संस्कृति मीडिया की तैयारी: उद्देश्य और कदम - जीवविज्ञान - 2025

संस्कृति मीडिया की तैयारी वांछित सूक्ष्मजीवों के विकास के लिए प्रयोगशालाओं में उपयोग की जाने वाली एक नियमित पद्धति है। संस्कृति मीडिया ठोस, तरल या अर्ध-ठोस तैयारी है जिसमें एक माइक्रोबियल आबादी के विकास के लिए सभी आवश्यक पोषक तत्व होते हैं।

सामान्य तौर पर, सूक्ष्मजीवों की खेती के लिए साधन प्रोटीन और अमीनो एसिड में समृद्ध होते हैं और आमतौर पर कुछ घटक होते हैं जो अध्ययन करने के लिए जीव की वृद्धि का पक्ष लेते हैं, जैसे कि विटामिन, रक्त, सीरम, अन्य।

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कोई सामान्य या सार्वभौमिक संस्कृति माध्यम नहीं है, क्योंकि इसकी संरचना ब्याज की सूक्ष्मजीव की जरूरतों के आधार पर भिन्न होती है। कुछ बैक्टीरिया किसी भी संस्कृति माध्यम में विकसित हो सकते हैं, लेकिन दूसरों की विशेष आवश्यकताएं हैं।

इसमें क्या शामिल होता है?

सूक्ष्मजीवों, जैसे कि कवक और बैक्टीरिया, उनके छोटे आकार के कारण व्यक्तिगत रूप से अध्ययन नहीं किया जा सकता है। इस कारण से, उन्हें कृत्रिम साधनों में खेती की जानी चाहिए जो आबादी में उल्लेखनीय वृद्धि की अनुमति देते हैं।

उदाहरण के लिए, यदि हम जीवाणुओं का अध्ययन करना चाहते हैं तो हमें उन्हें सही परिस्थितियाँ प्रदान करनी होंगी ताकि वे एक उपनिवेश बना सकें और एक उपनिवेश बना सकें (जिसे नग्न आंखों से देखा जा सके)।

संस्कृति मीडिया की तैयारी व्यापक रूप से खेती की जाने वाली सूक्ष्मजीव के प्रकार पर निर्भर करती है। इसे तैयार करने से पहले, कार्य जीव की बुनियादी पोषण संबंधी आवश्यकताओं को जानना आवश्यक है।

संस्कृति मीडिया में उपयोग किए जाने वाले सबसे सामान्य घटकों को उनकी तैयारी का सामान्य विचार प्राप्त करने के लिए नीचे वर्णित किया जाएगा:

Agar

इसका उपयोग संस्कृतियों में एक गेलिंग एजेंट के रूप में किया जाता है और ठोस या अर्ध-ठोस माध्यम की तलाश में इसे जोड़ा जाता है। मीडिया की तैयारी में उपयोग किया जाने वाला पहला सॉलिडाइजिंग एजेंट जिलेटिन था, लेकिन 1883 में डब्ल्यू हेस द्वारा बैक्टीरियोलॉजी की दुनिया में पेश किया गया था।

जीवाणु कृषि में इसके मुख्य घटक के रूप में शैवाल से निकाले गए जटिल शाखाओं के साथ एक पॉलीसैकराइड है। इस यौगिक का उपयोग आइसक्रीम और जैम जैसे आम खाद्य पदार्थों में एक माली के रूप में किया जाता है।

यह कई कारणों से सूक्ष्म जीव विज्ञान में एक बहुत ही मूल्यवान तत्व है। मुख्य रूप से क्योंकि सूक्ष्मजीव इसे नीचा नहीं कर सकते, यह 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर द्रवीभूत होता है और 45 डिग्री सेल्सियस या उससे कम तक पहुंचने तक तरल अवस्था में रहता है।

यदि आप एक ठोस माध्यम तैयार करना चाहते हैं, तो अग्र सांद्रता लगभग 1.5% होनी चाहिए, जबकि सेमीसोल को 0.3 से 0.5% तक तैयार किया जाना चाहिए।

तरल पदार्थ

रोगजनक जीवों की खेती के लिए शरीर के तरल पदार्थों की आवश्यकता होती है ताकि वे अपने प्राकृतिक वातावरण में विकसित हो सकें। इस कारण से, पूरे या डिफिब्रिलेटेड रक्त को जोड़ा जाता है। तरल पदार्थ एक स्वस्थ जानवर से लिया जाता है और, एक बार निष्फल होने के बाद, इसे संस्कृति के माध्यम से जोड़ा जाता है।

कुछ अंशः

वे विभिन्न पशु भागों (जैसे मांस या जिगर) या सब्जियों (बीज) से प्राप्त किए जाते हैं और पेस्ट या पाउडर के रूप में एक ठोस ध्यान केंद्रित करने के लिए संसाधित होते हैं। सबसे आम खमीर, माल्ट और मांस हैं।

peptones

ये कार्बनिक यौगिक जानवरों या पौधों के ऊतकों के एंजाइमैटिक या रासायनिक हाइड्रोलिसिस द्वारा प्राप्त किए जाते हैं। इसका उद्देश्य अमीनो एसिड से समृद्ध सामग्री को जोड़ना है, जो प्रोटीन की मूलभूत इकाइयाँ हैं।

आघात अवशोषक

"बफ़र्स" या बफर सिस्टम पीएच में अचानक बदलाव से बचते हैं और शरीर को सहन करने वाली इष्टतम सीमा को बनाए रखने में मदद करते हैं।

अधिकांश जीव 7 के पीएच में अच्छी तरह से पनप सकते हैं, हालांकि कुछ बैक्टीरिया क्षारीय मीडिया को पसंद करते हैं। हालांकि, ऐसे बैक्टीरिया हैं जो 6 और 9 के मूल्यों के बीच पीएच भिन्नता का विरोध करते हैं।

पीएच-संवेदनशील प्रजातियों में, क्षति हाइड्रोजन या हाइड्रॉक्सिल आयनों की अत्यधिक मात्रा से उत्पन्न नहीं होती है, लेकिन कमजोर एसिड या ठिकानों की वृद्धि से जो कोशिका में प्रवेश कर सकते हैं।

इसी तरह, पीएच संकेतकों को इसे मॉनिटर करने और किण्वन या अन्य प्रक्रियाओं के कारण होने वाले विचलन से बचने के लिए जोड़ा जाता है।

लक्ष्य

संस्कृति माध्यम तैयार करते समय मुख्य उद्देश्य सभी आवश्यक घटकों को जोड़ना है ताकि जीव के सफल विकास को पृथक किया जा सके। वांछित माध्यम को प्राप्त करने के लिए घटकों और पोषक तत्वों के सबसे प्रभावी संयोजन की पहचान की जानी चाहिए।

सफल विकास सुनिश्चित करने के लिए माध्यम की तैयारी और भंडारण दोनों महत्वपूर्ण हैं, क्योंकि माध्यम की संरचना और पोषक तत्वों की उपलब्धता इन चरणों पर निर्भर करती है।

यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि सूक्ष्मजीवों की खेती एक ऐसा कार्य है जो संस्कृति के माध्यम से बाहरी कई कारकों से प्रभावित होता है, जैसे कि प्रकाश की तीव्रता, तापमान और अम्लता का स्तर या माध्यम की क्षारीयता। इसलिए, इनमें से प्रत्येक चर को ध्यान में रखा जाना चाहिए।

मीडिया प्रकार

इसकी रचना के आधार पर

उनकी रचना के आधार पर, तीन मुख्य प्रकार की फसलें होती हैं: प्राकृतिक या अनुभवजन्य, अर्ध-सिंथेटिक और परिभाषित सिंथेटिक या रासायनिक मीडिया।

प्रकृतिक वातावरण

प्राकृतिक वातावरण में सटीक रचना अज्ञात है। इनमें दूध, पतला रक्त, वनस्पति रस, अर्क और मांस और पेप्टोन जैसे तत्व शामिल हैं। आर्थिक कारणों से, सस्ते घटकों जैसे सोया अर्क, मट्ठा, गुड़ आदि को अक्सर जोड़ा जाता है।

अर्ध-सिंथेटिक मीडिया

इसे अर्ध-संश्लिष्ट माध्यम कहा जाता है यदि इसकी रचना आंशिक रूप से ज्ञात हो। कोई भी माध्यम जिसमें अगर होता है, एक अर्ध-सिंथेटिक माध्यम बन जाता है।

उनमें से हम अन्य उदाहरणों में आलू डेक्सट्रोज अगर, कजापेक-डोक्स अगर, ओट एगर, मीट पेप्टोन अगर शामिल हैं।

सिंथेटिक या रासायनिक परिभाषित माध्यम

इस मामले में माध्यम की संरचना - कार्बन, नाइट्रोजन, सल्फर, फास्फोरस और किसी अन्य विकास कारक के स्रोतों की मात्रा के संदर्भ में - पूरी तरह से ज्ञात है। यदि आप अन्य शोधकर्ताओं के लिए प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम प्राप्त करना चाहते हैं तो यह बहुत उपयोगी है।

तथाकथित "विशेष विकास आवश्यकताओं वाले सूक्ष्मजीव" के लिए आवश्यक घटकों को जोड़ना आवश्यक है। इस प्रकार का एक उदाहरण लैक्टोबैसिलस है।

सूक्ष्मजीव के प्रकार के आधार पर

इसी तरह, संस्कृति मीडिया के लिए सूक्ष्मजीव के प्रकार पर आधारित एक और वर्गीकरण है जो उस पर बढ़ सकता है। इस सिद्धांत के बाद हमारे पास निम्नलिखित सामान्य, संवर्धन, चयनात्मक और विभेदक साधन हैं। प्रत्येक को नीचे वर्णित किया गया है:

सामान्य मीडिया

ये सूक्ष्मजीवों की एक विस्तृत विविधता के विकास का समर्थन करते हैं। यदि किसी भी जीव को अपनी वृद्धि के लिए विशेष परिस्थितियों की आवश्यकता होती है, तो वह इस प्रकार की संस्कृति में सफलतापूर्वक विकसित नहीं हो पाएगा।

समृद्ध मीडिया

संवर्धन मीडिया एक निश्चित प्रकार के सूक्ष्मजीव के विकास का समर्थन करता है, लेकिन अन्य प्रकार के रोगाणुओं को इसमें बढ़ने से रोकने के लिए कोई पदार्थ नहीं जोड़ा गया है।

चुनिंदा मीडिया

वे सूक्ष्मजीव के विशिष्ट विकास की तलाश करते हैं, इसे कवक, बैक्टीरिया, प्रोटोजोआ, अन्य के बीच कहते हैं। ऐसा करने के लिए, वे दूसरों के विकास को रोकते हैं।

इस उद्देश्य को प्राप्त करने के लिए, रासायनिक यौगिक जो सूक्ष्मजीवों के एक विस्तृत समूह के लिए घातक हैं और रुचि के जीव के लिए हानिरहित हो सकते हैं, या ऊर्जा स्रोतों को जोड़कर जो केवल लक्ष्य सूक्ष्म द्वारा आत्मसात कर सकते हैं।

रोगजनक सूक्ष्मजीव की खेती करने के लिए चिकित्सा नमूनों को लेते समय चयनात्मक मीडिया का उपयोग किया जाता है। यहां रोगजनक के विकास को बढ़ावा देना और रोगी से सामान्य माइक्रोबियल वनस्पतियों के विकास को रोकना आवश्यक है।

उदाहरण के लिए, बिस्मथ सल्फाइट अगर, ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास और जठरांत्र संबंधी गुहा में पाए जाने वाले बैक्टीरिया की एक बड़ी संख्या की अनुमति नहीं देता है। इस कारण से, यह ग्राम-नकारात्मक जीवाणुओं की खेती करने के लिए उपयोग किया जाता है जो टाइफाइड बुखार का कारण बनता है, फेकल नमूनों में साल्मोनेला टाइफी।

अंतर मीडिया

यह प्रकार ब्याज के जीव की कुछ नैदानिक ​​विशेषता (इसके चयापचय में विशिष्टताओं, उदाहरण के लिए) का उपयोग करता है, उन्हें एक ही वातावरण में उगने वाली अन्य प्रजातियों के खिलाफ पहचानने में सक्षम होना चाहिए।

विभेदक मीडिया और चयनात्मक मीडिया दोनों नैदानिक ​​सूक्ष्म जीव विज्ञान और सार्वजनिक स्वास्थ्य के क्षेत्र में बहुत उपयोगी हैं, क्योंकि इन विषयों को पैथोलॉजी या खराब स्वच्छता स्थितियों से संबंधित विशिष्ट सूक्ष्मजीवों की उपस्थिति का पता लगाने की आवश्यकता है।

संकेतक पदार्थों को उस संस्कृति में जोड़ा जा सकता है जो मांगी गई कॉलोनी को एक विशिष्ट विशेषता देता है। उदाहरण के लिए, लैक्टोज और एक पीएच सूचक को अगर-ईोसिन-मेथिलीन ब्लू (संक्षिप्त ईएमबी) और मैककॉन्की अगर में जोड़ा जाता है।

इस प्रकार, जब इन मीडिया में एक कॉलोनी लैक्टोज को किण्वित करने और एल्डीहाइड बनाने की क्षमता के साथ विकसित होती है, तो उन्हें एक विशेष रंग में देखा जा सकता है।

कदम

वर्तमान में संस्कृति मीडिया को lyophilized रूप में खरीदा जा सकता है। इसलिए, तैयारी आसान है और केवल एक चीज जो करना बाकी है, वह है उत्पाद को फिर से निर्जलित करना। सामग्री को तौला जाना चाहिए (तैयार की जाने वाली अंतिम मात्रा को ध्यान में रखते हुए) और उत्पाद के सभी संकेतों के बाद आसुत जल में भंग कर दिया जाना चाहिए।

तरल मीडिया की सामग्री को बाद के नसबंदी के लिए वांछित कंटेनर (पेट्री डिश, ट्यूब, आदि) में विभाजित किया जाना चाहिए। ठोस माध्यम को वितरित करने के लिए माइक्रोवेव का उपयोग करके या पानी के स्नान के लिए सामग्री के अधीन इसे पिघलाना आवश्यक है। माध्यम का पीएच समायोजित किया जाना चाहिए।

आमतौर पर अगर का उपयोग टेस्ट ट्यूब या पेट्री डिश में किया जाता है। अगर एगर एक झुकाव वाली स्थिति में जम जाता है, तो उचित कोण के साथ ताकि अंतिम टर्मिनल किनारे विकर्ण हो, इस व्यवस्था को चोंच या झुकाव ट्यूबों के रूप में जाना जाता है। जब अग्र पूरी तरह से लंबवत स्थिति में जम जाता है, तो इसे "गहरा" कहा जाता है।

मीडिया को स्टरलाइज़ करने के बाद - एक आटोक्लेव का उपयोग करके - उन्हें ठंडा करने की अनुमति है। इन्हें सूक्ष्मजीवों से मुक्त वातावरण में संभाला जाना चाहिए, सबसे आम है एक लिटिर लाइटर के साथ काम करना जो उनके आसपास के क्षेत्र में एक सड़न रोकनेवाला वातावरण सुनिश्चित करता है।

संदर्भ

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