COAGULASE परीक्षण: औचित्य, प्रक्रिया, और उपयोग करता है - जीवविज्ञान - 2025

Coagulase परीक्षण एक प्रयोगशाला एंजाइम coagulase की उपस्थिति का खुलासा करने के लिए इस्तेमाल की तकनीक है। इस एंजाइम में जमावट प्लाज्मा की संपत्ति होती है। 1903 में Loeb इस एंजाइम का वर्णन करने वाला पहला था।

यह परीक्षण ग्राम-पॉजिटिव, कैटेलेज-पॉजिटिव कोक्सी पर किया जाता है, जिससे स्टेफिलोकोकस ऑरियस स्ट्रेन को स्टैफिलोकोकी के बाकी हिस्सों से अलग करने की अनुमति मिलती है, क्योंकि यह नैदानिक ​​महत्व का एकमात्र सूक्ष्मजीव है जो इसे पैदा करता है।

दोनों छवियों से एक सकारात्मक कोगुलेज़ टेस्ट का पता चलता है। स्रोत: वाम छवि: फिलिपिंज। सही छवि: लेखक एमएससी द्वारा ली गई तस्वीर। मारिएला गिल।

इस अर्थ में, Staphylococaceae परिवार के सदस्य जो नकारात्मक परीक्षण करते हैं, उन्हें अक्सर कोगुलेज़ नकारात्मक Staphylococcus कहा जाता है।

एस। ऑरियस के अलावा कुछ उपभेद भी हैं जो कोएगुलस का उत्पादन कर सकते हैं, जैसे कि स्टैफिलोकोकस स्लेलेरिफी एसपीपी कोगुलांस, एस। हाइकस, एस। इंटरड्यूस और एस डेलफिनी।

हालांकि, पहले तीन पशु चिकित्सा स्तर पर नैदानिक ​​महत्व के हैं और बहुत कम ही मनुष्यों में संक्रमण के प्रेरक एजेंट के रूप में पाए जा सकते हैं, जबकि एस डेल्फीनी केवल समुद्री वातावरण में पाया जाता है।

इसके अलावा, उन्हें आसानी से विभेदित किया जाता है क्योंकि एस। हाइकस और एस। बीच में नहीं होता है मैननिटॉल और एस। स्लेलेफेरि एसपीपी कोगुलांस, माल्टोज या ट्रेहलोज को किण्वित नहीं करता है, जबकि एस ऑरियस इन कार्बोहाइड्रेट को किण्वित करता है।

कोगुलेज़ एंजाइम की उपस्थिति उपभेदों के कौमार्य से जुड़ी हुई है। हालांकि, यह सिद्धांत अलग हो रहा है, क्योंकि अन्य विषाणुजनित कोगुलेज़ नकारात्मक प्रजातियां महत्वपूर्ण संक्रमण पैदा करने में सक्षम हैं।

आधार

व्याख्या

5-20 सेकंड (मजबूत सकारात्मक परीक्षण) के भीतर एकत्रीकरण।

20 सेकंड और एक मिनट (सकारात्मक परीक्षण में देरी) के बीच होने वाली परिवर्तनशीलता।

एक मिनट के बाद एग्लूटिनेशन की कुछ डिग्री (संदिग्ध साक्ष्य)। ट्यूब विधि द्वारा परीक्षण को दोहराने या पुष्टि करने की सिफारिश की जाती है।

कोई एग्लूटीनेशन (नकारात्मक परीक्षण) नहीं है।

एसएसएफ के साथ परिणाम। यह हमेशा नकारात्मक देना चाहिए, अगर यह सकारात्मक रूप से स्वचालित रूप से परीक्षा परिणाम देता है।

-Tube कोगुलेज़ परीक्षण

सामग्री

-सर्वर टेस्ट ट्यूब

-Plasma

-बैथ ऑफ मैरी 37 डिग्री सेल्सियस।

तकनीक

एक बाँझ पिपेट के साथ 12 x 75 टेस्ट ट्यूब में पिपेट 0.5 मिली प्लाज्मा ध्यान से मिश्रण और 4 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर सेते हैं।

पहले घंटे में ट्यूब को बिना हिलाए उसकी जांच करें, बस उसे धीरे से झुकाएं। यदि एक थक्का अभी भी नहीं देखा गया है, तो इसे हर 30 मिनट में देखा जा सकता है जब तक कि 4 घंटे पूरे नहीं हो जाते। यदि 4 घंटे के बाद भी यह नकारात्मक है, तो इसे 24 घंटे तक छोड़ा जा सकता है लेकिन कमरे के तापमान पर। परिणाम देखें और रिपोर्ट करें।

अनुभव के आधार पर, कुछ सूक्ष्म जीवविज्ञानी परीक्षण करने के लिए तरल माध्यम में 18 घंटे की संस्कृति से बैक्टीरिया निलंबन के 500 μl का उपयोग करने की सलाह देते हैं।

यह ठोस मीडिया से उपनिवेशों को उत्सर्जित करने की तुलना में तेजी से और अधिक विश्वसनीय परिणाम प्रदान करता प्रतीत होता है, खासकर अगर रक्त बैंक से प्राप्त मानव प्लाज्मा का उपयोग किया गया हो।

एक शोरबा से उपभेदों का उपयोग प्लाज्मा में मानव एंटी-स्टैफिलोकोकल एंटीबॉडी की संभावित उपस्थिति को कम करने में मदद करता है जो कोगुलस की कार्रवाई को रोक सकता है।

व्याख्या

यदि एक थक्का देखा जाता है जो सभी द्रव (पूर्ण थक्के) को सम्मिलित करता है या शेष तरल पदार्थ (आंशिक थक्के) में कुछ नहीं के साथ थक्का होता है तो इसे एक सकारात्मक परीक्षण माना जाना चाहिए।

यदि कोई थक्का नहीं बनता है, यानी निलंबन सजातीय बना रहता है, तो परीक्षण नकारात्मक है।

फाइब्रिनोजेन का उपयोग कर -कागुलस परीक्षण

फाइब्रिनोजेन का उपयोग प्लाज्मा के समान किया जाता है और इसका उपयोग स्लाइड और ट्यूब परीक्षण दोनों के लिए किया जाता है। प्लाज्मा के लिए वर्णित के रूप में आगे बढ़ें और उसी तरह व्याख्या करें।

उपयोग

इसका उपयोग कोगुलस नकारात्मक स्टेफिलोकोसी से स्टेफिलोकोकस ऑरियस को अलग करने के लिए किया जाता है।

क्यूए

एक सकारात्मक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया जा करने के लिए उपलब्ध एस। ऑरियस स्ट्रेन की ताजा संस्कृतियां हैं। एक एस। एपिडर्मिडिस स्ट्रेन एक नकारात्मक नियंत्रण के रूप में भी उपलब्ध है।

सीमाएं

-एक सकारात्मक परीक्षण 24 घंटे के लिए ऊष्मायन में नहीं छोड़ा जाना चाहिए, क्योंकि एस ऑरियस एक फाइब्रिनोलिसिन का उत्पादन करता है जो थक्का को भंग करता है।

-एक विश्वसनीय परीक्षण के लिए, ताजा या नए पुनर्गठित प्लाज्मा का उपयोग किया जाना चाहिए, साथ ही साथ ताजा बैक्टीरिया संस्कृतियों (18 से 24 घंटे) का उपयोग करना महत्वपूर्ण है। यह झूठे नकारात्मक से बचा जाता है।

-परीक्षा को नकारात्मक और सकारात्मक नियंत्रण के साथ पूरा किया जाना चाहिए।

-कुछ ठोस मीडिया कोगुलेज़ परीक्षण में हस्तक्षेप कर सकते हैं। नमकीन मैनिटोल अगर से कालोनियों का उपयोग करने की अनुशंसा नहीं की जाती है।

-यदि साइट्रेटेड प्लाज्मा का उपयोग किया जाता है, तो झूठी सकारात्मकता से बचने के लिए प्लाज्मा के प्रति हेपरिन की 5 इकाइयों को रखने की सिफारिश की जाती है। ऐसा इसलिए है क्योंकि एस ऑरियस के अलावा कुछ सूक्ष्मजीव साइट्रेट को तोड़ सकते हैं और प्लाज्मा को थक्के का कारण बन सकते हैं। इस मामले में, एक ग्राम और एक उत्प्रेरित परीक्षण करना उचित है।

-यह महत्वपूर्ण है, ट्यूब टेस्ट में, हर 30 मिनट में प्रतिक्रिया की निगरानी करने के लिए, एस। ऑरियस के उपभेद हैं जो फाइब्रिनोलिसिन की उच्च सांद्रता पैदा करते हैं और जल्दी से नए बने थक्के को पतला कर देंगे। झूठी नकारात्मक बातों से बचें।

-जबकि परीक्षण की निगरानी, ​​ट्यूब को अचानक हिलाने से बचें, इससे थक्का बनने की दीक्षा नष्ट हो सकती है जो बाद में बहाल नहीं होगी, जिससे झूठी नकारात्मकता पैदा होगी।

संदर्भ

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