बैक्टीरियल कल्चर: प्रकार, विशेषताएँ, विधियाँ, आवश्यकताएँ - जीवविज्ञान - 2025

एक जीवाणु संस्कृति पोषक मीडिया पर इन सूक्ष्मजीवों के बीजारोपण का परिणाम है, ताकि उन्हें पुन: उत्पन्न करने के लिए ठोस मीडिया में जीवाणु कालोनियों की उपस्थिति और तरल मीडिया में बादल छाए रहें।

बुवाई विधि बहुत महत्वपूर्ण है ताकि इनोक्यूलम को इस तरह से वितरित किया जा सके कि इसमें मौजूद बैक्टीरिया छितरे हुए हों और सही ढंग से अलग-थलग पड़ी कालोनियों को विकसित कर सकें।

लेखक ने बायोबेडिकल एंड टेक्नोलॉजिकल साइंसेज बिल्डिंग, कैराबोबो विश्वविद्यालय के जीवाणु विज्ञान प्रयोगशाला में लेखक द्वारा लगाए गए विभिन्न फसलें। स्रोत: लेखक एमएससी द्वारा ली गई तस्वीरों की रचना। मारीलासा गिल।

ठोस संस्कृति माध्यम में प्राप्त उपनिवेश सूक्ष्मजीवों के प्रसार का परिणाम थे जो बीजित थे। प्रत्येक कॉलोनी एक एकल जीवाणु से शुरू होती है, जो मैक्रोस्कोपिक रूप से दृश्यमान आबादी बनाने के लिए तेजी से गुणा कर सकती है।

तरल संस्कृति मीडिया में भी ऐसा ही होता है लेकिन इस मामले में बैक्टीरिया की वृद्धि अशांति से होती है।

बैक्टीरियल वृद्धि संभव है जब चुने हुए संस्कृति का माध्यम किसी विशेष जीवाणु के विकास के लिए आवश्यक पोषण और पीएच शर्तों को पूरा करता है। इसके अलावा, अन्य चर, जैसे तापमान, ऊष्मायन समय, ऑक्सीजन एकाग्रता, सीओ ₂, अन्य को नियंत्रित करना आवश्यक है ।

सभी बैक्टीरिया आबादी को समान आवश्यकताओं की आवश्यकता नहीं होती है, हालांकि कुछ लगभग सभी के लिए सामान्य हो सकते हैं, जैसे कि मध्यम में पेप्टोन होते हैं, यह भी सच है कि अधिक सूक्ष्मजीवों की मांग है जो अतिरिक्त रूप से अन्य विशिष्ट पदार्थों की आवश्यकता होती है, जिन्हें वृद्धि कारक कहा जाता है।

उदाहरण के लिए, यह उल्लेख किया जा सकता है कि कुछ हीमोफिलस को विकसित करने के लिए कारक एक्स (हेमिन) और कारक वी (एनएडी) की उपस्थिति की आवश्यकता होती है।

बैक्टीरिया संस्कृतियों के प्रकार

बैक्टीरियल संस्कृतियाँ बहुपद, शुद्ध या मिश्रित हो सकती हैं।

पॉलीमाइक्रोबियल बैक्टीरियल संस्कृतियाँ

पॉलीमिक्रोबियल कल्चर वे हैं जो एक सामान्य माइक्रोबायोटा वाले स्थान से प्राप्त नमूने की बुवाई से आते हैं, जिसमें एक निश्चित रोगज़नक़ भी पाया जा सकता है।

उदाहरण: जब गले में खराबी की संस्कृति विकसित हो रही है, तो स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स जैसे रोगज़नक़ मिल सकते हैं, लेकिन यह क्षेत्र में एक सामान्य माइक्रोबायोटा के साथ होगा।

इस मामले में, अलगाव में मौजूद विभिन्न प्रकार के बैक्टीरिया के विकास की अनुमति देने के लिए एक अच्छा स्ट्रिप आवश्यक है।

एक स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स तनाव के साथ संगत कॉलोनी में प्लैटिनम लूप के साथ सावधानी से स्पर्श किया जाएगा और फिर एक कुंवारी संस्कृति के माध्यम से लगाया जाएगा और इस तरह उस सूक्ष्मजीव की शुद्ध संस्कृति प्राप्त होगी।

इस शुद्ध संस्कृति से, बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए आवश्यक सभी परीक्षण किए जा सकते हैं।

शुद्ध जीवाणु संस्कृति

सूक्ष्मजीव को कुशलतापूर्वक पहचानने के लिए, एक शुद्ध संस्कृति से काम करना चाहिए।

एक पॉलीमिक्रोबियल कल्चर की अलग-थलग कॉलोनी को हटाकर, या जब एक नमूना जो सामान्य रूप से बाँझ स्थान से आता है, केवल एक रोगज़नक़ मौजूद होता है और एकल का विकास होता है बैक्टीरिया के प्रकार)। उदाहरण: जब एक CSF बैक्टीरियल मैनिंजाइटिस के रोगी से लिया जाता है।

एक अन्य तरीका यह है कि एक पुरानी शुद्ध संस्कृति से नए सिरे से शुद्ध संस्कृति प्राप्त करने के लिए।

मिश्रित जीवाणु संवर्धन

ये संस्कृतियां सूक्ष्मजीवों के मिश्रण से बनी हैं, जैसा कि वे प्रकृति में होती हैं। कुछ औद्योगिक प्रक्रियाओं में मिश्रित संस्कृतियों का उपयोग सुविधाजनक है।

यह कई शुद्ध संस्कृतियों के मिलन से प्राप्त किया जा सकता है, क्योंकि ये जीवाणु अंतर्संबंधों के अध्ययन की अनुमति देते हैं।

वे उपयोगी हैं, उदाहरण के लिए, औद्योगिक अपशिष्ट जल में xenobiotics के क्षरण में, क्योंकि वे बायोडिग्रेडेबल एजेंट के रूप में कार्य करते हैं।

जीवाणु संस्कृतियों के लक्षण

जीवाणु संस्कृतियों में प्राप्त कालोनियों की रूपात्मक विशेषताएं बहुत विविध हो सकती हैं।

कॉलोनियां बहुत छोटी, मध्यम या बड़ी हो सकती हैं और सूखी या श्लेष्म, चमकदार या सुस्त दिखाई दे सकती हैं। बनावट के आधार पर, यह चिकनी और खुरदरे के बीच भिन्न हो सकता है और आकार के आधार पर, वे गोलाकार, सपाट, उत्तल हो सकते हैं।

रंग के आधार पर, वे हो सकते हैं: रंगहीन, सफेद, पीला, गुलाबी, फुचिया, लाल, नारंगी, बेज, भूरा, हरा, भूरा, काला या एक धातु चमक के साथ, इसमें शामिल बैक्टीरिया और संस्कृति के माध्यम पर निर्भर करता है।

कॉलोनियों की सीमाएँ नियमित या अनियमित हो सकती हैं। दूसरी ओर, एक समान फिल्म प्रस्तुत कर सकते हैं जो लगभग पूरे माध्यम में वितरित की जाती है जिसे "स्वीमिंग" कहा जाता है। यह प्रोटीन सपा की विशेषता है।

कुछ बैक्टीरियल कल्चर गंधों का उत्सर्जन करते हैं जो शामिल प्रजातियों की काफी विशेषता हैं। उदाहरण के लिए, स्यूडोमोनस एरुगिनोसा की एक संस्कृति में एक विशेष फल गंध है, जबकि जीनस प्रोटियस में एक विशेषता पुट गंध है।

उनके आकार के अनुसार उपनिवेशों के उदाहरण

बहुत छोटा: माइकोप्लाज्मा न्यूमोनिया, फ्रांसिसैला ट्यूलेंसिस।

छोटा: स्ट्रेप्टोकोकस एसपी, एंटरोकोकस एसपी।

मध्यम: परिवार एंटरोबैक्टीरिया

बड़े: बेसिलस सेरेस, स्यूडोमोनस एरुगिनोसा।

उनकी उपस्थिति के अनुसार उपनिवेशों का उदाहरण

सूखा: लैक्टोबैसिलस भ्रम।

म्यूकोइड्स: क्लेबसिएला निमोनिया, स्यूडोमोनास एरुगिनोसा।

शानदार: क्लेबसिएला निमोनिया।

अपारदर्शी: एंटरोकोकस फेसेलिस, निसेरिया गोनोरिया के कुछ उपभेद।

उनकी बनावट के अनुसार उपनिवेशों के उदाहरण

चिकनी कॉलोनियाँ: माइक्रोकॉकस ल्यूटस

किसी न किसी कालोनियों: पोषक तत्व अगर पर Sarcina वेंट्रिकुली।

उनके आकार के अनुसार उपनिवेशों का उदाहरण

परिपत्र: पोषक तत्व अगर पर लिस्टेरिया मूरैई और माइक्रोकॉकस ल्यूटस।

फ्लैट: पोषक तत्व अगर पर स्टैफिलोकोकस इक्वोरम।

उत्तल: स्टेफिलोकोकस ऑरियस, क्लेबसिएला निमोनिया।

अपनी सीमाओं के अनुसार उपनिवेशों का उदाहरण

गोल किनारा: स्टेफिलोकोकस ऑरियस, एस्चेरिचिया कोलाई।

अनियमित सीमा: क्लेबसिएला निमोनिया, स्यूडोमोनास एरुगिनोसा।

झींगा किनारों: बेसिलस सपा।

उनके रंग के अनुसार उपनिवेशों का उदाहरण

पारदर्शी या रंगहीन: शिगेला एक्सएलडी अगर पर।

सफेद: स्टैफिलोकोकस होमिनर रक्त एगर पर।

बेज: बेसिलस स्फैरिकस और लैक्टोबैसिलस पोषक तत्व एगर पर भ्रम।

पीला: स्टैफिलोकोकस ऑरियस और एलिजाबेथिंगिया मेनिंगोसेप्टिका पर रक्त अगर, पेडियोकोकस एसपी, स्टेफिलोकोकस लेंटस ऑन पोषक तत्व अगर, गुलाबी: एक्सएलडी अगर पर एस्चेरिचिया कोलाई, पोषक तत्व अगर पर माइक्रोकॉकस गुलाब।

फुकिया: मैक कॉनकी अगर पर एस्चेरिचिया कोली।

वायलेट: क्रोमोबैक्टीरियम वायलेसियम।

रेडिश: सेराटिया पोषक तत्व अगर पर कमरे के तापमान पर मारकेंस करता है।

नारंगी: पोषक तत्व अगर पर कुर्थिया zopfii।

ग्रेयिश: मिट्टी के अर्क में स्पोरोसारसीना यूरिया।

ग्रीनिश: BHI agar पर स्यूडोमोनास एरुगिनोसा।

भूरा: पित्त एस्कुलिन अगर पर एंटरोकोकस एसपी।

काला: एसएस अगार पर साल्मोनेला एंटरिटिडिस।

धात्विक चमक के साथ: एस्कोरिचिया कोली एंडो एगर पर।

बैक्टीरियल कल्चर के तरीके

परिणामी एरोबिक या अवायवीय जीवाणु संस्कृति

यह सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली खेती पद्धति है। यह इस तथ्य के कारण है कि, पहले स्थान पर, मनुष्य के लिए अधिकांश बैक्टीरिया रोगजनक एरोबिक या संकाय अवायवीय हैं; और दूसरी बात, यह अवायवीय संस्कृतियों की तुलना में बहुत सस्ता और आसान है। उदाहरण: क्रमशः माइकोप्लाज्मा न्यूमोनिया और एस्चेरिचिया कोलाई।

अवायवीय जीवाणु संस्कृति

इस प्रकार की संस्कृति में पूर्ण ऑक्सीजन दमन की आवश्यकता होती है। एनारोबिक बैक्टीरिया के लिए संस्कृति मीडिया में आम तौर पर कम करने वाले पदार्थ होने चाहिए, जैसे: एस्कॉर्बिक एसिड, थायोग्लाइकोलेट, सिस्टीन या सल्फर हवा में निहित ऑक्सीजन के विषाक्त प्रभाव को खत्म करने के लिए।

कुछ में रेज़ाज़रिन जैसे संकेतक होते हैं जो ऑक्सीजन की उपस्थिति में नीले होते हैं और एनारोबिओसिस में रंगहीन होते हैं। उदाहरण: क्लोस्ट्रीडियम टेटानी।

माइक्रोएरोफिलिया में जीवाणु संस्कृति

कल्चर प्लेटों को एक जलाए हुए मोमबत्ती के साथ एक माइक्रोएरोफिलिक हुड में रखा गया है, ढंका हुआ है। मोमबत्ती ऑक्सीजन का सेवन करती है और बाहर निकल जाती है। इस स्थिति में, कुछ बैक्टीरिया बढ़ते हैं, जैसे कि स्ट्रेप्टोकोकस एसपी।

सामग्री और आवश्यकताओं

सामग्री

बैक्टीरियल कल्चर करने के लिए आवश्यक सामग्री हैं: पेट्री डिश या कल्चर मीडिया या शोरबा, प्लैटिनम लूप, सैंपल, बन्स बर्नर या ओवन।

एक बैक्टीरिया संस्कृति प्रदर्शन करने के लिए आवश्यकताएँ

बैक्टीरिया की संस्कृति को कई तत्वों की आवश्यकता होती है, जिन्हें ध्यान में रखना चाहिए, जैसे कि माध्यम में पोषक तत्व, पीएच, तापमान, ऑक्सीजन एकाग्रता, सीओ 2, आर्द्रता, अन्य।

पोषक तत्व

बैक्टीरियल संस्कृतियों को संस्कृति मीडिया की आवश्यकता होती है जिसमें मैक्रोलेमेंट्स और माइक्रोएलेमेंट्स होते हैं। मैक्रोलेमेंट्स में पेप्टोन, अमीनो एसिड, कार्बन और नाइट्रोजन स्रोतों के रूप में कार्बोहाइड्रेट जैसे कार्बनिक पदार्थों का उल्लेख किया जा सकता है।

सूक्ष्मजीवों में अकार्बनिक पदार्थ या ट्रेस तत्व मैंगनीज, जस्ता, निकल, बोरान, क्लोरीन, सेलेनियम, सिलिकॉन, कोबाल्ट, तांबा, अन्य शामिल हैं।

हाइड्रोजन आयन सांद्रता (pH)

हाइड्रोजन आयनों (H ⁺) और हाइड्रॉक्सिल आयनों (OH ^-) का संकेंद्रण उस माध्यम में होता है, जहां संस्कृति विकसित होगी, महत्वपूर्ण महत्व का है, क्योंकि ये पीएच को निर्धारित करते हैं।

सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला पीएच तटस्थ (पीएच = 7.0) है, हालांकि मीडिया भी हो सकता है जहां एक अम्लीय या क्षारीय पीएच सुविधाजनक है, उदाहरण के लिए यदि आप क्रमशः एक एसिडोफिलिक या क्षारीय बैक्टीरिया को अलग करना चाहते हैं।

तापमान

तापमान एक बहुत ही महत्वपूर्ण कारक है जो बैक्टीरिया संस्कृतियों के विकास को प्रभावित करता है। बैक्टीरिया साइकोफिलिक हो सकते हैं (तापमान में वृद्धि <20 ° C, मेसोफिलिक (20 ° C और 42 ° C के बीच), थर्मोफिलिक (40 ° C से 70 ° C), अतिताप (70 ° C) - 105 ° C)।

ऑक्सीजन की आवश्यकता

एरोबिक: वे ऑक्सीजन की उपस्थिति में बढ़ते हैं।

माइक्रोएरोफिलिक: वे 5-10% सीओ ₂ की उपस्थिति में बढ़ते हैं _।

सख्त अवायवीय: ऑक्सीजन की अनुपस्थिति में बढ़ता है।

परिणामी अवायवीय: ऑक्सीजन की उपस्थिति में या इसके बिना बढ़ता है।

एयरोटोलरेंट: वे ऑक्सीजन के बिना अच्छी तरह से विकसित होते हैं और थोड़ा ऑक्सीजन सहन करते हैं।

संस्कृति मीडिया

संस्कृति मीडिया विशेष पोषण संबंधी तैयारियां हैं जो माइक्रोबियल विकास या संस्कृति को प्राप्त करने के लिए प्रयोगशाला में तैयार की जाती हैं। ये मीडिया निरंतरता, रचना और कार्य में भिन्न होते हैं। प्रत्येक प्रयोगशाला अपनी आवश्यकताओं के अनुरूप संस्कृति के प्रकार को तैयार करेगी।

बैक्टीरियल कल्चर कलेक्शन

ऐसे संस्थान या संगठन हैं जो नैदानिक, पर्यावरणीय या औद्योगिक महत्व के जीवाणु उपभेदों के संग्रह, लक्षण वर्णन, रखरखाव और वितरण के लिए समर्पित हैं।

इन उपभेदों का उपयोग अनुसंधान कार्य और संस्कृति मीडिया पर गुणवत्ता नियंत्रण करने के लिए किया जाता है।

उदाहरण: स्ट्रैन्स अमेरिकन टाइप कल्चर कलेक्शन, वेनेजुएला सेंटर फॉर कलेक्शंस ऑफ माइक्रोनोलॉजिज्म (CVCM) और नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हाइजीन, एपिडेमियोलॉजी और माइक्रोबायोलॉजी ऑफ क्यूबा (INHEM) के स्ट्रेन्स।

संदर्भ

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