CZAPEK AGAR: तर्क, तैयारी, उपयोग और सीमाएँ - जीवविज्ञान - 2025

Czapek (CZA) एक चयनात्मक ठोस माध्यम विशेष रूप से मृतोपजीवी जीवाणु और कवक उगाने के लिए बनाया गया है। इसे पोलिश मूल के वनस्पतिशास्त्री फ्रेडरिक जोहान फ्रांज कज़ेपेक और अमेरिकी रसायनज्ञ आर्थर वेलैंड डॉक्स ने बनाया था। इस कारण से, इस अगर को Czapek-Dox माध्यम के रूप में भी जाना जाता है।

मूल माध्यम तरल था, लेकिन इसे एक ठोस माध्यम बनाने के लिए अगर को बाद में जोड़ा गया। Czapek माध्यम सोडियम नाइट्रेट, बिपोटेशियम फॉस्फेट, मैग्नीशियम सल्फेट, पोटेशियम क्लोराइड, फेरस सल्फेट, सुक्रोज, अगर और आसुत जल से बना है।

Czapek agar A. Aspergillus parasiticus B. Aspergillus fumigatus Source: A. Medmyco / B. फोटो: डॉ। डेविड मिडगली। Wikipedia.com

Czapek agar का pH 7.3 है, लेकिन एक ऐसा वैरिएंट है जिसमें 10% लैक्टिक एसिड मिलाया जाता है, जिसका pH 3.5 पर रहता है। इस एसिड माध्यम का उपयोग एसिडोफिलिक सूक्ष्मजीवों की खेती के लिए किया जाता है।

दूसरी ओर, कुछ वाणिज्यिक घरों ने ग्लिसरॉस्फेट द्वारा मैग्नीशियम सल्फेट और बिपोटेशियम फॉस्फेट को बदलकर Czapek agar की संरचना को संशोधित किया; यह संशोधन पारंपरिक फार्मूला बनाने से मैग्नीशियम फॉस्फेट अवक्षेपण को रोकता है। इसी तरह, एक और प्रकार है जिसमें खमीर निकालने को जोड़ा जाता है।

अंत में, Czapek agar को Actinomycetes sp, Aspergillus sp, Paecilomyces sp और Penicillium sp के अध्ययन के लिए अमेरिकन पब्लिक हेल्थ एसोसिएशन APHA द्वारा अनुशंसित किया जाता है। इन प्रजातियों को पर्यावरणीय सूक्ष्मजीव और अवसरवादी रोगजनकों द्वारा विशेषता है।

आधार

इस माध्यम में सुक्रोज होता है; यह कार्बोहाइड्रेट कार्बन स्रोत के रूप में कार्य करता है, जबकि सोडियम नाइट्रेट नाइट्रोजन स्रोत है, लेकिन अन्य मीडिया के विपरीत, प्रदान किया गया नाइट्रोजन अकार्बनिक है।

इस कारण से, Czapek माध्यम को चयनात्मक माना जाता है, क्योंकि केवल सूक्ष्मजीव अकार्बनिक यौगिकों का उपयोग करने में सक्षम हैं क्योंकि एकमात्र नाइट्रोजन स्रोत विकसित हो सकता है।

माध्यम के परासरण के नियमन पदार्थ के रूप में बाइपोटेशियम फॉस्फेट होता है। उनके भाग के लिए, मैग्नीशियम सल्फेट, पोटेशियम क्लोराइड और फेरस सल्फेट सैप्रोफाइटिक (मुक्त-जीवित) सूक्ष्मजीवों की वृद्धि के लिए आवश्यक खनिज प्रदान करते हैं। यह सूत्र मैग्नीशियम फॉस्फेट का एक अवक्षेप बनाता है।

अंत में, अगर-अग्र वह यौगिक है जो मध्यम को ठोस स्थिरता प्रदान करता है और पानी सभी घटकों के लिए विलायक है।

संशोधित Czapek अगर फार्मूला के साथ, कोई उपसर्ग गठन नहीं है और यह कुछ कवक के विकास के प्रदर्शन में सुधार करता है।

एसिड Czapek Agar की चरम अम्लता इसे और अधिक चयनात्मक माध्यम बनाती है, जिससे केवल एसिडोफिलिक सूक्ष्मजीवों की वृद्धि होती है, जो अकार्बनिक नाइट्रोजन का उपयोग करने में सक्षम है। इस बीच, Czapek- खमीर अगर कुछ मशरूम के प्रदर्शन में सुधार करता है।

तैयारी

मध्यम Czapek- डोक्स

निर्जलित संस्कृति माध्यम के 49 ग्राम वजन और आसुत जल में भंग। उबाल आने तक गर्म करें। पूरी तरह से भंग होने तक मिश्रण को बार-बार हिलाएं।

-कजपेक अगर वेगेस

15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर ट्यूबों और आटोक्लेव में भंग मिश्रण वितरित करें। आटोक्लेव से हटाते समय, ट्यूबों को बिछाने से पहले समरूप करना और जमने देना।

-ज़ापेक अगर प्लेट

15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर भंग मिश्रण को आटोक्लेव करें और इसे 50 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा करने के लिए छोड़ दें, होमोजेनाइज करें और बाँझ पेट्री डिश में 20 मिलीलीटर डालें। उपयोग करने तक फ्रिज में जमने, पलटने और स्टोर करने दें।

पीएच 7.3 should 0.2 पर रहना चाहिए। निर्जलित माध्यम का रंग सफेद है और तैयार माध्यम हल्का एम्बर है, एक flocculating वेग की उपस्थिति के कारण थोड़ा बादल है।

अम्लीय पीएच में Czapek माध्यम

पहले से वर्णित के रूप में तैयार करें, लेकिन तैयार किए गए माध्यम के प्रत्येक लीटर के लिए 10 मिलीलीटर बाँझ 10% लैक्टिक एसिड मिलाएं। संशोधित Czapek माध्यम पीएच 3.5 z 0.2 पर होना चाहिए।

संशोधित Czapek मध्यम

निर्जलित माध्यम का 45.4 ग्राम वजन और 1 लीटर पानी में भंग। बाकी तैयारी वही है जो ऊपर वर्णित है। निर्जलित माध्यम का रंग सफेद है और तैयार माध्यम सफेद है। मध्यम का अंतिम पीएच 6.8। 0.2 है।

Czapek- खमीर माध्यम

जिसे Czapek Yeast Extract Agar (CYA) भी कहा जाता है। इसमें क्लासिक Czapek agar प्लस खमीर निकालने के तत्व शामिल हैं।

उपयोग

Czapek माध्यम का उपयोग मिट्टी, सब्जियों, अनाज, हवा, कीड़ों के नमूनों में सैप्रोफाइटिक सूक्ष्मजीवों की खोज के लिए किया जाता है।

अम्लीय pH पर Czapek agar का उपयोग acidophilic सूक्ष्मजीवों की वृद्धि के लिए किया जाता है, जबकि संशोधित Czapek agar विशेष रूप से Candida albicans परिसर की प्रजातियों में क्लैमाइडोस्पोरेस के निर्माण के लिए उपयोगी है।

अंत में, Asapgillus और पेनिसिलियम के अलगाव के लिए Czapek- खमीर अगर बहुत उपयोगी है।

बोया

-कजपेक अगर

मिट्टी में एक्टिनोमाइसेट्स की खोज करने के लिए, इस प्रकार आगे बढ़ें: नमूने को 30 मिनट के लिए फिनोलाइज्ड पानी से उपचारित किया जाता है और फिर निलंबन के 1 एमएल को सीजेपेक अगर पर बोया जाता है। 28 डिग्री सेल्सियस पर 5 से 7 दिनों के लिए सेते हैं।

सब्जी, अनाज और कीटों के नमूनों के लिए, उन्हें सीधे अगर पर रखा जाता है। आप तनु और बीज को अग्र सतह पर 0.1 मिलीलीटर भी बना सकते हैं।

-मॉडिफाइड Czapek agar

बोने के लिए, एक सीधी लूप या सुई का उपयोग किया जाता है, इसे स्वाब के साथ लगाया जाता है और प्लेट के आधार को छूने तक एक पंचर बनाकर अगर को निष्क्रिय किया जाता है। 28 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए सेते हैं और क्लैमाइडोस्पोर्स का गठन किया है, यह देखने के लिए प्लेट के ऊपर और नीचे एक माइक्रोस्कोप के नीचे की जाँच करें।

ऊष्मायन तापमान और समय

ऊष्मायन तापमान और समय अलग-अलग होने के लिए सूक्ष्मजीव के प्रकार के आधार पर भिन्न होता है। प्लेटों को आमतौर पर 20 से 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान रेंज में एक से दो सप्ताह के लिए ऊष्मायन किया जाता है।

हालांकि, कुछ उपभेदों के लिए विशिष्ट स्थितियां हैं। उदाहरण के लिए, जीनस एस्परगिलस की अधिकांश प्रजातियां 30 डिग्री सेल्सियस पर आसानी से बढ़ती हैं; हालांकि ए। फ्यूमिगेटस 50 डिग्री सेल्सियस पर बढ़ता है।

ऊष्मायन समय के बारे में एक या दो सप्ताह सामान्य है, हालांकि, कैंडिडा अल्बिकन्स 25 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटे में विकसित हो सकते हैं।

इस माध्यम पर कुछ उपनिवेशों की विशेषताएँ

-पैनिसिलियम एट्रोवेनिटम

यह 27 डिग्री सेल्सियस पर 12 दिनों के ऊष्मायन में विकसित होता है। उनकी उपनिवेश छोटे (25 मिमी) हैं।

कालोनियों में एक मखमली उपस्थिति होती है, जिसमें एक परिभाषित सफेद सीमा और केंद्र में एक नीली-हरी रंगाई होती है जो उम्र के रूप में ग्रे हो जाती है। वर्णक उत्पादन के कारण कॉलोनी का रिवर्स साइड नारंगी है, एक ही रंग के बीच में है।

-एस्परजिलस नाइजर

यह सफेद से पीली मायसेलियम और काले बीजाणुओं के साथ विकसित होता है।

-कैनडीडा अल्बिकन्स

मलाईदार प्रकाश बेज रंग की कॉलोनियां विकसित होती हैं। संशोधित Czapek agar में यह क्लैमाइडोस्पोरस बनाता है।

-एस्पेरगिलस परजीवी

25 डिग्री सेल्सियस पर 7 दिनों में एक गहरे हरे रंग की मायसेलियम विकसित होती है।

क्यूए

संस्कृति माध्यम की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए, प्रमाणित नियंत्रण उपभेदों को लगाया जा सकता है, जैसे: एस्परगिलस नाइजर एमकेटीए 16404, कैंडिडा अल्बिकन्स एमकेटीए 10231।

एस्परगिलस नाइगर लगभग 5 दिनों में एक सफेद से पीले मायसेलियम और काले बीजाणुओं को विकसित करता है, जबकि कैंडिडा अल्बिकन्स 24 डिग्री ऊष्मायन में 25 डिग्री सेल्सियस पर संतोषजनक वृद्धि होगी; कालोनियां क्रीम रंग की होती हैं।

सीमाएं

कुछ अध्ययनों से पता चला है कि एक्टिनोमाइसेट्स की वसूली के लिए, सबसे अच्छी पैदावार वाला एगर आलू डेक्सट्रोज एगर है, जिसमें सीज़ेपेक अगर दूसरे स्थान पर है, लेकिन एस्परगिलस और पेनिसिलियम की वसूली के लिए, सीज़ेपेक अगर एक है जो उच्चतम वसूली दर प्रदान करता है।

संदर्भ

1. डेविला एम, एट अल। कृषि महत्व के फाइटोपैथोजेनिक कवक के खिलाफ विरोधी एक्टिनोमाइसेट्स। रेव। मेक्स। विज्ञान। एग्रीक 2013, 4 (8): 1187-1196। पर उपलब्ध: scielo.org।
2. लूना एम, लोज़ादा वाई, व्हीट्स z। एस्परगिलस नाइगर के उपभेदों का अलगाव, संग्रहित ग्रीन कॉफ़ी (कॉफ़ी अरेबिका) में ऑक्रैटॉक्सिन ए का उत्पादन। रेव। मेक्स। माइक। 2010, 32: 63-68। At.scielo.org पर उपलब्ध है।
3. विकिपीडिया योगदानकर्ता। Czapek माध्यम। विकिपीडिया, एक निशुल्क विश्वकोश। 13 जनवरी, 2019, 20:30 यूटीसी। पर उपलब्ध: en.wikipedia.org
4. कोना प्रादेदिसा प्रयोगशालाएँ। संशोधित Czapek-Dox Agar। पर उपलब्ध: condalab.com
5. संस्कृति मीडिया माइक्रोकिट। Czapek-Dox Agar। मेधावी: Medioscultivo.com