- इतिहास
- माइक्रोस्कोपी और पौधे के शरीर रचना विज्ञान में इसका उपयोग
- प्लांट एनाटॉमी अध्ययन क्या करता है?
- तरीके और तकनीक
- फिक्सेशन
- निर्जलीकरण
- पैराफिन में ऊतकों की घुसपैठ / एम्बेडिंग
- microtomy
- धुंधला हो जाना
- हिस्टोकेमिकल परीक्षण
- संदर्भ
एक सख्त अर्थ में पौधों की शारीरिक रचना वनस्पति ऊतकों की एक महान विविधता के अध्ययन का मूलभूत आधार है, वनस्पति विज्ञान में और सामान्य रूप से जैविक विज्ञान में बहुत महत्व का उपकरण है। यह अनुशासन मुख्य रूप से उनके विकास से उनके विकास तक माइक्रोस्कोपी द्वारा ऊतकों के सेलुलर अध्ययन पर केंद्रित है।
पौधों के भ्रूणविज्ञान और पैलियोलॉजी के क्षेत्र में एक साथ अध्ययन किए जाने वाले सभी प्रजनन ऊतकों को अक्सर बाहर रखा जाता है। जिस तरह से कोशिकाओं को एक साथ रखा जाता है और एक दूसरे के साथ व्यवस्थित किया जाता है, वह पौधे की शारीरिक रचना में बहुत रुचि है।

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प्लांट एनाटॉमी अन्य क्षेत्रों जैसे पौधों के शरीर विज्ञान और उनके आकारिकी से निकटता से संबंधित है। ज्यादातर मामलों में देखी जाने वाली विशेषताओं को पौधों के समूहों के बीच अंतर किया जाता है और इसका उपयोग फ़्लोजेनेटिक संबंधों को स्थापित करने के लिए किया जाता है।
इतिहास
इसकी शुरुआत में, पौधों की शारीरिक रचना में पौधों की आकृति विज्ञान और उनकी बाहरी विशेषताओं का अध्ययन भी शामिल था। हालाँकि, बीसवीं सदी के मध्य से, शरीर रचना विज्ञान अध्ययन आंतरिक अंगों और आंतरिक ऊतकों के अध्ययन के लिए विशेष रूप से प्रतिबंधित है, आकृति विज्ञान एक अलग अनुशासन है।
पौधे की शारीरिक रचना और वनस्पति विज्ञान पर पहला काम, माइक्रोस्कोप की मदद से किया जाता है, मार्सेलो माल्पी और नेहेमिया ग्रे के कारण होता है। 1675 तक माल्पीघी ने अपना काम एनाटोम प्लांटारम प्रकाशित किया था, जहां उन्होंने चित्र के माध्यम से कुछ पौधों की संरचनाओं जैसे पत्तियों के रंध्र का वर्णन किया है।
उनके हिस्से के लिए, वर्ष 1682 तक क्रू ने पौधों के ऊतकों पर बहुत विश्वसनीय चित्रण के साथ एक काम प्रकाशित किया, जो उनकी टिप्पणियों की सटीकता को प्रदर्शित करता है। यह काम पौधों की शारीरिक रचना का हकदार था।
1960 के दशक में शुरू, माइक्रोस्कोपी का विकास संयंत्र शरीर रचना के सभी क्षेत्रों में एक महान अग्रिम का प्रतिनिधित्व करता था।
माइक्रोस्कोपी और पौधे के शरीर रचना विज्ञान में इसका उपयोग
पौधों की संरचनाओं के अध्ययन में माइक्रोस्कोपी के निर्माण और विकास से निकटता से विकास हुआ है। 17 वीं शताब्दी में उनके आविष्कार के बाद से, माइक्रोस्कोप बौद्धिक उपकरण में विकसित हुए हैं जिन्होंने जैविक विज्ञान के कई क्षेत्रों को आकार दिया है।
माइक्रोस्कोपी के विकास के पक्षधर होने वाले पहले क्षेत्रों में से एक वनस्पति विज्ञान था, विशेष रूप से शारीरिक अध्ययन में। प्रायोगिक वैज्ञानिकों रॉबर्ट हूक और लीउवेनहॉक को 17 वीं शताब्दी के दौरान सूक्ष्म रूप से निरीक्षण करने और विभिन्न संरचनाओं का वर्णन करने वाले पहले लोगों में से एक माना गया है।
माल्पीघी और ग्रेव के काम में, माइक्रोस्कोपी ने एक मौलिक भूमिका निभाई, इन दो मूल्यवान वनस्पति कार्यों के विकास की अनुमति दी, जिससे 17 वीं शताब्दी के इन महत्वपूर्ण वैज्ञानिकों ने पौधे शरीर रचना और वनस्पति माइक्रोग्राफी के अग्रदूत बन गए।
तब से, संयंत्र शरीर रचना विज्ञान के अध्ययन को माइक्रोस्कोपी के साथ मिलकर विकसित किया गया है। उत्तरार्द्ध मनुष्य की ज्ञान आवश्यकताओं के अनुसार विकसित हो रहा था।
माइक्रोस्कोपी वर्तमान में संयंत्र संरचनाओं के अध्ययन में एक आवश्यक उपकरण है, जहां इसका उपयोग साधारण आवर्धक चश्मे से उन्नत प्रौद्योगिकी इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शी तक किया जाता है।
प्लांट एनाटॉमी अध्ययन क्या करता है?
प्लांट एनाटॉमी सभी ऊतकों और उसी के संगठन के रूपों के अध्ययन के लिए जिम्मेदार है, जो पौधों में मौजूद हैं। यह इंगित करता है कि यह ऊतकों और आंतरिक सेलुलर संगठन और बाहरी संरचनाओं के अध्ययन दोनों का मूल्यांकन करता है।
मूल्यांकित संरचनाओं में से हैं: पत्तियाँ, तने, छाल, जड़, तना और जड़ युक्तियाँ, कोशिका विभेदन के बाद गुण और ऊतक, अंगों में कोशिका व्यवस्था, अन्य।
तरीके और तकनीक
पौधों की शारीरिक रचना के अध्ययन के लिए लागू तकनीक बहुत विविध हैं। उनमें से प्रत्येक उस ऊतक या अंग पर निर्भर करेगा जिसका अध्ययन किया जा रहा है।
सामान्य तौर पर, सूक्ष्म अध्ययन की स्थायी तैयारी अनुसंधान और शिक्षण दोनों में प्राथमिक जानकारी के स्रोत के रूप में अपरिहार्य है। हालांकि, विभिन्न शारीरिक ऊतकों के नमूनों के निर्धारण के लिए, उनके बाद के अवलोकन के लिए बुनियादी तकनीकों की एक श्रृंखला को निष्पादित किया जाना चाहिए।
उत्तरार्द्ध लागू होते हैं क्योंकि ऊतकों और उनके घटकों को प्रत्यक्ष टिप्पणियों के साथ स्पष्ट रूप से अंतर करना मुश्किल है।
सभी पौधे एक ही मूल, त्वचीय, मौलिक और संवहनी ऊतकों से बने होते हैं। इन ऊतकों के भीतर, जिस तरह से कोशिकाओं को व्यवस्थित किया जाता है, वह पौधों के बीच अलग-अलग होता है और इसलिए, उनके प्रसंस्करण के लिए संरचनात्मक तरीके अलग-अलग होते हैं।
सामान्य तौर पर, अध्ययन की जाने वाली वनस्पति सामग्री को कुछ विशेषताओं से मिलना चाहिए, उदाहरण के लिए, कि संरचनाएं पूरी तरह से स्वस्थ और विकसित हैं। इसके अतिरिक्त, उनके पास बाहरी या आंतरिक संरचनात्मक क्षति नहीं होनी चाहिए और उनका रंग अध्ययन किए गए प्रजातियों की विशिष्ट है और यह कि जिस नमूने से नमूने लिए गए हैं वह प्रतिनिधि है।
फिक्सेशन
फिक्सेशन प्रक्रिया ऊतकों और उनकी रूपात्मक विशेषताओं को संरक्षित करने का प्रयास करती है, जब ऊतक जीवित था। यह भौतिक या रासायनिक सुधारों के साथ प्राप्त किया जा सकता है। सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले सरल फिक्स्चर हैं जैसे कि इथेनॉल, मेथनॉल या एसीटोन, जो निर्जलीकरण द्वारा ठीक होते हैं।
वे छोटे नमूनों के लिए बहुत अच्छी तरह से काम करते हैं और ऊतक रंजकता को भी संरक्षित कर सकते हैं। एल्डिहाइड जैसे कि फॉर्मल्डिहाइड, ग्लूटारलडिहाइड, और एक्रोलिन का भी उपयोग किया जा सकता है। अन्य coagulating जुड़नारों में इथेनॉल, पिक्रिक एसिड, पारा क्लोराइड और क्रोमियम ट्राइऑक्साइड शामिल हैं।
फिक्सिंग मिश्रण का भी उपयोग किया जाता है, जिनमें से 2000 से अधिक प्रकाशित सूत्र हैं, सबसे अधिक बार एफएए, क्रोमिक एसिड के साथ जुड़नार, किसान और कार्नॉय मिश्रण, अन्य।
हमेशा इस प्रक्रिया के दौरान, फिक्सेशन के समय और जिस तापमान पर यह किया जाता है, उसके साथ विशेष सावधानी बरतनी चाहिए, क्योंकि ऑटोलिसिस जैसी प्रक्रियाओं को तेज किया जा सकता है।
इसलिए, ऊतकों में कलाकृतियों के निर्माण से बचने के लिए इसे कम तापमान पर और ऊतक के शारीरिक के करीब एक पीएच में प्रदर्शन करने की सिफारिश की जाती है जो खुद को शारीरिक गलत व्याख्याओं के लिए उधार देते हैं।
निर्जलीकरण
इसमें पहले से तय पौधों के ऊतकों की पानी की मात्रा को समाप्त किया जाता है। यह अक्सर निर्जलीकरण एजेंटों के बढ़ते प्रवणता के साथ किया जाता है जो पैराफिन के लिए विलायक नहीं हो सकता है, जिसमें पैराफिन शामिल करने के लिए मुख्य एजेंटों में से एक है।
पैराफिन के विलायक निर्जलीकरण मुख्य रूप से 30, 50, 70 और 95% की श्रृंखला में इथेनॉल के साथ किया जाता है।
इस प्रक्रिया के बाद, ऊतकों को एक पैराफिन विलायक निर्जलीकरण एजेंट में स्थानांतरित किया जाता है। ये एजेंट आम तौर पर ऊतकों को पारभासी बनाते हैं। सबसे आम एजेंट xylene और क्लोरोफॉर्म हैं। इन अभिकर्मकों के लिए एक सांद्रता श्रृंखला का भी उपयोग किया जाता है।
पैराफिन में ऊतकों की घुसपैठ / एम्बेडिंग
इस ऑपरेशन को घुसपैठ / समावेशन माध्यम के साथ निर्जलीकरण माध्यम को बदलने के लिए किया जाता है। यह ऊतकों और गुहाओं के अस्थायी सख्त होने के कारण ऊतक को पर्याप्त कठोरता प्रदान करता है, जो इसे प्रस्तुत करता है। सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली सामग्री हिस्टोलॉजिकल पैराफिन है।
microtomy
पैराफिन ब्लॉकों में शामिल नमूनों को एक माइक्रोटेम की मदद से सेक्शन किया जाता है, जो सूक्ष्मदर्शी के तहत देखे जाने वाले कटों को पतला बनाता है। सभी रूपात्मक संरचनाओं को इस तरह से काटने के बाद संरक्षित किया जाता है ताकि ऊतक के अध्ययन में सुविधा हो।
सामान्य तौर पर, कट 1 से 30 माइक्रोन मोटे होते हैं। कई प्रकार के माइक्रोटेम होते हैं जो अक्सर उपयोग किए जाते हैं, जिसमें बेंचटॉप माइक्रोटेम, फ्रीज, क्रायोस्टेट, स्लाइड रोटेशन और अल्ट्रामाइक्रोमेट शामिल हैं। उनमें से कुछ विशेष हीरे या कांच के ब्लेड के साथ।
धुंधला हो जाना
विभिन्न सेलुलर घटकों के अवलोकन और विश्लेषण की सुविधा के लिए हिस्टोलॉजिकल अनुभागों को दाग दिया जाता है।
रंग और धुंधला तकनीक को लागू किया जाता है, जिसके आधार पर संरचनाएं अधिक आसानी से देखी जा सकती हैं। वनस्पति विज्ञान में उपयोग किए जाने वाले सबसे आम रंजक सफारी "ओ", तेजी से हरे रंग के एफसीएफ, हेमटॉक्सिलिन, ऑरेंज जी, एनिलिन नीले और टोल्यूडाइन नीले हैं। एक डाई या दूसरे का चयन रंग की संरचना के साथ डाई की आयनिक आत्मीयता पर निर्भर करता है।
कॉन्ट्रास्ट दाग जैसे कि सफ़ारीन "ओ" और फास्ट ग्रीन एफसीएफ के संयोजन का भी उपयोग किया जा सकता है। Safranin दाग लाल, लाल दीवारों, नाभिक, क्रोमेटिन और गाढ़ा टैनिन, और suberin लाल-भूरे रंग। जबकि एफसीएफ दाग सेलुलोसिक दीवारें नीली दिखती हैं और साइटोप्लाज्म के लिए एक हरे रंग की टोन होती है।
दूसरी ओर, टोलिडाइन नीले रंग के कपड़े फैले हुए गहरे नीले / लाल रंग से लेकर हल्के नीले / गुलाबी तक होते हैं।
हिस्टोकेमिकल परीक्षण
हिस्टोकेमिकल परीक्षणों का उपयोग अध्ययन किए गए ऊतक में मौजूद अणुओं या अणुओं के परिवारों को प्रकट करने और उनके ऊतक वितरण का मूल्यांकन करने के लिए "सीटू" में किया जाता है।
ये परीक्षण रासायनिक प्रतिक्रियाओं का उपयोग करके मुक्त या संयुग्मित कार्बोहाइड्रेट और एंजाइमैटिक हिस्टोकेमिकल परीक्षणों का पता लगाने के लिए किया जा सकता है, जिसमें ऊतक के रासायनिक निर्धारण के बाद भी सेलुलर एंजाइमी गतिविधि का पता लगाया जाता है।
तकनीक के इस सेट का अंतिम उत्पाद माइक्रोस्कोपी टूल के साथ तैयार किए गए ऊतकीय अनुभाग के मूल्यांकन के साथ समाप्त होता है। ऑप्टिकल या इलेक्ट्रॉनिक माइक्रोस्कोप का उपयोग किया जा सकता है, या तो स्कैनिंग या ट्रांसमिशन। इनमें से कई पात्र बहुत छोटे (अल्ट्रा स्ट्रक्चरल या माइक्रोमॉर्फोलॉजिकल) हैं।
अन्य तकनीकों में उनके घटकों को अलग करने और उन्हें व्यक्तिगत रूप से निरीक्षण करने के लिए पौधे के ऊतकों का मैक्रोशन शामिल है। इसका एक उदाहरण लकड़ी जैसे ऊतकों का स्थिरीकरण है, जो ट्रेकिअल तत्वों और अन्य संरचनाओं के अवलोकन की सुविधा देता है और उनका विस्तृत विश्लेषण करता है।
संदर्भ
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