रोज बंगाल एक प्रयोगशाला परीक्षण है जो ब्रुसेलोसिस के निदान के लिए एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया पर आधारित है। तकनीक मानव सीरम नमूनों में ब्रुसेला एबोर्टस जीवाणु के खिलाफ विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने की अनुमति देती है। परिणाम गुणात्मक या अर्ध-मात्रात्मक रूप से सूचित किया जा सकता है।
गुणात्मक रूप व्यक्त करता है कि क्या रोगी परीक्षण के लिए सकारात्मक या नकारात्मक है, अर्थात, एंटीबॉडी हैं या नहीं। इस बीच, अर्ध-मात्रात्मक रिपोर्ट IU / ml में बताई गई है और मौजूद एंटीबॉडी की अनुमानित मात्रा को इंगित करती है। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि एंटीबॉडी का उत्पादन केवल तभी किया जाएगा जब रोगी सूक्ष्मजीव के संपर्क में रहा हो।
एक एग्लूटिनेशन प्लेट में गुलाब बंगाल प्रतिक्रिया। स्रोत: वीडियो से लिया गया
इसकी महान सादगी, उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता के कारण, यह इस बीमारी के निदान के लिए प्रारंभिक परीक्षण के रूप में चिकित्सा में उपयोग की जाने वाली सेरोग्लूटिनेशन तकनीकों में से एक है।
कुछ शोधकर्ताओं ने अन्य तकनीकों के साथ रोज बंगाल परीक्षण की प्रभावकारिता की तुलना की है, जैसे कि सर्गोग्लूटिनेशन (ज्वरनाशक एंटीजन) और देखा है कि हालांकि अच्छा सहसंबंध है, उन्होंने अलग-थलग मामलों को देखा जिसमें ज्वरनाशक प्रतिजन परीक्षण नकारात्मक और रोज डे था। सकारात्मक चमक।
प्राप्त अंतर इस तथ्य के कारण था कि इन रोगियों में अम्लीय पीएच में बेहतर बाध्यकारी क्षमता के साथ ब्रुसेला एबोर्टस के खिलाफ आईजीजी एंटीबॉडी का एक उपवर्ग था, इसलिए वे रोज़ बंगाल अभिकर्मक के साथ प्रतिक्रिया कर सकते थे, लेकिन फिब्राइल एंटीजन के साथ नहीं।
इस अर्थ में, उन्होंने सुझाव दिया है कि फिब्राइल एंटीजन तकनीक के अभिकर्मकों को एक अम्लीय पीएच में संशोधित किया जाना चाहिए ताकि वे इस प्रकार के मामले का पता लगा सकें।
आधार
रोज बंगाल रीजेंट में एक एंटीजेनिक सस्पेंशन होता है। इसमें ब्रुसेला एबॉर्टस का S99 स्ट्रेन होता है, जो एक अम्लीय लैक्टेट बफर (पीएच 3.6), प्लस फिनोल और रोज बंगाल डाई में पतला होता है।
इसलिए, नमूने में जो मांगा गया है, वह ब्रूसेला विरोधी है, अगर ये मौजूद हैं तो वे अभिकर्मक प्रतिजन के साथ प्रतिक्रिया करेंगे और एक मैक्रोस्कोपिक रूप से दिखाई देने वाली एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया देखी जाएगी। परीक्षण या तो आईजीएम एंटीबॉडी या आईजीजी एंटीबॉडी का पता लगाता है।
इसका मतलब यह है कि यह बीमारी को अपने तीव्र चरण में पहचान सकता है जहां IgM एंटीबॉडी प्रबल होते हैं या अपने पुराने चरण में जहां IgG एंटीबॉडी प्रबल होते हैं।
यह एक लाभ का प्रतिनिधित्व करता है क्योंकि यह परीक्षण की संवेदनशीलता को बढ़ाता है, लेकिन साथ ही यह एक नुकसान है क्योंकि यह एक चरण और दूसरे के बीच भेदभाव नहीं करता है, क्योंकि आईजीएम और आईजीजी एंटीबॉडी के साथ प्रतिक्रिया समान हैं।
परीक्षण को हमेशा नकारात्मक नियंत्रण और सकारात्मक नियंत्रण के साथ किया जाना चाहिए। नकारात्मक नियंत्रण में एंटीबॉडी के बिना पशु सीरम होता है और सकारात्मक नियंत्रण में जानवर की उत्पत्ति के सीरम में 50 आईयू / एमएल एंटी-ब्रुसेला एंटीबॉडी होता है।
उपयोग
ब्रुसेलोसिस एक गंभीर बीमारी है जो पुरानी और खतरनाक होती है, इसलिए यह बहुत महत्वपूर्ण है कि इसका शीघ्र निदान किया जाए। यह एक ज़ूनोसिस है और मानव दूषित सामग्री के सीधे संपर्क से संक्रमित हो सकता है, सबसे कमजोर लोग पशु चिकित्सक और पशु देखभालकर्ता हैं।
संक्रमण के अन्य रूपों के बीच संक्रमित कच्चे मीट खाने से भी संक्रमण हो सकता है।
यह बीमारी स्थानीय या व्यवस्थित रूप से हमला करती है। प्रणालीगत रूप सबसे गंभीर है, क्योंकि विभिन्न अंगों को प्रभावित किया जा सकता है, जिसमें रेटिकुलम एंडोथेलियल सिस्टम (यकृत, प्लीहा, अस्थि मज्जा), त्वचा (सेल्युलाइटिस और लिम्फाडेनोपैथी), श्वसन प्रणाली (निमोनिया, मस्कुलोस्केलेटल सिस्टम) (गठिया) शामिल हैं। sacroiliitis और स्पॉन्डिलाइटिस), दूसरों में।
रोज बंगाल टेस्ट एक प्रारंभिक जांच करने के लिए एक बहुत ही उपयोगी तकनीक है, क्योंकि यह बहुत सस्ती है, उपयोग करने में आसान है, और इसमें बहुत विशिष्टता और संवेदनशीलता है।
झूठे नकारात्मक और गलत सकारात्मक के मामले बहुत कम हैं, और क्रमशः बहुत कम एंटीबॉडी वाले लोगों (<25 IU / ml) या अत्यंत उच्च (> 1000 IU / ml) वाले लोगों में हो सकते हैं।
प्रक्रिया
सामग्री
-रोज बंगाल किट
-अगलेपन की प्लेट सफेद पृष्ठभूमि
-50 μl पिपेट
-रिएटर (वैकल्पिक)
-Vortex
तकनीक (गुणात्मक विधि)
कमर्शियल रोज़ बंगाल किट रेडी-टू-यूज़ रिएगेंट्स के साथ आते हैं।
काम शुरू करने से पहले अभिकर्मकों को नियंत्रित करें।
-गर्भावस्था प्लेटों में हलकों को खींचा जाता है, प्रत्येक एक अलग नमूने के लिए। 3 सर्कल का उपयोग करें, पहला नकारात्मक नियंत्रण के लिए, दूसरा नमूना के लिए और तीसरा सकारात्मक नियंत्रण के लिए।
नियंत्रण की एक बूंद या 50 μL और उनके संबंधित सर्कल में नमूना।
-मिक्स द रोज बंगाल रीजेंट एक भंवर का उपयोग कर। पहले से रखे गए लोगों के बगल में एक बूंद रखें।
लकड़ी के टूथपिक्स के साथ-मिक्स (प्रत्येक नमूने या नियंत्रण के लिए एक का उपयोग करें)। परिपत्र गति बनाएं और फैलाएं ताकि आप पूरे सर्कल को कवर करें।
स्रोत: वीडियो से ली गई छवियां: https://youtu.be/igAVQ-GiyGY संपादित छवि लेआउट।
80 से 100 RPM पर स्वचालित रोटेटर पर प्लेट को घुमाएं या 4 मिनट के लिए मैन्युअल रूप से घुमाएं। इस समय के अंत में प्रमाण पढ़ें।
-उपयोग करें कि नियंत्रण के रूप में उम्मीद थी। नियंत्रण के साथ परीक्षण के नमूने की प्रतिक्रिया की तुलना करें। अगर एग्लूटीनेशन मनाया जाता है और एग्लूटीनेशन न होने पर नकारात्मक के रूप में रिपोर्ट करें।
एक सकारात्मक परीक्षण से संकेत मिलता है कि रोगी के पास ब्रूकेला एंटीबॉडी के 25 IU / ml के बराबर या उससे अधिक मात्रा है।
एक सकारात्मक (एग्लूटिनेशन के साथ) और नकारात्मक (एग्लूटिनेशन के बिना) प्रतिक्रिया की व्याख्या। स्रोत: Citrulline संपादित छवि।
तकनीक (अर्द्ध मात्रात्मक)
यदि गुणात्मक प्रतिक्रिया में नमूना दृढ़ता से सकारात्मक है, तो यह अर्ध-मात्रा में हो सकता है। इसके लिए, नमूना के सीरियल डबल dilutions शारीरिक खारा समाधान के साथ बना रहे हैं। पहले वर्णित प्रक्रिया प्रत्येक कमजोर पड़ने के साथ की जाती है।
इसकी व्याख्या स्थूल रूप से स्थूल रूप से देखने पर भी होती है। परिणाम उच्चतम कमजोर पड़ने का अनुमापांक होगा जिसमें एक सकारात्मक परिणाम देखा गया था।
ब्रूसेला विरोधी एंटीबॉडी के अनुमानित मूल्य की गणना करने के लिए, निम्न सूत्र का उपयोग किया जाता है:
25 आईयू / एमएल एक्स रिएक्शन टिटर = आईयू / एमएल
उदाहरण, यदि अर्ध-मात्रात्मक परीक्षण में एक मरीज ¼, in और 1/8 कमजोर पड़ने पर सकारात्मक परीक्षण करता है और 1/16 कमजोर पड़ने के बाद से नकारात्मक होने लगता है, तो इसका मतलब है कि रोगी को 8 का टिटर है ।
सूत्र लागू करना:
25 आईयू / एमएल एक्स 8 = 200 आईयू / एमएल
क्यूए
-किट्स की समाप्ति तिथि है और इसका सम्मान किया जाना चाहिए। यदि अभिकर्मक की समय सीमा समाप्त हो गई है तो इसका उपयोग नहीं किया जाना चाहिए।
-उपयोग करते हुए, सुनिश्चित करें कि अभिकर्मक में ठोस कण नहीं होते हैं, क्योंकि यह गिरावट का संकेत है।
-के बीच 2 और 8 डिग्री सेल्सियस
- फ्रीज नहीं करने पर, यह अधिनियम अभिकर्मक को अपूर्ण रूप से नुकसान पहुंचाता है।
नकारात्मक और सकारात्मक नियंत्रण के साथ-साथ परीक्षण एक साथ करते हैं।
-इस तकनीक से सीरम के नमूनों को एक निश्चित डिग्री के लाइपेसिस और हेमोलिसिस के साथ सहन किया जाता है, हालांकि यह अत्यधिक लिपेमिक और हेमोलाइज़्ड सेरा का उपयोग करने की अनुशंसा नहीं की जाती है, दोनों स्थितियों में परीक्षण के परिणाम बदल जाते हैं।
-विश्लेषण शुरू करने से पहले, अभिकर्मकों को कमरे के तापमान पर लाते हैं।
-ऐसी प्रतिक्रियाओं की व्याख्या न करें जो अनुशंसित समय से अधिक समय लेती हैं, क्योंकि यह झूठी सकारात्मकता की रिपोर्ट उत्पन्न करता है, क्योंकि एक निश्चित समय के बाद अभिकर्मक एक सकारात्मक प्रतिक्रिया का अनुकरण करता है।
तकनीक 100% संवेदनशील है और 98% की विशिष्टता है।
-एक 1000 IU / ml के अर्ध-परिमाणीकरण के बाद एक prozone प्रभाव (एंटीजन की मात्रा की तुलना में अधिक एंटीबॉडी के कारण झूठा नकारात्मक) देखने की संभावना है।
संदर्भ
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