चॉकलेट अगर: आधार, उपयोग और तैयारी - जीवविज्ञान - 2025

चॉकलेट अगर एक ठोस संस्कृति मध्यम, समृद्ध, गैर है - चयनात्मक और गैर - अंतर। इसका उपयोग मुख्य रूप से सूक्ष्मजीवों के अलगाव के लिए पोषण के दृष्टिकोण से किया जाता है, हालांकि इसमें किसी भी प्रकार के बैक्टीरिया विकसित हो सकते हैं।

इस कारण से, इसकी उपयोगिता विशेष रूप से नमूनों के बीजारोपण में बढ़ जाती है जो सामान्य रूप से बाँझ होते हैं, जैसे सीएसएफ और संयुक्त तरल पदार्थ। यद्यपि यह पॉलीमिक्रोबियल नमूनों को बोने के लिए चुने गए साधनों के भीतर भी शामिल है, लेकिन इन मामलों में एंटीबायोटिक दवाओं को जोड़ना आवश्यक है जो सहवर्ती वनस्पतियों को रोकते हैं।

बैक्टीरियल वृद्धि के साथ चॉकलेट अगर

इस माध्यम में चॉकलेट के समान एक विशेषता भूरा रंग है, इसलिए इसका नाम। तैयारी रक्त एगार के समान है, केवल इस मामले में लाल रक्त कोशिकाओं को तोड़ने के लिए रक्त को गर्म किया जाना चाहिए।

इसकी तैयारी, रक्त अगर की तरह, बहुत नाजुक होती है, क्योंकि यह आसानी से दूषित होती है। इस कारण से, कई प्रयोगशालाएं वाणिज्यिक कंपनियों द्वारा तैयार किए गए इस माध्यम का अधिग्रहण करना पसंद करती हैं जो इसकी गुणवत्ता की गारंटी देते हैं।

आधार

इस माध्यम में पोषक तत्वों से भरपूर अगर आधार और गर्म रक्त होता है। लाल रक्त कोशिकाओं के हेमोलिसिस कुछ सूक्ष्मजीवों, जैसे कि जीनस हीमोफिलस के विकास के लिए आवश्यक कारक एक्स (हेमिन) और कारक वी (एनएडी) प्रदान करते हैं। यह भी Neisserias सपा के अलगाव के लिए बहुत उपयोगी है।

ब्लड एगर की तरह, विभिन्न मीडिया को आधार एगर के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। इस्तेमाल की जाने वाली मीडिया में मस्तिष्क हृदय जलसेक और ट्रायप्टिसेज़ सोया अगर शामिल हैं, हालांकि सबसे अधिक अनुशंसित कोलंबिया अगार, मुलर हिंटन, जीसी अगर और थायर मार्टिन अगर हैं।

चॉकलेट एगर के कुछ वैरिएंट्स में एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध फोर्टिफाइड सप्लीमेंट शामिल है जिसे Isovitalex या Polivitex कहा जाता है।

इन सप्लीमेंट्स में विटामिन बी ₁₂, एल-ग्लूटामाइन, एडेनिन, गुआनिन हाइड्रोक्लोराइड, पी-एमिनोबेंज़ोइक एसिड, निकोटिनमाइड एडेनिन डाइन्यूक्लियोटाइड (एनएडी), थायमिन पायरोफ़ॉस्फेट, फेरिक नाइट्रेट, थायमिन हाइड्रोक्लोराइड, सिस्टीन हाइड्रोक्लोराइड, एल-सिस्टीन और ग्लूकोज शामिल हैं।

यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि चॉकलेट एगर रक्त अगर की तुलना में अधिक समृद्ध है, लेकिन यह हेमोलिसिस पैटर्न के अवलोकन की अनुमति नहीं देता है।

अनुप्रयोग

स्रोत: pixnio.com लेखक:

पीट सेडेल, अमांडा मूर, एमटी, टोड पार्कर, पीएचडी, ऑड्रा मार्श, यूएससीडीसीपी

चॉकलेट एगर कोलंबिया आगर के साथ तैयार

इस माध्यम में कैसिइन और हृदय के अग्नाशयी पाचन, मांस के पेप्टिक पाचन, सोडियम क्लोराइड, अगर, खमीर निकालने और कॉर्नस्टार्च शामिल हैं। यह विटामिन, खनिज और आवश्यक अमीनो एसिड में भी समृद्ध है।

यह गर्म रक्त आधार जीनस नीसेरिया के बैक्टीरिया के अलगाव के लिए आदर्श है। दूसरी ओर, यदि ब्रुसेला के लिए एक पूरक अतिरिक्त रूप से मध्यम में जोड़ा जाता है, तो उल्लिखित सूक्ष्मजीव को अलग किया जा सकता है। घोड़े के रक्त का उपयोग करके परिणामों में सुधार किया जाता है।

चॉकलेट एगर जीसी बेस एगर (गोनोकोकी के लिए) के साथ तैयार किया गया

इस माध्यम में पेप्टोन, कॉर्नस्टार्च, मोनोबैसिक और डिबासिक बफ़र्स, सोडियम क्लोराइड, और अगर शामिल हैं।

ज्यादातर व्यावसायिक रूप से तैयार चॉकलेट एगर प्रस्तुतियां इस आधार के साथ आती हैं और इसमें गर्म रक्त नहीं होता है, बल्कि हेमिन का सिंथेटिक मिश्रण और विकास कारकों, विटामिन, खनिज, अमीनो एसिड, कारक वी और ग्लूकोज का रासायनिक पूरक होता है।

चॉकलेट अगार मुलर हिंटन अगर के साथ तैयार किया गया है

इसका उपयोग फास्टिडियस सूक्ष्मजीवों के रोगाणुरोधी संवेदनशीलता के लिए परीक्षण करने के लिए किया जाता है, जैसे कि स्ट्रेप्टोकोकस निमोनिया 5% गर्म भेड़ के रक्त का उपयोग करके।

इसका उपयोग निएसेरियस और हेमोफिलस के प्राथमिक अलगाव के लिए भी किया जाता है, लेकिन हेमोफिलस के अलगाव के विशेष मामले में, घोड़े के रक्त का उपयोग पसंद किया जाता है, क्योंकि यह कारक एक्स और वी का एक समृद्ध स्रोत है।

दूसरी ओर, यदि बोया जाने वाला नमूना गैर-बाँझ क्षेत्र से आता है, तो क्षेत्र के सामान्य वनस्पतियों को बाधित करने के लिए एंटीबायोटिक दवाओं के अतिरिक्त की सिफारिश की जाती है।

श्वसन नमूनों के लिए उदाहरण जहां जीनस हेमोफिलस के जीवाणुओं की उपस्थिति पर संदेह किया जाता है, बैकीट्रैसिन का उपयोग स्टैफिलोकोकस, माइक्रोकॉकस, स्ट्रेप्टोकोकस और सैप्रोफोकिक नेइसेरियास के विकास को बाधित करने के लिए किया जाता है।

जननांग चेंचर के नमूनों के मामले में, जहां हीमोफिलस डुक्रेई का संदेह है, इस प्रकार तैयार एक चॉकलेट अगर सफलतापूर्वक उपयोग किया गया है: मुलर - 5% चॉकलेट वाले घोड़े के खून के साथ हिंटन अगार, 1% Ivvitalex संवर्धन और 3 µg / एमएल वैनकोमाइसिन।

चॉकलेट एगर थायर मार्टिन आगर के साथ तैयार

यह माध्यम नीसेरिया गोनोरिया के अलगाव के लिए विशेष है। इसके साथ वनस्पतियों को बाधित करने के लिए एंटीबायोटिक्स होना चाहिए। मेमने के खून का इस्तेमाल किया जाता है।

तैयारी

उपयोग किए जाने वाले आधार अगर की तैयारी के लिए आपको संकेत देखना चाहिए। वे निर्जलित माध्यम के कंटेनर के पीछे पाए जाते हैं। वे आम तौर पर वर्णन करते हैं कि एक लीटर संस्कृति माध्यम तैयार करने के लिए आपको कितना वजन करना चाहिए।

प्रयोगशाला में आवश्यक सटीक मात्रा तैयार की जा सकती है, यह एक लीटर से अधिक या कम हो सकती है।

गणना

वांछित मात्रा तैयार करने के लिए कितना वजन करने के लिए गणना करने के लिए तीन के एक नियम का उपयोग किया जाता है। उदाहरण:

यदि 1 लीटर के लिए 40 ग्राम वजन करना आवश्यक है और प्रयोगशाला में 800 मिलीलीटर की आवश्यकता होती है, तो यह कहा जाता है:

1000 मिली ----------- 40 जीआर

800 मिलीलीटर ----------- एक्स

सूत्र इस प्रकार होगा:

एक्स = 32 जीआर (800 मिलीलीटर के लिए तौला जाने वाला मात्रा)।

वज़न और भंग

आवश्यक मात्रा को तौला जाता है और पानी के साथ एक फ्लास्क में रखा जाता है।

मध्यम गर्मी पर गर्म करें और धीरे-धीरे रोटरी आंदोलनों के साथ मिलाएं जब तक कि निर्जलित माध्यम पूरी तरह से घुल न जाए, यह 1 मिनट के लिए उबालने की अनुमति देता है।

जीवाणुरहित

फ्लास्क को 20 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर मध्यम बाँझ करने के लिए आटोक्लेव में रखा गया है।

रक्त समुच्चय

आटोक्लेव छोड़ते समय, इसे तब तक खड़े रहने की अनुमति दी जाती है जब तक कि माध्यम का तापमान रक्त रखने के लिए लगभग 56 से 70 ° C के बीच न हो और तब तक मिलाएं जब तक कि माध्यम भूरा न हो जाए।

यदि आप सप्लीमेंट्स जोड़ रहे हैं, तो यह करने का समय है। बाद में प्रत्येक बाँझ पेट्री डिश में 20 मिलीलीटर मिलाएं और परोसें।

पूरी प्रक्रिया एक लामिना का प्रवाह हुड में या बन्सेन बर्नर के आसपास किया जाना चाहिए।

जब तक वे जम न जाएं और फ्रिज में उल्टे रखें।

खून का उपयोग किए बिना चॉकलेट अगर तैयार करने का दूसरा तरीका

आधार माध्यम ऊपर वर्णित के रूप में तैयार किया जाता है, व्यावसायिक रूप से प्राप्त निर्जलित हीमोग्लोबिन को भंग कर दिया जाता है और आटोक्लेव में निष्फल कर दिया जाता है।

दोनों समाधानों को 50 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा करने की अनुमति है, शामिल हो गए हैं और पूरक जोड़ा गया है। सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में मिलाएं और फिर बाँझ पेट्री डिश में परोसें।

क्यूए

यह महत्वपूर्ण है कि रक्त को संकेतित तापमान पर रखा जाता है, क्योंकि यह लाल रक्त कोशिकाओं को ग्रहण करने के लिए आदर्श है और एक ही समय में कारक V को बनाए रखता है, जो गर्मी के प्रति संवेदनशील है।

अगर की सतह पर कोई बुलबुले नहीं रहना चाहिए। 100 प्लेटों के प्रत्येक बैच से, एक या दो प्लेटों को उनकी बाँझपन को सत्यापित करने के लिए 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ओवन में डाला जाना चाहिए।

सर्वोत्तम परिणामों के लिए, तैयारी के तुरंत बाद चॉकलेट अगर का उपयोग किया जाना चाहिए।

क्लिनिकल महत्व के मुख्य तेज सूक्ष्मजीवों के विकास के लिए ताजा माध्यम की प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने के लिए प्रयोगशाला में नियंत्रण बैक्टीरिया के उपभेदों को रखा जाना चाहिए।

संदर्भ

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