी उपचार का अध्ययन करने और विकसित करने की अनुमति दी है।
वर्तमान में यह सुनिश्चित करने के लिए जाना जाता है कि सूक्ष्मजीव सभी पारिस्थितिक तंत्र का एक अनिवार्य हिस्सा बनाते हैं, इसलिए उनमें से कुछ को मनुष्य के लिए सापेक्ष महत्व के साथ प्राप्त करना शोधकर्ताओं को गहराई से समझने के लिए शोधकर्ताओं का गहन अध्ययन करने की अनुमति देता है। प्रत्येक पारिस्थितिकी तंत्र में इसकी भूमिका।
संदर्भ
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