ट्राइपटिसिन सोया अगर: औचित्य, तैयारी और उपयोग - जीवविज्ञान - 2025

सोया tryptone अगर या Trypticase सोया अगर एक ठोस संस्कृति मध्यम, और पोषक तत्वों की गैर-चयनित है। यह अंग्रेजी ट्रायप्टिसेज़ सोए अगार में इसके संक्षिप्त रूप के लिए टीएसए द्वारा पत्र द्वारा नामित किया गया है। यह ट्रिप्टीन, सोया पेप्टोन, सोडियम क्लोराइड और अगर-अगर से बना है।

इसकी उच्च पोषण शक्ति के कारण यह मामूली मांग और गैर-मांग वाले सूक्ष्मजीवों की खेती के लिए आदर्श है। प्राथमिक संस्कृतियों के लिए अतिरिक्त पूरक के बिना माध्यम की सिफारिश नहीं की जाती है, लेकिन यह शुद्ध उपभेदों को उपसंस्कृत करने और उन्हें अन्य उपयोगों के बीच व्यवहार्य बनाए रखने के लिए बहुत उपयोगी है।

बैक्लाइट कैप के साथ ट्राईप्टिसैसिन सोया अगर वेजेज में होता है। स्रोत: लेखक एमएससी द्वारा ली गई तस्वीर। मारीलासा गिल।

इसके अलावा, यह अगर रक्त के रूप में समृद्ध मीडिया की तैयारी के लिए एक आधार के रूप में कार्य करता है, विशेष रूप से जब यह हेमोलिसिस पैटर्न का निरीक्षण करने और क्रमशः स्टेप्टोकोकस न्यूमोनिया और स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेनेस के निदान में आवश्यक ऑप्टोक्विन और बैकीट्रैकिन टैक्स को माउंट करने के लिए आवश्यक है।

दूसरी ओर, जब एंटीबायोटिक दवाओं के साथ मिलाया जाता है, तो मिश्रित वनस्पतियों के साथ नमूनों से चिकित्सकीय महत्वपूर्ण मुखर और सख्त अवायवीय सूक्ष्मजीवों को अलग करना उपयोगी होता है।

अंत में, ट्राइप्टिसेज़िन सोया एगर की संरचना और इसके प्रदर्शन को विभिन्न फार्माकोपियास (यूरोपीय, जापानी और उत्तरी अमेरिकी) द्वारा स्थापित आवश्यकताओं को पूरा करते हैं।

आधार

बैक्टीरिया के समुचित विकास के लिए, ऊर्जा की आपूर्ति आवश्यक है, जैसे कि अमीनो एसिड, विटामिन, प्यूरिक और पाइरिमिडियम बेस।

इस अर्थ में, ट्रिप्टिन और सोया पेप्टोन इन पोषक तत्वों को सूक्ष्मजीवों को प्रदान करते हैं, इस प्रकार उनके पूर्ण विकास की अनुमति देते हैं। हालांकि, फास्टिड बैक्टीरिया के लिए इस अगरबड़े को डीफिब्रिनेटेड रक्त या गर्म रक्त के साथ पूरक करना आवश्यक है ताकि इसके संवर्धन में वृद्धि हो सके।

दूसरी ओर, यदि एंटीबायोटिक्स को माध्यम में जोड़ा जाता है, तो यह एक चयनात्मक माध्यम बन जाता है। जीनस लिस्टेरिया की प्रजातियों के अलगाव के पक्ष में 0.6% खमीर निकालने को भी जोड़ा जा सकता है, जबकि सिस्टीन टेलराइट और मेमने के रक्त के अलावा Corynebacterium diphteriae के लिए आदर्श है।

अंत में, सोडियम क्लोराइड माध्यम को आसमाटिक संतुलन प्रदान करता है और अगर ठोस ठोस स्थिरता प्रदान करता है।

तैयारी

ट्राईप्टिसैसिन सोया आगर प्लेट्स

ट्राइप्टिसेडिन सोया एगर तैयार करने के लिए, निर्जलित वाणिज्यिक माध्यम के 40 ग्राम को डिजिटल पैमाने पर तौला जाना चाहिए। यह एक फ्लास्क में निहित आसुत जल के एक लीटर में भंग होता है।

मिश्रण को 5 मिनट के लिए आराम करने के लिए छोड़ दिया जाता है और फिर इसे माध्यम को भंग करने में मदद करने के लिए एक गर्मी स्रोत पर ले जाया जाता है। इसे अक्सर हिलाया जाना चाहिए और 1 से 2 मिनट के लिए उबला हुआ होना चाहिए। इसके बाद, माध्यम को 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव में निष्फल कर दिया जाता है।

50 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा होने दें और बाँझ पेट्री डिश में वितरित करें। रेफ्रिजरेटर में प्लैरिकोस और स्टोर को ठोस बनाने, पलटने, ऑर्डर करने की अनुमति दें।

मध्यम का अंतिम पीएच 7.3 pH 0.2 होना चाहिए।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि निर्जलित संस्कृति माध्यम का रंग हल्का बेज है और इसे सूखी जगह पर 10 से 35 डिग्री सेल्सियस के बीच संग्रहीत किया जाना चाहिए।

इसके भाग के लिए, तैयार अगर रंग में हल्का एम्बर है। तैयार प्लेटों को उपयोग करने तक एक रेफ्रिजरेटर (2-8 डिग्री सेल्सियस) में संग्रहित किया जाना चाहिए।

प्लेटों को उपयोग करने से पहले कमरे के तापमान तक पहुंचना चाहिए।

ट्राईप्टिसीसिन सोया अगर प्लेटें रक्त से पूरक होती हैं

50 डिग्री सेल्सियस तक की कोशिश करने वाले सोया अगर को ठंडा करने के समय 5% डिफिब्रिनेटेड ब्लड डालकर ब्लड एगर तैयार किया जाता है। मिश्रण को कोमल आंदोलनों के साथ घुमाकर समरूप बनाया जाता है।

बाँझ पेट्री डिश में परोसें। बीच का रंग चेरी लाल होना चाहिए।

ट्राइप्टिसेज़िन सोया अगर प्लेट गर्म रक्त के साथ पूरक है

टीएसए-आधारित रक्त एगर तैयार करने के लिए, पहले से वर्णित प्रक्रियाओं के समान ही आगे बढ़ें, लेकिन आटोक्लेव को छोड़ते समय इसे आराम करने के लिए छोड़ दिया जाता है जब तक कि माध्यम का तापमान लगभग 56 से 70 डिग्री सेल्सियस के बीच न हो। उस समय रक्त को रखा जाता है और तब तक मिलाया जाता है जब तक माध्यम भूरा न हो जाए।

बाँझ पेट्री डिश में परोसें। माध्यम का रंग चॉकलेट ब्राउन है।

ट्राइप्टिसैसिन सोया अगर वेगेस

अग्र तैयारी प्रक्रिया वही है जो प्लेटों के लिए वर्णित है, इस अंतर के साथ कि पेट्री डिश पर माध्यम की सेवा के बजाय, यह बाँझपन से पहले बेक्लाइट कवर के साथ ट्यूबों में 10 से 12 मिलीलीटर के बीच वितरित किया जाता है।

इसके बाद, ट्यूबों को 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर autoclaved किया जाता है। जब वे चले जाते हैं, तो वे एक समर्थन की मदद से झुके होते हैं और जमने की अनुमति देते हैं।

तैयार किए गए वेज सतह क्षेत्र द्वारा बोए जाते हैं और एक निश्चित समय के लिए कुछ गैर-मांग वाले सूक्ष्मजीवों को रखने के लिए काम करते हैं।

अनुप्रयोग

ट्राइप्टिसेज़िन सो अगार का उपयोग निम्नलिखित मामलों में किया जाता है:

-अधिकतम प्रयोगशालाओं में नियमित रूप से उपयोग किए जाने वाले क्लासिक रक्त अगर को तैयार करने के लिए एक आधार है।

-जवाब देने वाले बैक्टीरिया का अलगाव।

हेमोलिसिस पैटर्न का संरक्षण।

-निदान परीक्षणों का निष्पादन।

-एक आधार है जो Corynebacterium diphteriae के लिए विशेष रक्त अगर तैयार करने के लिए है, सिस्टीन टेलराइट और मेमने के रक्त के साथ।

-अमरोबों के विकास के लिए मेमने का खून अगर, प्लस केनामाइसिन-वैनकोमाइसिन तैयार करने के लिए एक आधार है, विशेष रूप से बैक्टेरॉइड एसपी।

- गैर-मांग वाले उपभेदों (बैक्टीरियाकोटेका) के रखरखाव के लिए।

- पानी, पर्यावरण, भोजन और कॉस्मेटिक नमूनों की माइक्रोबियल सीमा के अध्ययन में एरोबिक माइक्रोबियल गणना।

बोया

नमूनों को सीधे ट्राइप्टिसेज़िन सोय एगर की सतह पर बोया जा सकता है जिसे रक्त या अन्य योजक के साथ पूरक किया जाता है। इसे थकावट द्वारा बोया जाता है।

जबकि, बिना एडिटिव्स के ट्रायप्टिसेज़िन सोया अगर प्लेटें आमतौर पर माइक्रोबियल उपभेदों (बैक्टीरिया या खमीर) को उपसंस्कृत करने के लिए उपयोग की जाती हैं।

क्यूए

बाँझपन नियंत्रण

ट्राइप्टिसेज़िन सोया बेस अगर के साथ तैयार किए गए अलग-अलग मीडिया की बाँझपन की जांच करने के लिए, निम्नलिखित की सिफारिश की जाती है: प्रत्येक तैयार बैच से, 1 या 2 असिंचित प्लेटों या ट्यूबों को उनकी बाँझपन को प्रदर्शित करने के लिए 24 घंटे के लिए 37 ° C पर इनक्यूबेट किया जाना चाहिए। सभी मामलों में इसे वृद्धि के बिना रहना चाहिए।

यदि संदूषण पाया जाता है, तो पूरे बैच को त्याग दिया जाना चाहिए।

विकास पर नियंत्रण

ट्राइप्टिसेज़िन सोया एगर के उचित कामकाज का अध्ययन करने के लिए निम्नलिखित जीवाणु उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है: एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 8739, स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 6538, स्यूडोमोनास एरुगियोसिस एटीसीसी 9027 और एंटरोकोकस फेसेलिस एटीसीसी 29212।

उपभेदों को बीज और 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एरोबिक रूप से आरोपित किया जाता है।

सभी मामलों में विकास संतोषजनक होना चाहिए।

कैंडिडा अल्बिकंस कॉम्प्लेक्स एटीसीसी 10231 और एस्परगिलस नाइजर एटीसीसी 16404 जैसे कवक का भी उपयोग किया जाता है। दोनों उपभेदों के लिए अच्छी वृद्धि की उम्मीद है।

ग्रोथ कंट्रोल और हेमोलिसिस पैटर्न ट्राइप्टिसेप्सिन सोया अगर रक्त के साथ पूरक है

इस आधार के साथ तैयार किए गए रक्त अगर के समुचित कार्य को सत्यापित करने के लिए, निम्नलिखित उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है: स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स एटीसीसी 19615, स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया एटीसीसी 6305 और स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया एटीसीसी 49619।

उन्हें 24 घंटे के लिए माइक्रोएरोफिलिसिटी में 37 ° C पर बीजित और ऊष्मायन किया जाता है।

सभी मामलों में, विकास संतोषजनक होना चाहिए, यह ध्यान में रखते हुए कि एस-पाइोजेनेस और अल्फा हेमोलिसिस (कॉलोनी के चारों ओर हरे रंग का प्रभामंडल) में बीटा-हेमोलिसिस (कॉलोनी के चारों ओर हरे रंग का प्रभामंडल) देखा जाना चाहिए। एस निमोनिया के दोनों उपभेदों में मनाया जाना चाहिए। कालोनियों)।

संदर्भ

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