- आधार
- तैयारी
- घर का बना कॉर्नमील अगर तैयारी
- वाणिज्यिक मकई का आटा
- ट्विन 80 के साथ मकई का आटा
- ग्लूकोज के साथ मकई का आटा
- उपयोग
- बोया
- क्लैमाइडोस्पोर प्रदर्शन
- कवक उपभेदों का रखरखाव
- क्यूए
- सीमाएं
- संदर्भ
मकई भोजन अगर एक ठोस संस्कृति मध्यम, निम्न पोषण शक्ति, कुछ कवक के subculturing के लिए और कैंडिडा एल्बीकैंस जटिल के तनाव में chlamydospores प्रदर्शन करने के लिए उपयोगी है। अंग्रेजी में इसे Corn Meal Agar के नाम से जाना जाता है।
पारंपरिक कॉर्नमील माध्यम की एक बहुत ही सरल रचना है, इसमें कॉर्नमील, अगर-अगर और पानी शामिल हैं। अपने कम पोषण स्तर के कारण, यह मध्यम अवधि के लिए कवक उपभेदों के रखरखाव में उपयोग के लिए आदर्श है, विशेष रूप से काली कवक।
A. मकई के आटे पर कैंडिडा अल्बिकंस कॉम्प्लेक्स का ग्राफिक प्रतिनिधित्व। बी। कैंडिडा अल्बिकंस कॉम्प्लेक्स के क्लैमाइडोस्पोरस को माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है, जो कॉर्नमील अगर पर बनता है। स्रोत: ए। ग्राहमकोल्म / बी। द्वारा: सीडीसी / डॉ। विलियम कपलान, सौजन्य: पब्लिक हेल्थ इमेज लाइब्रेरी।
कैंडिडा अल्बिकंस कॉम्प्लेक्स के स्पोरुलेशन को इस माध्यम में पसंद किया जाता है, अगर एगर की तैयारी के दौरान ट्वीन 80 का 1% जोड़ा जाता है। क्लैमाइडोस्पोर का गठन इस प्रजाति की विशेषता है और व्यावहारिक रूप से केवल एक ही है जो मनुष्यों को प्रभावित करता है।
ऐसी अन्य प्रजातियां हैं जो क्लैमाइडोस्पोरस बनाती हैं, लेकिन वे मनुष्यों को प्रभावित करने की संभावना नहीं हैं, जैसे कि कैंडिडा ऑस्ट्रलिस, पेंगुइन बूंदों में मौजूद, या सी। क्लॉज़ेनी, जो शायद ही कभी सामना किया जाने वाला सैप्राफी है। इसी तरह, असाधारण रूप से प्रजातियां सी। स्टेलैटॉइड और सी। ट्रॉपिकलिस उन्हें बना सकती हैं।
दूसरी ओर, कॉर्नमील माध्यम से ग्लूकोज के अलावा ट्राइकोफाइटम रूब्रम उपभेदों में पिगमेंट के गठन का पक्षधर है।
यह उजागर करना महत्वपूर्ण है कि कॉर्नमील अगर में क्रिप्टोकोकस नवोफ़ॉर्मन्स जैसे हाइपे या स्यूडोहाइफ़े का निर्माण नहीं होता है, जो अन्य जेनेरा से भिन्न होते हैं।
Cornmeal agar को प्रयोगशाला में घर पर बनाया जा सकता है या वाणिज्यिक मीडिया का भी उपयोग किया जा सकता है।
आधार
कॉर्नमील सब्सट्रेट है, एगर सॉलिडाइजिंग एजेंट है, और पानी विलायक है।
कॉर्नमील अगर को ट्वीन 80 (सॉर्बिटन मोनोलिएट या पॉलीसॉर्बेट पॉलिएस्टर 80) के साथ पूरक किया जा सकता है। यह यौगिक अपनी पायसीकारी शक्ति के कारण माध्यम की सतह तनाव को कम करता है।
यह एक शत्रुतापूर्ण वातावरण भी बनाता है जो अतिरंजित सेल गुणन को रोकता है और हाइपहे के विकास को उत्तेजित करता है, क्लैमाइडोस्पोर्स के उत्पादन का भी पक्ष लेता है; प्रतिरोध का उत्तरार्द्ध माना जाने वाला ढांचा। यह संरचना कैंडिडा अल्बिकंस प्रजातियों की पहचान करने में मदद करती है।
अपने हिस्से के लिए, इस माध्यम में ग्लूकोज कुछ कवक के वर्णक-गठन क्षमता को बढ़ाता है।
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि ग्लूकोस के साथ कॉर्नमील माध्यम कैंडिडा अल्बिकंस कॉम्प्लेक्स में क्लैमाइडोस्पोरस के प्रदर्शन के लिए उपयोगी नहीं है।
तैयारी
घर का बना कॉर्नमील अगर तैयारी
पीले मकई के आटे की 47 ग्राम मात्रा निकाल लें और आसुत जल के 500 मिलीलीटर में भंग करें। लगभग 1 घंटे की अवधि के लिए तैयारी को सरगर्मी करते हुए, 60 डिग्री सेल्सियस तक गरम करें। फिर धुंध और कपास के एक टुकड़े के माध्यम से फ़िल्टर करें, वैकल्पिक रूप से इसे एक व्हामन नंबर 2 फिल्टर पेपर के माध्यम से तैयारी को पारित करके फिर से फ़िल्टर किया जा सकता है।
आसुत जल के साथ मात्रा को 1000 मिलीलीटर तक करें। 17 ग्राम अगर-अगर जोड़ें, गर्मी जब तक भंग न हो जाए। आटोक्लेव 15 मिनट के लिए 121 lC पर।
बाँझ पेट्री डिश में परोसें। एक रेफ्रिजरेटर में स्टोर करें।
तैयार माध्यम का रंग एक ढेलेदार उपस्थिति के साथ सफेद होता है।
यदि आप ऊपर वर्णित तैयारी के लिए ग्लूकोज के साथ मकई का आटा तैयार करना चाहते हैं, तो 10 ग्राम ग्लूकोज जोड़ें।
वाणिज्यिक मकई का आटा
निर्जलित माध्यम का 17 ग्राम वजन और आसुत जल के 1 लीटर में भंग। मिश्रण को गर्म किया जा सकता है, पूरी तरह से भंग करने के लिए धीरे से मिलाते हुए। एक आटोक्लेव में 121 atC, 15 एलबी पर 15 मिनट के लिए जीवाणुरहित करें।
बाँझ पेट्री डिश में डालो। जमने दो। उल्टा और उपयोग करने तक रेफ्रिजरेटर में स्टोर करें। उपयोग से पहले तापमान।
25 ºC पर पीएच 6.0 º 0.2 होना चाहिए।
ट्विन 80 के साथ मकई का आटा
आईएसओ 18416 का अनुपालन करने के लिए, कॉर्नमील अगर को निम्नानुसार तैयार किया जाना चाहिए:
65 ग्राम प्रति लीटर का वजन और 10 मिली का 80 मिलीलीटर पानी मिलाएं। घुलने तक कुछ मिनट के लिए उबालें और उबालें, इस बात का ख्याल रखें कि ज्यादा गरम न करें। 15 मिनट के लिए 121 forC पर जीवाणुरहित करें।
ग्लूकोज के साथ मकई का आटा
ट्राइकोफाइटन रूब्रम कालोनियों की क्रोमोजेनिक शक्ति में सुधार करने और उन्हें टी। मेनाग्राफ्रोफाइट्स से अलग करने के लिए, मूल सूत्र में 0.2% ग्लूकोज जोड़ा जा सकता है। आपको टिवेन 80 की आवश्यकता नहीं है, क्योंकि ग्लूकोज क्लैमाइडोस्पोर के निर्माण को रोकता है।
उपयोग
मुख्य रूप से, मकई का आटा अगर का उपयोग कैंडिडा उपभेदों के अध्ययन के लिए किया जाता है, जिससे अल्बिकंस प्रजातियों में क्लैमाइडोस्पोरस की विशेषता अवलोकन के माध्यम से उनकी पहचान में मदद मिलती है। यही है, इस अगर का उपयोग इन खमीर की पहचान की एक सहायक विधि के रूप में कार्य करता है।
इस कृषि पर सैप्रोफाइटिक और रोगजनक दोनों प्रजातियां विकसित हो सकती हैं, लेकिन प्रत्येक रूप में मायसेलियल संरचनाएं होती हैं। उदाहरण के लिए, जीनस टोरुलोप्सिस की प्रजातियां मायसेलियम का उत्पादन नहीं करती हैं और केवल ब्लास्टोकोनिडिया द्वारा प्रजनन करती हैं।
इसी तरह, ट्राइकोस्पोरन और जियोट्रीचम प्रजातियां कॉर्नमील अगर पर आर्थ्रोकोनिडिया पैदा करती हैं और कभी-कभी एक और दूसरे के बीच अंतर करना मुश्किल होता है।
जीनस जियोट्रीचम के आर्थ्रोकोनिडिया एक हॉकी स्टिक के समान हाइपहा के विस्तार का उत्पादन करते हैं।
इसके अलावा ग्लूकोज के साथ पूरक मकई का आटा अगर का उपयोग कर पिगमेंट का उत्पादन ट्राइकोफाइटम रूब्रम की पहचान में उपयोगी है।
बोया
प्राथमिक संस्कृति माध्यम में प्राप्त संदिग्ध कैंडिडा कालोनियों - सबौरड अगार - नैदानिक नमूनों, सौंदर्य प्रसाधन, मिट्टी से, दूसरों के बीच, मकई के आटे पर उपसंस्कृत हैं। मध्यम बोया और 24 से 48 घंटे के लिए 22 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। यदि आवश्यक हो तो ऊष्मायन समय को लंबा किया जा सकता है।
क्लैमाइडोस्पोर प्रदर्शन
इस प्रयोजन के लिए, टोइन 80 के साथ मकई के आटे की दाल को डलमऊ तकनीक का उपयोग करके टीका लगाया जाना चाहिए। इस विधि में प्लैटिनम हैंडल के साथ संदिग्ध कॉलोनी का एक हिस्सा लेना और बीच में तीन समानांतर कटौती करना, संभाल को 45 the तक रखना शामिल है। कटौती को एक दूसरे से 1 सेमी की दूरी से अलग किया जाना चाहिए।
इसके बाद, पहले से ढकी हुई आवरण-वस्तु को उन धारियों पर रखा जाता है जिन्हें बोया गया है, इस तरह से कि आधा ढंका हो और दूसरा खुला हो।
48-72 घंटे के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर अंकुरित प्लेटों सेते हैं और फिर कवर पर्ची के माध्यम से माइक्रोस्कोप के तहत जांच करते हैं।
कवक उपभेदों का रखरखाव
उपभेदों के रखरखाव के लिए, वरीयता प्राप्त और उगाए गए प्लेटों को एक रेफ्रिजरेटर (4 से 8)C) में रखा जाता है। इस तरह वे कई हफ्तों तक रह सकते हैं और शिक्षण या अनुसंधान उद्देश्यों के लिए उपयोग किया जा सकता है।
क्यूए
बाँझपन नियंत्रण के लिए, एक प्लेट को कमरे के तापमान पर टीकाकरण के बिना लगाया जाता है, यह उम्मीद की जाती है कि कोई विकास या रंग परिवर्तन नहीं होगा।
गुणवत्ता नियंत्रण के लिए, ज्ञात उपभेदों को बोया जा सकता है, जैसे: स्टैफिलोकोकस ऑरियस, एटीसीसी 6538, एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, एस्परगिलस नाइजर एटीसीसी 16404, कैंडिडा अल्बाइन्स एटीसीसी 1023, सैच्रोमाइसेस सेरेविसिया एटीसीसी 9763।
अपेक्षित परिणाम एस। ऑरियस और ई। कोलाई के लिए आंशिक निषेध हैं। जबकि बाकी हिस्सों में संतोषजनक वृद्धि की उम्मीद है।
5 दिनों के ऊष्मायन के अनुमानित समय में एस्परगिलस नाइगर काले और छिटपुट कालोनियों के साथ बढ़ता है।
क्लैमाइडा एल्बिकैंस यीस्ट कालोनियों क्लैमाइडोस्पोर उत्पादन के साथ।
Saccharomyces cerevisiae बड़े खमीर कोशिकाओं का उत्पादन करते हैं।
सीमाएं
प्लेट के नीचे एक पीला अवक्षेप बनता है जिसे कॉलोनियों के साथ भ्रमित नहीं होना चाहिए।
संदर्भ
- नियोजन प्रयोगशालाएँ। मकई भोजन आगर। पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
- संस्कृति मीडिया माइक्रोकिट। मकई भोजन आगर। यहाँ उपलब्ध है: Medioscultivo.com।
- लिनारेस एम, सोलिस एफ। खमीर पहचान गाइड। यहाँ उपलब्ध है: http: //www.guia.revibero।
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