- आधार
- परिवहन के साधनों की विशेषताएँ
- तैयारी
- Redox संकेतक के साथ अर्ध-ठोस स्टुअर्ट माध्यम
- घर की तैयारी
- सामग्री
- व्यावसायिक माध्यम से तैयारी
- तरल संशोधित स्टुअर्ट मध्यम (घर का बना)
- अनुप्रयोग
- परिवहन के साधनों में नमूने की पहचान
- क्यूए
- सीमाएं
- संदर्भ
मध्यम स्टुअर्ट पोषक तत्वों के बिना एक semisolid अगर या शोरबा, जैविक नमूनों के परिवहन के लिए प्रयोग किया जाता है। इसका उद्देश्य नमूना में मौजूद उपभेदों को एक निश्चित समय के लिए व्यवहार्य रखना है, लेकिन माइक्रोबियल जनसंख्या में वृद्धि के बिना।
इसे 1948 में मोफेट, यंग और स्टुअर्ट द्वारा बनाया गया था और बाद में टोशच और पटसुला द्वारा संशोधित किया गया था। यह सोडियम ग्लिसरॉफॉस्फेट, सोडियम थायोग्लाइकोलेट, कैल्शियम क्लोराइड और अगर-अगर से बना है। उत्तरार्द्ध अर्ध-ठोस माध्यम में मौजूद है और तरल में अनुपस्थित है। कुछ प्रयोगशालाएं इसमें मेथिलीन नीला जोड़ती हैं।
स्टुअर्ट परिवहन के साथ कल्चरेट। स्रोत: द्वारा: सीडीसी / डॉ। गिल्डा जोन्स, सौजन्य: पब्लिक हेल्थ इमेज लाइब्रेरी
वे आम तौर पर उपयोग किए जाते हैं जब नमूना को तुरंत बोना संभव नहीं होता है। इस मामले में, नमूना परिवहन माध्यम में रखा जाता है, जबकि इसे प्रयोगशाला में स्थानांतरित किया जाता है जो संस्कृति को संसाधित करेगा।
इस तरह, यह गारंटी दी जाती है कि मौजूद सूक्ष्मजीव तब तक जीवित रहते हैं जब तक कि उन्हें संबंधित संस्कृति मीडिया में निष्क्रिय नहीं किया जाता है।
प्रारंभ में, इसका उपयोग मूत्रमार्ग या योनि के नमूनों को परिवहन करने के लिए किया गया था जहां निसेरिया गोनोरिया की उपस्थिति संदिग्ध थी। बाद में, उन्होंने महसूस किया कि इसकी उपयोगिता व्यापक हो सकती है।
स्टुअर्ट माध्यम नेसिली और फास्टिडियस सूक्ष्मजीवों जैसे कि नीसेरिया मेनिंगिटिडिस, हेमोफिलस इन्फ्लुएंजा, स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजनीज, स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया, कोरिनेबैक्टेरियम डिप्थीरिया, बोर्डेटेला टेटुस के संरक्षण में बहुत कुशल निकला। एंटरोबैक्टीरिया जैसे अन्य गैर-कष्टप्रद सूक्ष्मजीवों के अलावा।
स्टुअर्ट माध्यम मूल रूप से नमूने के desiccation को रोकता है, आसमाटिक संतुलन बनाए रखता है और एक आदर्श पीएच में सूक्ष्मजीवों को संरक्षित करता है। दूसरी ओर, रणनीतिक रूप से इस माध्यम में पोषक तत्व नहीं होते हैं, जिससे सूक्ष्मजीवों को गुणा करने से रोका जा सकता है।
बाजार में विशेष नमूना परिवहन उपकरण हैं जिनमें यह या परिवहन के अन्य साधन शामिल हैं, जिन्हें कल्चरट कहा जाता है। इन्हें प्रयोगशाला में भी तैयार किया जा सकता है।
आधार
परिवहन के स्टुअर्ट मोड का उद्देश्य नमूनों को उनकी मूल स्थिति के करीब रखना है जब तक वे संसाधित नहीं होते हैं।
सोडियम ग्लिसरॉस्फेट और कैल्शियम क्लोराइड एक बफर सिस्टम है जो पीएच और ऑस्मोलरिटी को बनाए रखकर काम करता है।
इस बीच, सोडियम थियोग्लाइकोलेट एक कम करने वाले एजेंट के रूप में कार्य करता है और अगर युक्त होने के मामले में, यह माध्यम के ऑक्सीकरण में देरी करने के लिए इसे एक अर्ध-समेकित स्थिरता देता है। अंत में, मेथिलीन नीला एक ऑक्सीकरण संकेतक है, अर्थात यह ऑक्सीजन की उपस्थिति का पता लगाता है।
रेडॉक्स संकेतक वाला अर्ध-ठोस माध्यम नमूनों के परिवहन के लिए आदर्श है जहां एनारोबिक बैक्टीरिया की उपस्थिति पर संदेह है।
परिवहन के साधनों की विशेषताएँ
स्टुअर्ट माध्यम, परिवहन के सभी साधनों की तरह, कुछ विशेषताओं को पूरा करता है, जिनमें शामिल हैं:
-विभाजन के बिना मौजूद व्यवहार्य माइक्रोबियल उपभेदों को बनाए रखता है।
-किसानों में पोषक तत्व नहीं होते; इसके यौगिकों का उद्देश्य नमूना को पर्याप्त पीएच और परासरण स्थिति के तहत हाइड्रेटेड रखना है।
-कुछ नाजुक सूक्ष्मजीवों के ऑटोलिजेट को रोकता है, जैसे न्यूमोकोकस।
-इसका उपयोग अस्थायी है, इसे बहुत लंबा नहीं करना चाहिए।
तैयारी
Redox संकेतक के साथ अर्ध-ठोस स्टुअर्ट माध्यम
घर की तैयारी
सामग्री
सोडियम ग्लिसरॉस्फेट 10 जीआर
सोडियम thioglycollate 1.0 जीआर
कैल्शियम क्लोराइड 0.1 जीआर
मिथाइलीन नीला 0.002 जीआर
अगर-अगर 3 ग्राम
आसुत जल 1 एल
घटकों को मिलाएं और पूरी तरह से भंग होने तक गर्म करें। ट्यूबों या विशेष swabs में डालो। उन्हें आटोक्लेव में पेश किया जाता है और 15 मिनट के लिए 121 forC पर निष्फल कर दिया जाता है। ट्यूबों को एक ऊर्ध्वाधर स्थिति में (एक ब्लॉक के आकार में) ठंडा होने दें। कमरे के तापमान पर रखें।
व्यावसायिक माध्यम से तैयारी
1 लीटर आसुत जल में माध्यम का 14.1 ग्राम वजन। पूरी तरह से भंग होने तक अक्सर गर्मी मिलाते हुए, इसे उबला जा सकता है। पहले से वर्णित प्रक्रिया के बाकी।
निर्जलित माध्यम क्रीम रंग का होता है और इसकी सतह पर नीला रंग होना चाहिए। यह मिथाइलीन नीले रंग की उपस्थिति के कारण है।
माध्यम का पीएच 7.4 of 0.2 तक समायोजित किया जाना चाहिए
तरल संशोधित स्टुअर्ट मध्यम (घर का बना)
सामग्री
सोडियम ग्लिसरॉस्फेट 10 जीआर
सोडियम thioglycollate 1 जीआर
कैल्शियम क्लोराइड डाइहाइड्रेट 0.1 जीआर
आसुत जल 1000 मि.ली.
इसमें अर्ध-ठोस के समान सामग्री होती है, लेकिन इसमें अगर, या मेथिलीन नीला नहीं होता है। इस मामले में, घटकों को बिना गर्म किए मिलाया जाता है और 0.5 मिलीलीटर स्क्रू कैप्स के साथ 16 x 125 मिमी ट्यूबों में वितरित किया जाता है।
यह आटोक्लेव में 10 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर निष्फल है। नमूने के लिए, डैक्रान स्वैब का उपयोग किया जाना चाहिए यदि नमूना पीसीआर या रेयान के लिए है यदि यह संस्कृति के लिए है।
ट्यूबों को कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जाता है।
अनुप्रयोग
व्यावसायिक रूप से विशेष नमूना परिवहन उपकरण हैं जिन्हें कल्चरटेट कहा जाता है; यह डिवाइस एक लम्बी, पतली ट्यूब है जिसके अंदर एक स्वाब होता है और अंत में एक सेगमेंट होता है जिसमें अर्ध-ठोस या तरल स्टुअर्ट माध्यम होता है।
डिवाइस को खोला जाता है और नमूने को स्वाब के साथ लिया जाता है। इसे तब ट्यूब में वापस लाया जाता है जब तक कि स्वाब की नोक अर्ध-ठोस परिवहन माध्यम में नहीं डाली जाती है; कुछ तरल स्टुअर्ट माध्यम के साथ गर्भवती पॉलीयूरीथेन स्पंज लाते हैं, जिसके साथ गीला होने पर नमूना संरक्षित किया जाता है।
इस मामले में कि नाजुक सूक्ष्मजीवों की उपस्थिति संदिग्ध है, नमूना एकत्र करने के लिए लकड़ी का कोयला के साथ कपास झाड़ू का उपयोग किया जाना चाहिए।
नमूने जिन्हें स्वैब या स्वैब के साथ लिया जा सकता है और इस माध्यम में स्थानांतरित किया जाता है, वे हैं ग्रसनी एक्सयूडेट्स, रेक्टल स्वैब और विभिन्न स्राव, जिनमें शामिल हैं: योनि, मूत्रमार्ग, घाव, ऑक्युलर, कान, और फोड़ा।
परिवहन माध्यम में प्रयोगशाला में नमूना के हस्तांतरण के दौरान, मध्यम से चरम पर्यावरणीय परिस्थितियों के अधीन (बहुत ठंडा या बहुत गर्म) से बचा जाना चाहिए। वायुमंडलीय दबाव में अचानक बदलाव से भी बचना चाहिए।
जिस समय का माध्यम सूक्ष्मजीव को व्यवहार्य रखने में सक्षम है, वह प्रश्न में तनाव पर निर्भर करेगा। उदाहरण के लिए, जीनस निसेरियास और हेमोफिलस के सूक्ष्मजीवों के लिए वे 24 घंटे तक व्यवहार्य रह सकते हैं, लेकिन साल्मोनेला या शिगेला जैसे उपभेद पिछले दिनों और यहां तक कि सप्ताह तक भी रह सकते हैं।
यदि यह अनुमान लगाया जाता है कि नमूने के प्रसंस्करण में 4 दिन से अधिक का समय लग सकता है, तो नमूने को -70 डिग्री सेल्सियस पर फ्रीज करना बेहतर होगा।
परिवहन के साधनों में नमूने की पहचान
परिवहन के लिए तैयार साधनों या वाणिज्यिक संस्कृति के पास एक लेबल होना चाहिए जहां निम्नलिखित जानकारी रखी जाएगी:
रोगी का पहला और अंतिम नाम: नमूना भ्रम से बचा जाता है।
पहचान संख्या: काम पर एक आदेश रखना सुविधाजनक है।
नमूना संग्रह स्रोत: जीवाणुविज्ञानी को उचित संस्कृति मीडिया चुनने में मदद करता है।
उपस्थित चिकित्सक: कभी-कभी यह संभव परामर्शों के लिए आवश्यक है।
नमूना संग्रह की तिथि और समय: नमूना के संग्रह और प्रयोगशाला में रिसेप्शन के बीच के समय के अनुसार नमूना की स्वीकृति या अस्वीकृति के लिए यह आवश्यक है।
अन्य जानकारी जो संलग्न करना बहुत उपयोगी होगी:
प्रकल्पित निदान: संदिग्ध निदान के अनुसार विशेष संस्कृति मीडिया को जोड़ने का मार्गदर्शन करता है।
एंटीबायोटिक उपचार: यह एंटीबायोटिक में एनेक्स किया जाना उपयोगी है।
यह सभी जानकारी उचित नमूना प्रसंस्करण सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है।
क्यूए
स्टुअर्ट माध्यम के प्रदर्शन का मूल्यांकन करने के लिए, ज्ञात उपभेदों को निष्क्रिय किया जा सकता है और 25 डिग्री सेल्सियस पर रखा जा सकता है, जैसे: बोर्डेटेला पर्टुसिस एटीसीसी 9340, हीमोफिलस इन्फ्लुएंजा एटीसीसी 19418, नीसेरिया गोनोरिया एटीसीसी 19424, नीसेरिया मेनिंगिटिडिस एटीसीसी 13090 सीटीसी 9090।
सभी मामलों में यह सवाल में सूक्ष्मजीव ठीक होने की उम्मीद है, 24 घंटे के लिए संरक्षित।
दूसरी ओर, अन्य उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है जैसे: शिगेला फ्लेक्सनेरी एटीसीसी 12022, स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 6538, स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स एटीसीसी 12344, एंटरोकोकस फेसेलिस एटीसीसी 33186, स्यूडोमोनस एरुगिनोसा एटीसीसी 27853 और एस्चेरिस।
सभी मामलों में, 96 घंटे तक प्रचुर मात्रा में वसूली की उम्मीद है।
सीमाएं
कुछ अध्ययन यह आश्वासन देते हैं कि स्टुअर्ट माध्यम में मौजूद ग्लिसरॉस्फेट को कुछ कोलीफॉर्म द्वारा अन्य ग्राम नकारात्मक जीवाणुओं के बीच चयापचय किया जा सकता है, और इसलिए इस माध्यम में गुणा करें।
यह जोखिम बढ़ता है कि नमूना प्रसंस्करण में देरी हो रही है। इसी तरह, परिवहन के दौरान स्टुअर्ट माध्यम से उच्च तापमान के संपर्क में आने से यह प्रभावित होता है।
संदर्भ
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