रक्त संस्कृति: इसके लिए क्या है, औचित्य, प्रक्रिया, परिणाम - जीवविज्ञान - 2025

रक्त संस्कृति एक जीवाणु परीक्षण रक्त में सूक्ष्म जीवाणुओं की उपस्थिति का पता लगाने के लिए प्रयास करता है। रक्त प्रकृति द्वारा एक बाँझ तरल है और इस प्रकार इसे शारीरिक स्थितियों के तहत रखा जाना चाहिए, इसलिए रक्त में बैक्टीरिया या कवक की उपस्थिति हमेशा पैथोलॉजिकल होती है।

जब बैक्टीरिया या कवक रक्त में पाए जाते हैं, लेकिन गुणा प्रतिरक्षा प्रणाली द्वारा सूक्ष्मजीवों के उन्मूलन से अधिक नहीं होता है, तो इसे जीवाणु (बैक्टीरिया के लिए) या कवक (कवक के लिए) कहा जाता है; लेकिन अगर सूक्ष्मजीव संख्या में अनियंत्रित रूप से बढ़ जाते हैं, तो इसे सेप्टिसीमिया कहा जाता है।

रक्त संस्कृति की बोतलें (पीली: बाल चिकित्सा एरोबायोसिस, हरा: वयस्क एरोबायोसिस, और लाल: वयस्क एनारोबायोसिस)। स्रोत: लेखक एमएससी मैरीलेसा गिल द्वारा ली गई तस्वीर।

बैक्टीरिया, कवक और सेप्टीसीमिया रोगी के जीवन को खतरे में डालते हैं और इसलिए तुरंत इलाज किया जाना चाहिए। इसीलिए, जब रक्त में संक्रमण का संदेह होता है, तो डॉक्टर रक्त संस्कृति अध्ययन का अनुरोध करते हैं।

यह जीवाणुविज्ञानी विश्लेषण यह जानने की अनुमति देता है कि रक्त में कोई संक्रमण है या नहीं और इसमें सूक्ष्मजीव शामिल है या नहीं। इसके अलावा, यदि यह सकारात्मक है, तो यह जानने के लिए एक संवेदनशीलता परीक्षण किया जाता है कि उपचार में किस एंटीबायोटिक या एंटिफंगल का उपयोग किया जा सकता है।

अगर, दूसरी ओर, रक्त संवर्धन ऊष्मायन के 24 घंटों में नकारात्मक है, तो इसे तब तक नहीं छोड़ना चाहिए जब तक कि यह 240 घंटे तक नकारात्मक न हो। यह सुनिश्चित करता है कि धीमी गति से बढ़ने वाले सूक्ष्मजीव नहीं हैं।

रक्त संस्कृति के विश्वसनीय होने के लिए, नमूना लेते समय अत्यधिक सड़न रोकने वाले उपायों को अपनाया जाना चाहिए, और परीक्षण की विश्वसनीयता और संवेदनशीलता को बढ़ाने के लिए, बुखार के चरम के दौरान या उसके पास न्यूनतम दो नमूने लेने चाहिए।

ये किसके लिये है?

रक्त एक बाँझ तरल है और जब सूक्ष्मजीव इसमें पाए जाते हैं तो यह 100% पैथोलॉजिकल है। यह स्थिति एक बहुत ही नाजुक नैदानिक ​​तस्वीर का प्रतिनिधित्व करती है जो रोगी के जीवन से समझौता करती है।

रक्त संस्कृति एक महत्वपूर्ण बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षण है जो रक्तप्रवाह में सूक्ष्मजीवों की उपस्थिति का पता लगाता है।

सूक्ष्मजीव विभिन्न मार्गों से रक्त तक पहुंच सकते हैं, जो अतिरिक्त संक्रमण हो सकते हैं जैसे: निमोनिया, अंतर पेट में संक्रमण, पायलोनेफ्राइटिस, त्वचा के गंभीर संक्रमण, कोमल ऊतक या गठिया, अन्य।

या यह अंतःशिरा भी हो सकता है, उदाहरण के लिए, अंतःशिरा या धमनी कैथेटर, एंडोकार्डिटिस, अंतःशिरा नशीली दवाओं की लत, दूषित दवाओं या समाधानों का प्रशासन आदि।

रोगी के अस्तित्व को सुनिश्चित करने के लिए समय में सेप्सिस के प्रेरक एजेंट का पता लगाना और उपचार करना आवश्यक है।

इस अर्थ में, डॉक्टर को एक रक्त संस्कृति की प्राप्ति का संकेत देना चाहिए जब वह ऐसे लक्षणों और लक्षणों का निरीक्षण करता है जो सेप्टिसीमिया का संदेह करते हैं, जैसे: स्पष्ट संक्रामक ध्यान के बिना बुखार (38 डिग्री सेल्सियस से अधिक) या इसके विपरीत, हाइपोथर्मिया (<de) 36 ° C)।

अन्य संकेत हो सकते हैं: ठंड लगना, श्वेत रक्त कोशिका की गिनती में वृद्धि (> 10,000 कोशिकाएं / मिमी ³) या बहुरूपी कोशिकाओं में भारी कमी (<1,000 PMN / mm ³)। अन्य चेतावनी के संकेतों के साथ-साथ मल्टीग्रेन की गिरावट या जीवन शक्ति का अचानक घट जाना।

बैक्टीरिया लगातार, क्षणिक या रुक-रुक कर हो सकता है। नमूना लेते समय यह महत्वपूर्ण है, क्योंकि जब सूक्ष्मजीव परिसंचारी होने की अधिक संभावना है, तो इसे लेना आवश्यक है।

इसलिए विभिन्न स्थानों में कम से कम 2 नमूने लेने की सिफारिश की जाती है। इसके अलावा, आदर्श यह है कि नमूना बुखार की चोटियों में लिया जाता है या जब रोगी कंपकंपी, अति हाइपोथर्मिया, पसीना या टैचीकार्डिया प्रस्तुत करता है।

हालांकि, रक्त संस्कृति के लिए वास्तव में उपयोगी उपकरण होने के लिए, नमूने को अत्यधिक सावधानी से लिया जाना चाहिए। नमूना लेने के क्षण में एक खराब हेरफेर या खराब एसिप्सिस परीक्षण को अमान्य कर सकता है, झूठी सकारात्मकता प्राप्त कर सकता है।

आधार

अध्ययन में दो या तीन रक्त के नमूने लेने के साथ-साथ इसे विशेष बोतलों में रखना शामिल है।

रक्त के नमूनों की खेती के लिए विशेष उपकरणों को रक्त संस्कृति की बोतलें कहा जाता है। इन्हें निम्न में वर्गीकृत किया गया है:

मरीज की उम्र के अनुसार

-चिकित्सा उपयोग

-वयस्कों के लिए।

सूक्ष्मजीव के प्रकार के अनुसार

एरोबिक सूक्ष्मजीवों (एरोबिक बैक्टीरिया, संकाय बैक्टीरिया और कवक) के लिए मास्क।

-अनारोबिक सूक्ष्मजीवों (सख्त अवायवीय बैक्टीरिया) के लिए बाढ़ संस्कृति की बोतलें।

कुछ में तरल संस्कृति का माध्यम होता है और कुछ में ठोस और तरल संस्कृति का माध्यम होता है। वे सक्रिय कार्बन कणों के साथ भी मौजूद हैं।

प्रक्रिया

सैंपलिंग के लिए सिफारिशें

- माइक्रोबायोलॉजी के क्षेत्र में उच्च प्रशिक्षित और प्रशिक्षित कर्मियों द्वारा लिया जाने वाला नमूना।

- नमूना संग्रह स्थल की एन्सेप्सिस या पूरी तरह से सफाई निस्संदेह सबसे महत्वपूर्ण कदम है।

- सभी नमूनों की तरह, स्वास्थ्य कर्मियों को पूरी तरह से प्रक्रिया के दौरान जैव सुरक्षा उपायों का पालन करना चाहिए (दस्ताने, गाउन, चश्मा, दूसरों के बीच का उपयोग)।

- ध्यान रखें कि नमूने लेने के लिए सभी आवश्यक उपकरण उपलब्ध हैं।

- रोगी के पूरे नाम, दिनांक, मेडिकल रिकॉर्ड संख्या, नमूना संग्रह समय और प्रयोगशाला अनुक्रम संख्या के साथ शीशियों को लेबल करें।

-मॉडल को रोगाणुरोधी थेरेपी शुरू करने से पहले आदर्श लेना है। यह केवल इस मामले में संकेत दिया गया है कि प्रगति में उपचार के गैर-कामकाज का संदेह है। इस मामले में, नमूना को दवा परिवर्तन से पहले लिया जाना चाहिए, एंटीबायोटिक अवरोधकों (सक्रिय कार्बन कणों) के साथ रक्त संस्कृति की बोतलों का उपयोग करना।

- कम से कम 2 नमूनों को अलग-अलग शारीरिक साइटों में लिया जाना चाहिए, जैसे कि दाएं हाथ और बाएं हाथ। संदिग्ध एंडोकार्डिटिस में, 3 नमूनों की सिफारिश की जाती है। प्रत्येक नमूने में दो बोतलें शामिल की जाएंगी (एक एरोबायोसिस के लिए और एक एनारोबायोसिस के लिए)।

नमूना मात्रा

रोगी की आयु के अनुसार नमूने की मात्रा भिन्न होती है, लेकिन रक्त / संस्कृति शोरबा कमजोर पड़ने के संबंध में 1: 5 से 1:10 का अनुपात हमेशा बना रहना चाहिए।

नवजात शिशुओं में, अनुशंसित नमूना मात्रा प्रति शीशी 1 मिलीलीटर रक्त है। बाल चिकित्सा बोतल का उपयोग किया जाता है।

एक महीने से एक वर्ष के बीच के शिशुओं के मामले में, इसे प्रति बोतल 1.5 मिलीलीटर रक्त में बढ़ाया जा सकता है। बाल चिकित्सा बोतल का उपयोग किया जाता है।

2 वर्ष से अधिक उम्र के बच्चों में उचित नमूना राशि प्रति शीशी 2.5 मिली रक्त है। बाल चिकित्सा बोतल का उपयोग किया जाता है।

किशोरावस्था से इसे 5 से 10 मिलीलीटर प्रति बोतल के बीच रक्त की मात्रा तक बढ़ाया जा सकता है। एक वयस्क बोतल का उपयोग किया जाता है।

अंत में, वयस्क चरण में, आवश्यक मात्रा 8-10 मिलीलीटर प्रति बोतल है। एक वयस्क बोतल का उपयोग किया जाता है।

सैम्पलिंग

- रक्त का नमूना शिरापरक या धमनी हो सकता है। हालांकि, धमनी रक्त तभी लिया जाता है जब शिरापरक नमूना असंभव हो।

- जब तक केंद्रीय शिरापरक कैथेटर से नमूना लेने की सिफारिश नहीं की जाती है:

1. नमूना को परिधीय रूप से (शिरापरक या धमनी) लेना असंभव है।
2. रक्तस्राव का खतरा रोगियों।
3. जब केंद्रीय शिरापरक कैथेटर के संदूषण के कारण डॉक्टर को बैक्टेरिमिया पर संदेह होता है।
4. जब बुखार 4 से 5 दिनों के ज्वर के खत्म होने के बाद फिर से प्रकट होता है, भले ही रोगी रोगाणुरोधी उपचार पर हो या न हो।

नमूना लेने से पहले

- नमूने के लिए शारीरिक साइटों का चयन करें। आम तौर पर, सबसे अच्छा कैलिबर की नसों को चुना जाता है (बेसिलिक या सेफेलिक नस)।

- अटलांटा (यूएसए) में रोग नियंत्रण केंद्र (सीडीसी) के अनुसार, ऑपरेटर को दस्ताने पहनने के अलावा, नमूना लेने से पहले 2% क्लोरहेक्सिडाइन या 10% पॉवीडोन आयोडीन से अपने हाथ धोने चाहिए।

-पालन करें और उपयोग की जाने वाली नस का पता लगाएं।

पंचर क्षेत्र को एक घूर्णन तरीके से साफ़ करें, साबुन क्लोरहेक्सिडिन या एंटीसेप्टिक साबुन का उपयोग करके केंद्र से बाहर की ओर आंदोलन करें। बाँझ खारा के साथ कुल्ला।

इसके बाद, एक एंटीसेप्टिक लागू करें और इसे कार्य करने दें। उदाहरण के लिए क्लोरहेक्सिडाइन ग्लूकोनेट 0.5% 1 मिनट या पोविडोन आयोडीन 2 मिनट के लिए 10%। उत्तरार्द्ध के लिए, पहले पूछें कि क्या रोगी को आयोडीन से एलर्जी है। यदि आपको एलर्जी है, तो आप 70% शराब का विकल्प चुन सकते हैं।

नमूना निष्कर्षण

- रक्त के प्रवाह को तेज करने और नस को फैलाने के लिए ट्राईकनीकेट रखें।

- पंचर साइट को अपनी उंगली से दोबारा न छुएं। यदि यह कड़ाई से आवश्यक है, तो उंगली को पंचर क्षेत्र के समान ही धोया जाना चाहिए।

-इंजेक्टर सुई या खोपड़ी को नस में डालें और रक्त की आवश्यक मात्रा निकालें।

-सर्दी न होने पर उसे निकालते समय सूई या सूई पर न डालें।

बोतलों से सुरक्षा सील को बहुत सावधानी से और बिना टोपी को छुए हटाएं। कुछ लेखकों ने नमूने को टीका लगाने से पहले टोपी की कीटाणुशोधन प्रदर्शन करने की सलाह दी।

- शीशियों में उचित मात्रा में रक्त वितरित करें। यदि नमूना एक इंजेक्टर के साथ लिया जाता है, तो आवश्यक मात्रा पहले अवायवीय फ्लास्क में और फिर एरोबिक फ्लास्क में डाली जाती है। यदि लेप खोपड़ी (तितली) के साथ किया जाता है, तो इसे विपरीत तरीके से डाला जाता है।

- ब्लड कल्चर की बोतल को उलटा करके धीरे से मिलाएं।

- दस्ताने बदलें और दूसरे नमूना संग्रह के लिए पिछले चरणों को दोहराएं।

-अगर दूसरा सैंपल अलग साइट से लिया गया है, तो उसे तुरंत किया जा सकता है, लेकिन अगर यह उसी साइट से है, तो आपको एक सैंपल और दूसरे के बीच 30 से 90 मिनट तक इंतजार करना होगा।

- नमूने को जितनी जल्दी हो सके प्रयोगशाला में ले जाना चाहिए, अगर यह संभव नहीं है तो इसे 18 घंटे तक कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाना चाहिए।

संस्कृति

एक बार प्रयोगशाला में, फ्लास्क को क्रमशः प्रत्येक फ्लास्क की स्थिति के तहत 37 ° C पर एरोबियोसिस और एनारोबायोसिस में ऊष्मायन किया जाता है।

मैनुअल विधि के तहत, 24 घंटे ऊष्मायन पर रिंगिंग शुरू की जानी चाहिए और फिर अंतर-दैनिक बजना चाहिए। रिंग्स को निम्नानुसार किया जाता है: पहले बोतल कैप को कीटाणुरहित किया जाता है और एक बाँझ इंजेक्टर की सुई डाली जाती है। तरल फ्लास्क से निकाला जाता है और रक्त अगर और चॉकलेट अगर पर बोया जाता है।

अगर विकास होता है, तो एक ग्राम प्रदर्शन किया जाता है, विशिष्ट मीडिया में उपसंस्कृति, जैव रासायनिक परीक्षण और एंटीबायोग्राम।

स्वचालित तरीकों में बैक्ट / अलर्ट उपकरण एक अलार्म का उत्सर्जन करता है जब यह पता लगाता है कि एक शीशी सकारात्मक है। उसी तरह, यह रक्त अगर और चॉकलेट अगर पर टैप किया जाना चाहिए।

एक अन्य विधि जो जमीन हासिल कर रही है वह मास स्पेक्ट्रोमेट्री के माध्यम से ऊष्मायन के 6 घंटे के बाद फ्लास्क का विश्लेषण करना है। इस पद्धति ने निदान की संवेदनशीलता और गति को बढ़ाने में मदद की है।

परिणाम

जब तक रक्त संस्कृति की बोतल नकारात्मक होती है, तब तक प्रारंभिक मध्यवर्ती रिपोर्ट इलाज चिकित्सक को दी जा सकती है। रिपोर्ट इंगित करती है कि यह उन घंटों में नकारात्मक है जो इसे ऊष्मायन कर रहे हैं। उदाहरण के लिए, यदि यह चौथे दिन तक नकारात्मक हो जाता है, तो इसे निम्नानुसार रिपोर्ट किया जाएगा:

प्रारंभिक परिणाम: ऊष्मायन के 96 घंटे में नकारात्मक संस्कृति।

नोट: अध्ययन 240 घंटे तक जारी है।

यदि रक्त संस्कृति सकारात्मक है, तो उपचार करने वाले चिकित्सक को तुरंत सूचित किया जाता है और कम से कम कॉलोनी के ग्राम के साथ एक रिपोर्ट भेजी जाती है। उदाहरण:

प्रारंभिक परिणाम: ऊष्मायन के 48 घंटों में सकारात्मक संस्कृति में, ग्राम नकारात्मक बेसिली और नकारात्मक ऑक्सीडेज मनाया जाता है। पहचान और संवेदनशीलता परीक्षण प्रक्रिया में हैं।

यह जानकारी उपचार करने वाले चिकित्सक को प्रयोगशाला के अंतिम परिणाम की प्रतीक्षा करते हुए, संभव सूक्ष्मजीव की ओर एक अनुभवजन्य चिकित्सा शुरू करने के लिए निर्देशित करती है।

बैक्टीरियोलॉजिकल अध्ययन पूरा होने पर, अर्थात्, सूक्ष्मजीव की पहचान की गई है और एंटीबायोग्राम उपलब्ध है, अंतिम रिपोर्ट जल्द से जल्द भेजी जानी चाहिए।

यदि लक्ष्य जीव नेइसेरिया गोनोरिया या निसेरिया मेनिंगिटिडिस है तो विशेष देखभाल की जानी चाहिए, क्योंकि ये जीवाणु सोडियम पॉलेनेथोसल्फानेट (एसपीएस) की उच्च सांद्रता की उपस्थिति में बाधित होते हैं।

इसीलिए यह यौगिक रक्त संस्कृति की बोतलों में 0.025% से अधिक नहीं होना चाहिए।

दूसरी ओर, अगर ब्लड कल्चर सैंपल को सबसे पहले वैक्युएंटर ट्यूब्स में लिया जाता है, तो इन ट्यूब्स में मेनिंगोकोकी और गोनोकोकी के लिए एसपीएस टॉक्सिक की सांद्रता होती है, इसलिए ब्लड को 1 घंटे के भीतर ब्रोथ कल्चर सिस्टम में ट्रांसफर कर देना चाहिए।

कैसे बताएं कि रक्त संस्कृति सकारात्मक है या दूषित

एक रक्त संस्कृति को तब दूषित माना जाता है जब कुल ली गई रक्त में से केवल एक रक्त संस्कृति में वृद्धि होती है। और संदूषण का संदेह बढ़ जाता है यदि पृथक सूक्ष्मजीव एक आदतन त्वचा माइक्रोबायोटा है: उदाहरण: स्टैफिलोकोकस कोगुलेज़ नकारात्मक, प्रोपियोबैक्टीरियम एसपीपी, अन्य।

हालांकि, प्रतिरक्षाविज्ञानी रोगियों में, किसी भी सूक्ष्मजीव की उपेक्षा नहीं की जानी चाहिए, लेकिन इस मामले में सूक्ष्मजीव को कई नमूनों में दिखाई देना चाहिए।

दूसरी ओर, यदि दो अलग-अलग नमूनों में एक ही सूक्ष्मजीव के एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति संवेदनशीलता समान है, तो संक्रमण वास्तविक है।

एक और विशेषता जीवाणु भार है, क्योंकि दूषित रक्त संस्कृतियां देर से बढ़ती हैं, जबकि अनुपचारित रोगियों में वास्तविक संक्रमण ऊष्मायन के 14 घंटे में आमतौर पर सकारात्मक होते हैं जब सूक्ष्मजीव गैर-परेशान होते हैं।

दूसरी ओर, रोगाणुरोधी के साथ इलाज किए गए रोगियों में शामिल सूक्ष्मजीव को बढ़ने में समय लग सकता है क्योंकि लोड बहुत कम है।

एक से अधिक सूक्ष्मजीवों की उपस्थिति संदूषण का सुझाव दे सकती है, लेकिन यदि एक ही परिणाम को विभिन्न साइटों से कई शॉट्स में दोहराया जाता है, तो यह वास्तविक है।

संदर्भ

1. "रक्त संस्कृति।" विकिपीडिया, एक निशुल्क विश्वकोश। 3 जुलाई 2019, 17:28 यूटीसी। 14 जुलाई 2019, 19:05 en.wikipedia.org
2. माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोसिस में हर्वे बी। नई प्रौद्योगिकियां: माइक्रोबियल आइडेंटिफिकेशन और सेंसेसेबिलिटी स्टडी में ऑटोमेशन और कुछ एप्लिकेशन। रेव। मेड। क्लिन। गिना जाता है। 2015; 26 (6) 753-763। यहाँ उपलब्ध है: Reader.elsevier.com
3. विलारेलो पी। अध्याय 20: सेप्सिस और हृदय रोग का खतरा। हृदय स्वास्थ्य। पीपी 187-194। पर उपलब्ध: fbbva.es
4. सान्चेज़ आर, रिनकोन बी, कोर्टेस सी, फर्नांडीज ई, पेना एस, हेरास ईएम रक्त संस्कृतियों: उन्होंने आपको क्या बताया है और आप क्या करते हैं? बीमार glob। 2012; 11 (26): 146-163। यहां उपलब्ध है: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. एक सकारात्मक रक्त संस्कृति प्राप्त करने की सफलता की संभावना। मेड। इंटिना मेक्स। 2017; 33 (1): 28-40। पर उपलब्ध: scielo.org