- आधार
- विशेषताएँ
- रचना
- उपयोग
- प्रक्रिया
- संस्कृतियों के फंगल संरचनाओं का धुंधलापन
- प्रत्यक्ष जैविक नमूना धुंधला हो जाना
- की पहचान में जर्म ट्यूब धुंधला हो जाना
- लैक्टोफेनोल सुरक्षा डेटा शीट
- स्वास्थ्य
- उत्तेजन
- अस्थिरता
- विशेष खतरा
- संदर्भ
Lactophenol नीले या नीले रंग की सूती एकल डाई गुणों के साथ तैयार किया जाता है। इसका उपयोग क्लिनिकल प्रयोगशालाओं में मुख्य रूप से फफूंद संरचनाओं जैसे कि हाइपहाइ, जर्म ट्यूब और बीजाणुओं में किया जाता है।
यह कुछ कवक के प्रकल्पित या प्रारंभिक निदान में मदद करता है, हालांकि, यह हमेशा अधिक विशिष्ट परीक्षणों, जैसे जैव रासायनिक या सीरोलॉजिकल परीक्षणों के साथ निदान को सुदृढ़ करने के लिए सलाह दी जाती है।
लैक्टोफेनोल नीले दाग का ग्राफिकल प्रतिनिधित्व, स्मीयर लैक्टोफेनोल ब्लू, माइक्रोस्कोप-माउंटेड तैयारी के साथ दाग। स्रोत: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU/https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8
लैक्टोफेनोल ब्लू लैक्टिक एसिड, एनिलिन ब्लू, ग्लिसरीन, फिनोल और विआयनीकृत पानी से बना है। इसे प्रयोगशाला में तैयार किया जा सकता है या इसे तैयार-से-उपयोग के लिए खरीदा जा सकता है। एक बार तैयार होने के बाद यह उपयोग करने के लिए तैयार है, किसी भी परिस्थिति में इसे पतला नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि यह क्रिया भयानक परिणाम देगी।
इसके घटकों की सांद्रता फंगल संरचनाओं को धुंधला करने के लिए इसे आदर्श बनाती है, क्योंकि फिनोल बैक्टीरिया के साथ माइक्रोबायोटा को खत्म करता है, जबकि लैक्टिक एसिड फंगल संरचना के चारों ओर एक सुरक्षात्मक फिल्म बनाता है। अंत में, एनिलिन नीले में कवक की संरचनाओं का पालन करने के लिए एक आत्मीयता है।
आधार
लैक्टोफेनोल नीले रंग के साथ, एक निश्चित मायकोलॉजिकल संस्कृति के कवक संरचनाओं का एक सरल धुंधला हो जाता है। इसे सरल कहा जाता है क्योंकि यह केवल एक रंग का उपयोग करता है।
लैक्टोफेनोल नीला, धुंधला होने के अलावा, नमूना के एक स्पष्ट करनेवाला के रूप में भी काम करता है, लैक्टिक एसिड और फिनोल की संयुक्त कार्रवाई के लिए धन्यवाद, इसके अलावा, फिनोल एक मोर्डेंट के रूप में व्यवहार करता है और साथ ही हाइड्रोलाइटिक एंजाइमों को बाधित करके सूक्ष्मजीव के लसीका को रोकता है। उपस्थित हो सकते हैं।
जबकि लैक्टिक एसिड कवक की संरचनाओं के आकारिकी को संरक्षित करता है।
दूसरी ओर, एनिलिन ब्लू में चिटिन युक्त संरचनाओं के पालन या बंधन की संपत्ति होती है। संरचनाओं को हल्का नीला रंग दिया जाता है।
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि कवक सूक्ष्मजीवों की कोशिका भित्ति, विशेष रूप से मोल्ड्स में चिटिन होता है, यही कारण है कि यह डाई इन सूक्ष्मजीवों को धुंधला करने के लिए आदर्श है।
विशेषताएँ
लैक्टोफेनोल नीला समाधान एक दृढ़ता से अम्लीय, थोड़ा बादल, हल्के नीले रंग के साथ जलीय डाई है। यह स्थिर रहता है यदि इसे 15 ° C और 25 ° C के बीच संग्रहीत किया जाता है। बोतल को ठीक से बंद रखा जाना चाहिए। यह त्वचा और श्लेष्म झिल्ली को परेशान और संक्षारक करता है।
रचना
एक लीटर लैक्टोफेनोल नीला तैयार करने का सूत्र इस प्रकार है:
-250 ग्राम / एल लैक्टिक एसिड
-1.0 ग्राम / एल एनिलिन नीला या मिथाइल नीला
-500 ग्राम / ग्लिसरीन के एल
-250 ग्राम / एल फिनोल
विआयनीकृत या आसुत जल का -250 मिली।
फिनोल को पहले से गर्म पानी में घोल दिया जाता है। लैक्टिक एसिड और ग्लिसरीन को मिलाया जाता है और बहुत अच्छी तरह से मिलाया जाता है। अंत में, एनिलिन नीला घुल जाता है। यह फिर से मिश्रण करता है और उपयोग के लिए तैयार है।
लैक्टोफेनोल नीले समाधान के 80 मिलीलीटर तैयार करने के हिस्से हैं:
-20 ग्राम फिनोल क्रिस्टल
-20 मिलीलीटर लैक्टिक एसिड
-40 मिलीलीटर ग्लिसरीन या ग्लिसरॉल
-20 मिलीलीटर आसुत जल।
उपयोग
यह कवक संरचनाओं को दागने के लिए उपयोग किया जाता है और, सूक्ष्म स्तर पर मनाई गई रूपात्मक विशेषताओं के माध्यम से, कवक के एक पूर्व निदान निदान करने में सक्षम होने के लिए।
प्रक्रिया
संस्कृतियों के फंगल संरचनाओं का धुंधलापन
- कवक की एक शुद्ध संस्कृति लें, जिसकी संरचनाओं का निरीक्षण किया जाना है।
- अधिमानतः एक लामिना का प्रवाह हुड में काम करते हैं, या लाइटर के नीचे, एक मुखौटा और दस्ताने का उपयोग करते हैं, क्योंकि यह जैव सुरक्षा मानकों का पालन करना आवश्यक है, क्योंकि अधिकांश मोल्ड पर्यावरण में फैलाना आसान है और इसलिए एक खतरे का प्रतिनिधित्व करते हैं। ऑपरेटर के लिए।
- लैक्टोफेनॉल ब्लू की एक बूंद को स्लाइड पर रखा जाता है।
- अच्छी गुणवत्ता वाले चिपकने वाले टेप के एक छोटे से वर्ग को काटें और बहुत सावधानी से ठंड निष्फल प्लैटिनम हैंडल के अंत में पालन करें।
- प्लैटिनम हैंडल को कवक कॉलोनी के सबसे सतही हिस्से के करीब लाया जाता है और संस्कृति को बहुत सावधानी से स्पर्श किया जाता है, जहां चिपकने वाला टेप स्थित है।
- फिर इसे स्लाइड पर ले जाया जाता है और लैक्टोफेनोल नीले रंग की बूंद पर सही रखा जाता है, इस बात का ख्याल रखते हुए कि टेप पूरी तरह से विस्तारित है और डाई के साथ चिकनाई है। प्लैटिनम हैंडल बहुत नाजुक रूप से हटा दिया गया है।
- लैक्टोफेनॉल ब्लू की एक और बूंद को टेप पर रखा जाता है और शीर्ष पर एक कवरलिप होता है। बहुत अधिक दबाव लागू न करें ताकि कवक की संरचनाओं को नष्ट न करें, क्योंकि वे बेहद नाजुक हैं। रंगकर्मी को लगभग 3 से 4 मिनट तक कार्य करने की अनुमति दी जानी चाहिए।
- इस समय के बाद, तैयारी 10X या 40X बढ़ाई में एक खुर्दबीन के नीचे देखने के लिए तैयार है। यदि 100X अवलोकन की आवश्यकता है, तो विसर्जन तेल का उपयोग किया जाना चाहिए।
- कवक की संरचनाएं, सामान्य रूप से, नीली दाग वाली होती हैं, इस प्रकार के डिमेटियास कवक के अपवाद के साथ जो इस प्रकार के कवक के अपने विशिष्ट भूरे रंग को बनाए रखेंगे।
प्रत्यक्ष जैविक नमूना धुंधला हो जाना
यदि यह एक प्रत्यक्ष जैविक नमूने, जैसे कि थूक, मवाद, एक्सयूडेट्स, स्राव, अन्य के बीच में अध्ययन करने के लिए आवश्यक है, तो नमूने के परिशोधन के लिए एक पूर्व प्रक्रिया होनी चाहिए। इसके लिए NaOH समाधान का उपयोग किया जाता है।
बालों के नमूनों के मामले में ये सीधे रंगे जा सकते हैं।
कई प्रभावित बालों (कुल 10) को प्रकल्पित टिनिया कैपिटिस घावों (एलोपेसिक क्षेत्रों) से लिया जाता है और एक स्लाइड (3 से 4 बाल प्रति स्लाइड) पर रखा जाता है। लैक्टोफेनॉल नीले की कुछ बूंदों को शीर्ष पर रखा जाता है और तुरंत एक coverslip के साथ कवर किया जाता है।
संदंश के साथ स्लाइड समझ और एक बर्नर पर धीरे से गर्मी। ऐसा करने के लिए, 3 से 4 तेज आंच से गुजरें। 40X पर माइक्रोस्कोप का निरीक्षण करें और बालों के बाहर या अंदर (क्रमशः एक्टोथ्रिक्स या एंडोथ्रिक्स) के बीजाणुओं को देखें। यदि आवश्यक हो तो विसर्जन तेल जोड़ें और 100X पर देखें।
की पहचान में जर्म ट्यूब धुंधला हो जाना
37 डिग्री सेल्सियस पर 2 से 4 घंटे के लिए मानव सीरम में कैंडिडा अल्बिकंस की प्रकल्पित संस्कृति को उकसाने के बाद, समाधान का एक हिस्सा लिया जाता है और लैक्टोफेनोल नीले रंग के साथ दाग दिया जाता है। तैयारी 40X पर माइक्रोस्कोप के तहत मनाया जाता है। रोगाणु ट्यूब मौजूद है और ब्लास्टोस्पोरस दाग उज्ज्वल नीला।
लैक्टोफेनोल सुरक्षा डेटा शीट
नेशनल फायर प्रोटेक्शन एसोसिएशन (NFPA), रासायनिक पदार्थों के लिए सुरक्षा डेटा शीट की स्थापना जोखिम के संदर्भ में करता है जो इसे विभिन्न पहलुओं के अनुसार प्रस्तुत करता है, ये एक रंगीन रोम्बस और 0- से लेकर एक संख्या के प्रतीक हैं। चार।
स्वास्थ्य के खतरों को नीले रंग में पहचाना जाता है, लाल रंग में ज्वलनशीलता, पीले रंग में अस्थिरता या प्रतिक्रियाशीलता और सफेद में कोई विशेष खतरा।
स्वास्थ्य
NFPA के अनुसार लैक्टोफेनॉल ब्लू द्वारा उत्पन्न स्वास्थ्य जोखिम 3 स्तर है। इसका मतलब यह है कि यह पदार्थ बेहद खतरनाक होता है जब इसे त्वचा या म्यूकोसा के सीधे संपर्क में लाया जाता है।
यह एक अत्यधिक संक्षारक और परेशान करने वाला पदार्थ है।
त्वचा और श्लेष्म झिल्ली के संपर्क में यह गंभीर जलन का कारण बनता है।
यदि अंतर्ग्रहण हो तो यह सिरदर्द, भ्रम, सुस्ती, बेहोशी, सांस की गिरफ्तारी और यहां तक कि मौत का कारण बन सकता है।
उत्तेजन
NFPA के अनुसार, लैक्टोफेनोल ब्लू को ज्वलनशीलता के लिए स्तर 1 का दर्जा दिया गया है। इसका मतलब है कि यह केवल तभी जलता है जब इसे 94 डिग्री सेल्सियस से ऊपर गर्म किया जाता है।
अस्थिरता
प्रतिक्रियात्मकता के संदर्भ में एनएफपीए के स्तर 0 (शून्य) के अनुसार सूचीबद्ध। इसका मतलब यह है कि इसमें प्रतिक्रियाशीलता का कोई जोखिम नहीं है, अर्थात यह रासायनिक रूप से स्थिर पदार्थ है।
विशेष खतरा
यह कोई अतिरिक्त विशेष खतरा नहीं है।
संदर्भ
- SAR प्रयोगशाला। लैक्टोफेनोल ब्लू। 2010. उपलब्ध: labsar.com
- एप्लाइड क्लिनिकल केमिस्ट्री प्रयोगशाला। लैक्टोफेनोल नीला। 2015.Available पर: cromakit.es
- मर्क लेबोरेटरीज। समाधान में लैक्टोफेनोल ब्लू माइक्रोस्कोपी। 2017.Available पर: उपयोगकर्ता / Equipo / डाउनलोड
- आपातकालीन कार्ड। कवक धुंधला के लिए लैक्टोफेनॉल नीला समाधान। यूनिवर्सिटेड पोंटिशिया जेवरियाना, बोगोटा कोलंबिया। 2014.Available पर: javeriana.edu.co
- गोंजालेज एम, डायमोंट डी, गुटियारेज बी। गैर-प्रदूषणकारी विकल्प के रूप में वनस्पति रंगों के साथ कवक संरचनाओं को धुंधला करने की तकनीक। बायोएग्रो, 2011; 23 (1): 65-68। पर उपलब्ध: Redalyc।
- प्रयोगशाला की मल्टीमीडिया। लैक्टोफेनॉल कॉटन ब्लू। 2017. से उपलब्ध: himedialabs.com
- वेन्कर ए, शावेज वी, हुआंग आर, वाहिद ए, अभिनेता जे, दासगुप्ता ए। जैव रासायनिक परीक्षण और धुंधला तकनीक सूक्ष्मजीव पहचान के लिए। विज्ञान प्रत्यक्ष, 2017; 61-73। से उपलब्ध: एल्सेवियर