Orceína बैंगनी रंग का एक प्राकृतिक, orchilla या archill, fruticose लाइकेन Rocella टिंकटोरिया और Lecanora parella मुख्य रूप से के रूप में विभिन्न शैवाल से निकाली गई है। Rocella tinctoria अफ्रीकी और अमेरिकी महाद्वीप में पाया जाता है, हालांकि इसे यूरोप में स्थित अन्य प्रजातियों द्वारा प्रतिस्थापित किया जा सकता है।
यह दाग प्राचीन काल से साइटोजेनेटिक अध्ययनों में व्यापक रूप से इस्तेमाल किया गया है। इस अर्थ में, ऑसिनेट की तैयारी जिसमें एसिटिक एसिड शामिल है, 1941 में लाकोर्ट द्वारा पेश किया गया था, यही वजह है कि इसे शुरू में लाकोर्ट तकनीक कहा गया था।
ऑर्सीन और ऑर्सीन समाधान की रासायनिक संरचना। स्रोत: Wikipedia.org/ Oguenther at de.wikipedia (डॉ। गुएन्थर)
इसी तरह, इसकी सादगी और कम लागत के कारण, इसका उपयोग लिटमस (लाइकेन से निकाले गए एक दाग) और हिस्टोलॉजिकल अध्ययन (कोशिकाओं और ऊतकों के धुंधला) के निर्माण के लिए किया गया है।
कई अध्ययनों ने अन्य रसायनों, जैसे अमोनिया पिकोक्रिमनेट और एसिटिक एसिड के साथ मिलकर इस धुंधला का उपयोग किया है, क्रमशः लोचदार फाइबर और गुणसूत्रों को दागने के लिए। वर्तमान में, जानवरों और पौधों के साइटोजेनेटिक अध्ययन में ऑर्सीन का उपयोग जारी है।
हाल ही में, सिल्वा एट अल। चिली के पुराने वयस्कों में अंगूठे की त्वचा के लोचदार तंतुओं में होने वाले विभिन्न परिवर्तनों का निरीक्षण करने के लिए 2017 ने इस दाग का सफलतापूर्वक उपयोग किया। इस अध्ययन से पता चला कि उम्र बढ़ने के साथ अंगूठे के तंतु कैसे बदल जाते हैं।
इस अर्थ में, लोचदार फाइबर को 80 वर्ष से अधिक आयु के व्यक्तियों में रंग में भूरा-काला होना देखा गया था; जबकि सबसे कम उम्र (60 साल से) में उन्हें लाल-भूरे रंग के रूप में देखा जाता है। साइटोप्लाज्म और अन्य कोशिका संरचनाएं पीले-हरे रंग में बदल जाती हैं।
इसने लोचदार फाइबर की उपस्थिति और स्थिति को उनके स्वभाव, मात्रा और अखंडता के संदर्भ में पुष्टि करने की अनुमति दी। दूसरी ओर, यह भी संकेत दिया गया है कि अन्य स्थितियों के बीच धमनीविस्फार की पहचान करने और धमनीशोथ का निदान करने में ऑरेसिन बहुत मदद करता है।
आधार
ऑरेसिन डाई के ऑक्सीजोन समूह का हिस्सा है, और धुंधला डीएनए के लिए अपनी आत्मीयता पर आधारित है। डाई इस अणु के ऋणात्मक आवेश को बांधता है, जिसे फॉस्फेट समूह द्वारा दर्शाया जाता है। इसीलिए, गुणसूत्र दाग वाले बैंगनी होते हैं।
हालांकि, सेल के बाकी ढांचे अलग रंग लेते हैं। विशेष रूप से, लोचदार तंतुओं के मामले में, वे लाल रंग के भूरे रंग के होते हैं, नीले से गहरे बैंगनी रंग के सेल नाभिक होते हैं, जबकि कोलेजन पर दाग नहीं होता है।
इस कारण से, मक्खियों की कुछ प्रजातियों में क्रोमैटिन को अलग करने और सेक्स में अंतर करने के लिए ऑर्सीन का उपयोग किया जाता है। इसी तरह, हेपेटाइटिस बी एंटीजन द्वारा उत्पादित नाभिक और कुछ यकृत समावेशन को दाग दिया जा सकता है।
धुंधला में ऑर्सीन समाधान के विशिष्ट कार्य हैं। Orcein A में कोशिका झिल्लियों को नरम करने का कार्य होता है, जिससे उनकी मृत्यु होती है और उनके विभाजन की प्रक्रिया को लकवा मार जाता है। इस बीच, orcein B गुणसूत्रों के आसंजन द्वारा धुंधलापन पूरा करने के लिए जिम्मेदार है।
तैयारी
एसीटो-ऑर्सीन समाधान 1%
एसीटो-ऑर्सीन का 1% घोल तैयार करने के लिए, 2 ग्राम ऑरेसिन को 45 मिलीलीटर ग्लेशियल एसिटिक एसिड में भंग कर दिया जाता है, अधिमानतः गर्म होता है, और 55 मिलीलीटर आसुत जल कमरे के तापमान पर जोड़ा जाता है।
फिर, समाधान को समरूप करने के लिए इसे लगातार मिलाया जाता है, बाद में इसे ठंडा होने तक आराम करने दें। अंत में, इसे डार्क जार में 4ºC पर संग्रहीत किया जाता है। इस तैयारी का उपयोग फ्लोर्स 2012 द्वारा किया गया था, गाय के oocytes के परिपक्वता चरणों का निरीक्षण करने के लिए।
इस मामले में, उदाहरण के लिए, एसिटो-ऑर्सीन समाधान को 24 घंटे के लिए एसिटिक एसिड-इथेनॉल में पहले से निर्धारित ऊतक पर रखा गया है। इस धुंधला होने की प्रक्रिया को 30 मिनट तक किया जाता है और ऊतक को बाद में उखाड़ दिया जाता है।
इसी तरह, बहुकोशिकीय ऊतकों में ऑर्गेनेल की पहचान में इसका इस्तेमाल किया जा सकता है। इस मामले में, बुसील म्यूकोसा का एक धब्बा एसिटो-ऑर्सीन समाधान की एक बूंद के साथ दाग दिया जाता है, कवरलिप को स्लाइड पर रखा जाता है और इसके उपकला के साथ सेल के नाभिक को तुरंत मनाया जा सकता है।
लैक्टो-प्रोपोनिक सॉल्यूशन 1%
इसके अतिरिक्त, अन्य रसायनों जैसे लैक्टिक एसिड और प्रोपियोनिक एसिड के साथ ऑर्सीन तैयार किया जा सकता है। ऐसा करने के लिए, एक ग्राम ऑरेसिन को 23 मिली लीटर लैक्टिक एसिड और 23 मिली प्रोपोइक एसिड के कमरे के तापमान पर एक प्रीमिक्स में घोल दिया जाता है; 100 मिलीलीटर तक आसुत जल के साथ मात्रा बनाना।
इस लैक्टो-प्रोपियोनिक ऑरेसिन समाधान के साथ पौधों की कोशिकाओं के अर्धसूत्री विभाजन के विभिन्न चरणों का निरीक्षण करना संभव है। इस मामले में, पहले से तय और हाइड्रोलाइज्ड नमूना लैक्टो-प्रोपियोनिक ऑरेसिन समाधान में 15 मिनट के लिए रखा जाता है और फिर ऊतक माइक्रोस्कोप स्लाइड पर फैलता है।
पॉलीजेनिक क्रोमोसोम पर ड्यूक 2016 के अध्ययन में, उन्होंने एसिटिक एसिड में पतला 2 ग्राम ऑरेसिन और 85% लैक्टिक एसिड की तैयारी का उपयोग किया, 65% एसिटिक एसिड समाधान के साथ पतला। अंत में, उन्होंने ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर की लार ग्रंथियों में गुणसूत्रों को देखा।
ओर्सिन ए और ऑर्सिन बी
यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि नमूने पर निर्भर करता है और क्या मूल्यांकन किया जाना है, उपयुक्त ऑर्सीन समाधान तैयार किया जाता है। इस प्रकार, उदाहरण के लिए, 1N हाइड्रोक्लोरिक एसिड को विभाजित कोशिकाओं का निरीक्षण करने के लिए ऑर्सिन ए समाधान में जोड़ा जाता है।
जबकि ऑरेसिन बी घोल को 45% एसिटिक एसिड में भंग कर दिया जाता है। यह तकनीक एक संक्षिप्त धुंधला विधि है और आमतौर पर क्रोमोसोमल संरचनाओं के धुंधला के लिए सहायक के रूप में उपयोग किया जाता है।
अंतिम विचार
शताब्दियों के बाद से, लेकेनोरा, परमेलिया और उम्बेलिसारिया जैसे लाइकेन अमेरिकी महाद्वीप के देशों जैसे अर्जेंटीना में पाए जा सकते हैं, जो ऑरेसिन के महान स्रोत हैं। इसके अलावा यूरोपीय क्षेत्र जैसे कि कैनरी द्वीप, उस समय ऑर्किला के बड़े उत्पादक थे।
यह इसी महाद्वीप के अन्य शहरों जैसे जेनोआ और इंग्लैंड जैसे देशों में निर्यात किया गया था, जबकि हॉलैंड ने ऑर्किला से लिटमस के निर्माण का एकाधिकार किया था। इसलिए, इस लाइकेन को बाद में कम कर दिया गया जब तक कि यह विलुप्त होने वाला नहीं था।
इसके कारण ऑर्किला को डाई के गुणों वाले अन्य पौधों द्वारा प्रतिस्थापित किया गया। हालांकि, सिंथेटिक रंगों के उद्भव ने इस ऑर्सीन स्रोत लाइकेन में व्यापार को समाप्त करने में योगदान दिया।
यह संभव था कि कोको के लिए धन्यवाद, जिन्होंने 1812 में ऑर्सीन के संश्लेषण का वर्णन किया था, यह जानते हुए कि यह एक फ़ेनोलिक यौगिक द्वारा संश्लेषित है जिसे ओर्सिनॉल कहा जाता है। हालांकि, इसके बावजूद, प्राकृतिक ऑर्सीन आज भी पसंदीदा है।
ऐसा इसलिए हो सकता है क्योंकि ओरसीनोल एक बहुत मजबूत गंध वाला यौगिक है, और इसका लंबे समय तक जोखिम स्वास्थ्य जोखिम उठा सकता है, जैसे कि गंध का पता लगाने की क्षमता का नुकसान। पिट्यूटरी के लिए ये नुकसान अस्थायी से स्थायी रूप से अधिक से अधिक जोखिम के लिए जा सकते हैं।
संदर्भ
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