सोया शोरबा tryptone एक तरल संस्कृति मध्यम, बेहद पौष्टिक, गैर-चयनित है। इसकी महान बहुमुखी प्रतिभा के कारण, यह माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में सबसे व्यापक रूप से प्रयुक्त तरल संस्कृति मीडिया में से एक है।
इसे ट्राईप्टिक सोय ब्रोथ या डाइजेस्ट कैसिइन-सोय के नाम से भी जाना जाता है, जिसका संक्षिप्त नाम अंग्रेजी में ट्राईप्टिक सोय ब्रोथ या सीएसटी के अपने स्पेनिश में संक्षिप्त रूप के लिए टीएसबी है। इसकी संरचना के कारण इसके उपयोग बहुत विविध हैं। यह ट्रिप्टिन, सोया पेप्टोन, सोडियम क्लोराइड, डिपोटेशियम फॉस्फेट और ग्लूकोज से बना है।
ट्राइप्टिसैसिन सोया शोरबा को स्यूडोमोनास एरुगिनोसा एटीसीसी 27853 के एक तनाव के साथ उगाया जाता है जहां वर्णक उत्पादन मनाया जाता है। स्रोत: लेखक एमएससी द्वारा लिया गया फोटो। मारीलासा गिल।
यह चिकित्सकीय रूप से महत्वपूर्ण रोगजनक बैक्टीरिया को पुन: पेश करने में सक्षम है, जिसमें पोषण की मांग और एनारोबिक बैक्टीरिया शामिल हैं। कुछ अवसरवादी और दूषित कवक भी इस वातावरण में विकसित हो सकते हैं।
इसकी उच्च पोषण शक्ति के कारण, इसमें माइक्रोबियल संदूषण का पता लगाने के लिए उच्च संवेदनशीलता है, इस कारण से इसे टीके के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण के लिए यूएसडीए पशु और पादप स्वास्थ्य निरीक्षण सेवा द्वारा चुना गया था।
इसी तरह, औद्योगिक रूप से सौंदर्य प्रसाधन और भोजन जैसे उत्पादों के सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन के लिए ट्रायप्टिसेज़िन सोया शोरबा विभिन्न फार्माकोपियोसिस (यूरोपीय ईपी, जापानी जेपी और उत्तर अमेरिकी यूएसपी) की आवश्यकताओं को पूरा करता है।
दूसरी ओर, यह ध्यान देने योग्य है कि इसकी महान उपयोगिता के बावजूद, यह माध्यम अपेक्षाकृत सस्ता है, जिससे यह अधिकांश माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशालाओं के लिए सस्ती है। इसे तैयार करना भी बहुत आसान है।
आधार
ट्रिप्टिन, पेप्टोन और ग्लूकोज इसे तेजी से माइक्रोबियल वृद्धि के लिए एक आदर्श माध्यम बनाने के लिए आवश्यक पोषण गुण प्रदान करते हैं।
ऊष्मायन के लगभग 6 से 8 घंटों में, विकास पहले से ही अधिकांश सूक्ष्मजीवों में देखा जा सकता है। हालांकि, धीमी गति से बढ़ने वाले उपभेद हैं जो बढ़ने में दिन ले सकते हैं।
सोडियम क्लोराइड और डिपोटेशियम फॉस्फेट क्रमशः ऑस्मोटिक संतुलन और पीएच नियामक के रूप में कार्य करते हैं। वृद्धि की उपस्थिति माध्यम में मैलापन की उपस्थिति से प्रकट होती है; अगर कोई विकास नहीं होता है तो माध्यम पारभासी रहता है।
अपने हल्के रंग के कारण, पिगमेंट के उत्पादन का निरीक्षण करना संभव है, जैसे कि लेख की शुरुआत में छवि में दिखाया गया है, जो स्यूडोमोनस एरुगिनोसा द्वारा उत्पादित वर्णक से मेल खाती है।
तैयारी
-त्रिपासीन सोया शोरबा
ट्रायप्टिक सोया शोरबा तैयार करने के लिए, निर्जलित वाणिज्यिक माध्यम के 30 ग्राम को डिजिटल पैमाने पर तौलना चाहिए। फिर इसे एक फ्लास्क में निहित आसुत जल के एक लीटर में भंग कर दिया जाता है।
मिश्रण को 5 मिनट के लिए आराम करने के लिए छोड़ दिया जाता है और फिर इसे माध्यम को भंग करने में मदद करने के लिए एक गर्मी स्रोत पर ले जाया जाता है। इसे 1 मिनट तक उबालते समय बार-बार हिलाया जाना चाहिए।
एक बार भंग होने पर, इसे आवश्यकतानुसार उचित आकार के ट्यूबों में वितरित किया जाता है। कपास के प्लग के साथ या बैक्लाइट कैप के साथ ट्यूब का उपयोग किया जा सकता है। इसके बाद, 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव में मध्यम के साथ ट्यूब निष्फल होते हैं।
माध्यम का पीएच 7.3 of 0.2 पर रहना चाहिए
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि निर्जलित संस्कृति माध्यम का रंग हल्का बेज है और इसे सूखी जगह पर 10 से 35 डिग्री सेल्सियस के बीच संग्रहीत किया जाना चाहिए। जबकि तैयार शोरबा रंग में हल्का एम्बर है और इसे एक रेफ्रिजरेटर (2 से 8 डिग्री सेल्सियस) में संग्रहित किया जाना चाहिए।
-ट्रायप्टिसिन सोया शोरबा के वेरिएंट
ई। कोलाई के अलगाव के लिए इसे चयनात्मक बनाने के लिए पित्त लवण और नोवोबीसिन को मिलाकर संशोधित ट्राइप्टिसेज़िन सोया शोरबा तैयार किया जा सकता है। इसी उद्देश्य के लिए एक और विकल्प है वैनकोमाइसिन, सेफिक्साइम और टेल्यूराइट (2.5 माइक्रोग्राम प्रति मिली) के साथ पूरक ट्राइप्टिसेज़ सोया शोरबा तैयार करना।
दूसरी ओर, अधिक ग्लूकोज (0.25%) ट्रायप्टिक सोया शोरबा में जोड़ा जा सकता है, जब उद्देश्य बायोफिल्म के गठन को प्रोत्साहित करना है।
उपयोग
रक्त या सीरम के साथ पूरक करने की आवश्यकता के बिना, स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया, स्ट्रेप्टोकोकस एसपी और ब्रुसेला एसपी जैसे फास्टिड या फास्टिड बैक्टीरिया के विकास की अनुमति देने के लिए यह पर्याप्त पोषक है।
इसी तरह, इस शोरबा में कुछ कवक विकसित हो सकते हैं, जैसे कि कैंडिडा अल्बिकंस कॉम्प्लेक्स, एस्परगिलस एसपी और हिस्टोप्लाज्मा कैप्सुलटम।
इसके अलावा, एनारोबिक परिस्थितियों में यह माध्यम जीनस क्लोस्ट्रीडियम से संबंधित बैक्टीरिया को ठीक करने के लिए आदर्श है, साथ ही नैदानिक महत्व के गैर-स्पिरिटेड एनारोबिक बैक्टीरिया भी हैं।
यदि 6.5% सोडियम क्लोराइड जोड़ा जाता है, तो इसका उपयोग एंटरोकोकस और अन्य ग्रुप डी स्ट्रेप्टोकोकस के विकास के लिए किया जा सकता है।
अनुसंधान स्तर पर, यह विभिन्न प्रोटोकॉल में बहुत उपयोगी रहा है, विशेष रूप से बायोफिल्म या बायोफिल्म बनाने वाले बैक्टीरिया के अध्ययन में। यह किर्बी और बाउर विधि द्वारा एंटीबायोग्राम करने के लिए आवश्यक 0.5% मैक फरलैंड जीवाणु निलंबन को तैयार करने के लिए भी उपयोग किया जाता है।
इस मामले में, इसी तरह की उपस्थिति के 3 से 5 कालोनियों को लिया जाता है और 4-5 मिलीलीटर ट्राईसिप्टेसिन सोया शोरबा में उत्सर्जित किया जाता है। इसके बाद 35-37 डिग्री सेल्सियस पर 2 से 6 घंटे के लिए ऊष्मायन किया जाता है और बाद में बाँझ खारा का उपयोग करके वांछित एकाग्रता के लिए समायोजित किया जाता है। 18 से 24 घंटे के ऊष्मायन से ट्राइप्टिसेज़िन सोया शोरबा का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए।
बोया
नमूना सीधे लिया जा सकता है या चयनात्मक मीडिया से ली गई शुद्ध कालोनियों को उपसंस्कृत किया जा सकता है। इनोक्यूलम छोटा होना चाहिए ताकि ऊष्मायन से पहले मध्यम बादल न हो।
आम तौर पर यह 24 घंटे के लिए एरोबायोसिस में 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है, लेकिन ये स्थितियां सूक्ष्मजीव के आधार पर भिन्न हो सकती हैं। यदि आवश्यक हो तो यह कई दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर अवायवीय परिस्थितियों में भी ऊष्मायन किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, तेजी से बढ़ते या तेजी से सूक्ष्मजीवों को 7 दिनों तक ऊष्मायन किया जा सकता है।
दवा पदार्थों के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में - जैसे टीके - प्रोटोकॉल कठोर हैं। इन मामलों में, वृद्धि के बिना शोरबा को तब तक खारिज नहीं किया जाता है जब तक कि यह 14 दिनों तक लगातार ऊष्मायन तक नहीं पहुंचता है।
क्यूए
तैयार किए गए प्रत्येक बैच से, उनकी बाँझपन को प्रदर्शित करने के लिए 1 या 2 असंबद्ध ट्यूबों को ऊष्मायन किया जाना चाहिए। यह अपरिवर्तित रहना चाहिए।
उनके व्यवहार का आकलन करने के लिए ज्ञात उपभेदों को भी लगाया जा सकता है। इस्तेमाल किया जा सकता है कि उपभेदों में से हैं:
एस्परगिलस ब्रासीलेंसिस एटीसीसी 1604, कैंडिडा एल्बिकैंस एटीसीसी 10231, बैसिलस सबटिलिस एटीसीसी 6633, स्टेफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 6538 या 25923, एस्किचिया कोलाई एटीसीसी 8739, स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेनस एटीसीसी 196.5, स्ट्रेप्टोकोकस 125, स्ट्रेप्टोकोकस 15।
सभी मामलों में, विकास प्रत्येक सूक्ष्मजीव के लिए उपयुक्त वातावरण और तापमान की स्थिति के तहत संतोषजनक होना चाहिए।
सीमाएं
-ग्लूकोज का किण्वन एसिड के उत्पादन के कारण माध्यम के पीएच में कमी का कारण बनता है। यह कुछ एसिड-संवेदनशील सूक्ष्मजीवों के अस्तित्व के लिए प्रतिकूल हो सकता है।
-यह उपभेदों के रखरखाव के लिए अनुशंसित नहीं है, क्योंकि अम्लता के अलावा, बैक्टीरिया विषाक्त पदार्थों के परिणामस्वरूप संचय के साथ कुछ दिनों के बाद पोषक तत्वों को नष्ट कर देता है जो पर्यावरण को अमानवीय बनाते हैं।
-आप सभी स्टेरिलिटी प्रोटोकॉल का ध्यान रखते हुए काम करें, क्योंकि शोरबा आसानी से दूषित हो जाते हैं।
-ट्रायप्टिसिन सोया शोरबा तैयार करने के बाद, आपको शोरबा को एक और बाँझ ट्यूब में स्थानांतरित करने की कोशिश नहीं करनी चाहिए, क्योंकि इस प्रकार का पैंतरेबाज़ी संदूषण के लिए बहुत कमजोर है।
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