SAFRANIN: विशेषताओं, उपयोग, तकनीक, विषाक्तता - रसायन विज्ञान - 2025

सैफरैनीन एक meriquinoide डाई, दो benzenoid छल्ले और 2 quinoid छल्ले, होने इसकी रासायनिक संरचना के लिए नामित किया गया है बाद उन है कि लाल रंग प्रदान किया जा रहा है।

इसे अपने संक्षिप्त रूप में डाइमिथाइल सफ़रिन या बेसिक रेड 2 भी कहा जाता है, क्योंकि इसका वैज्ञानिक नाम 3,7-diamino-2,8-डाइमिथाइल-5-फिनाइल-फेनाज़िनियमक्लोरो डाइमिथाइल सफ़ारीन है और रासायनिक सूत्र C ₂₀ H ₁₉ N _{4 है} क्लोरीन।

बेंजीनॉइड और क्विनॉइड रिंग्स / सेफ्रेनिन के जलीय घोल को दर्शाने वाले सफारी की रासायनिक संरचना। स्रोत: एमएससी द्वारा संपादित NEUROtiker मारीलासा गिल / LHcheM

ट्राइमेथाइल-सफ़रनिन नामक एक प्रकार है, लेकिन दोनों पदार्थों के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं है।

Safranin एक मोनोक्रोमैटिक डाई है और रासायनिक सूत्र की विशेषताओं के आधार पर, एक सकारात्मक रूप से चार्ज किया जाने वाला पदार्थ है। इसलिए, यह नकारात्मक रूप से चार्ज संरचनाओं के लिए एक समानता है। इन संरचनाओं को लाल दाग दिया जाएगा।

यह संपत्ति यूकेरियोटिक और प्रोकैरियोटिक जीवों, दोनों को विभिन्न सेलुलर संरचनाओं को दागने के लिए कई हिस्टोलॉजिकल तकनीकों में प्रयोज्यता प्रदान करती है।

सेफेरिन का उपयोग जीवाणु विज्ञान में नियमित उपयोग के लिए महत्वपूर्ण और प्रसिद्ध तकनीकों में एक विपरीत डाई के रूप में किया जाता है। ये तकनीकें हैं: ग्राम-हकर का दाग, स्फ़ेफ़र फुल्टन का बीजाणु के लिए दाग या बैक्टीरिया के कैप्सूल का दाग, इनमें से अन्य।

विशेषताएँ

केसर का रंग (क्रोकस सैटिवस फूल के कलंक से प्राप्त एक मसाला) इस डाई को नाम देने की प्रेरणा थी। केसर शब्द से सफ़रनिन का नाम आता है। यह केसर के रंग और इस रंग को प्रदान करने वाले रंग के बीच बड़ी समानता के कारण है।

Safranin क्रिस्टल या पाउडर के रूप में उपलब्ध है, दोनों प्रस्तुतियाँ पानी में घुलनशील हैं। सफारी डाई गंध रहित है। दाग लाल संरचना। संरचनाएं जो सफ़रिन डाई को आकर्षित करती हैं, उन्हें सफ़रनोफिल्स कहा जाता है।

संरचनात्मक रूप से सफ़ारीन जटिल है, इसमें सिरों पर दो बेन्जोनॉइड रिंग होते हैं और केंद्र में दो क्विनोइड रिंग स्थित होते हैं जहाँ N ⁺ cation पाया जाता है । संरचना का केंद्र रंग प्रदान करने के लिए सिस्टम प्रभारी है। इस विशेषता के कारण, इस रंगकर्मी को श्रेणी II में वर्गीकृत किया गया है।

उपयोग

Safranin का उपयोग विभिन्न संरचनाओं को दागने के लिए किया जाता है। विशेष रूप से गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट में मौजूद कुलचिट्स्की कोशिकाओं पर प्रकाश डाला जाता है, जिसे एंटरोक्रोमफिन सेल भी कहा जाता है।

यह रिकेट्सियासिया परिवार से संबंधित सूक्ष्मजीवों को धुंधला करने में सक्षम है। इसी तरह, यह विभिन्न तकनीकों में उपयोग किया जाता है, जैसे कि कोस्टर विधि, एक संशोधित जीनस ब्रुसेला के बैक्टीरिया को दागने के लिए उपयोग किया जाता है।

दूसरी ओर, स्फेफ्रिन फुल्टन स्पोर धुंधला तकनीक और ग्राम-हकर धुंधला में सफारी का उपयोग किया जाता है। दोनों तकनीकों में, सफारी एक विपरीत डाई के रूप में काम करता है।

पहले में, बीजाणु मैलाकाइट हरे का रंग लेते हैं और बाकी संरचनाएं सफारी द्वारा लाल होती हैं। दूसरे में, ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया मलिनकिरण कदम में वायलेट क्रिस्टल का रंग खो देते हैं, इसलिए सफारी वह है जो ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया को लाल कर देता है।

इसके अतिरिक्त, ब्रायनैला एगर मीडिया को 1: 5000 तक कमजोर पड़ने के साथ तैयार करने के लिए बैक्टीरियोलॉजी में सफारी का उपयोग किया जाता है। यह माध्यम ब्रुसेला सूइस प्रजातियों को बाकी प्रजातियों से अलग करने का काम करता है। ब्रूसेला मेलिटेंसिस और ब्रूसेला एबोर्टस इस माध्यम पर बढ़ते हैं लेकिन बी। सुइस हिचकते हैं।

कृषि उद्योग क्षेत्र में, सफारी का उपयोग 2.25% पर किया गया है और गन्ने के पौधे से स्टेम नमूनों को दागने के लिए 1:10 पतला किया है।

यह पौधा आमतौर पर बैक्टीरिया लिफ्सनिया जाइली सबस्प से प्रभावित होता है। xyli, जो पौधे के जाइलम को नुकसान पहुंचाता है। दाग वाले तनों का मूल्यांकन जाइलम वाहिकाओं के कार्य को निर्धारित करने के लिए किया जाता है।

जीवाणु विज्ञान के क्षेत्र में तकनीक

आर स्टेनिंग के लिए कास्टेनेडा दाग

एक रक्त या ऊतक स्मीयर को बफर समाधान (फॉस्फेट बफर पीएच 7.6) में रखा गया है। अनायास सूखने की अनुमति दें और फिर मेथिलीन नीले रंग के साथ 3 मिनट के लिए कवर करें और सफारी के साथ काउंटरस्टैन करें। रिकेट्सिया लाल रंग की पृष्ठभूमि के साथ नीले रंग के विपरीत हैं।

Koster दाग के लिए संशोधित

एक धब्बा बनाया जाता है और फिक्सेशन के लिए लाइटर में प्रवाहित किया जाता है। इसके बाद, यह 1 मिनट के लिए 1 मोल / एल KOH समाधान के 3 भागों के साथ संतृप्त जलीय सफारी के 2 भागों के मिश्रण के साथ कवर किया गया है। आसुत जल से धोया जाता है और 1% कार्बोलिक मैथिलीन नीला होता है।

यदि नमूने में ब्रूसेला जीनस के बैक्टीरिया होते हैं, तो वे नीले रंग की पृष्ठभूमि पर नारंगी दिखाई देंगे।

बैक्टीरियल कैप्सूल धुंधला हो जाना

बैक्टीरियल सस्पेंशन का मिश्रण भारत की स्याही से बनाया जाता है और सफ़ारीन मिलाया जाता है। माइक्रोस्कोप के तहत, काली पृष्ठभूमि के साथ प्रत्येक जीवाणु कैप्सूल के चारों ओर एक लाल रंग का प्रभामंडल दिखाई देगा।

धुंधला हो जाना

एक फैलाव बैक्टीरिया के निलंबन के साथ किया जाता है। फिर इसे गर्म करना तय है। यह 5% मैलाकाइट ग्रीन के साथ कवर किया जाता है, वाष्प के उत्सर्जन तक अक्सर ज्वलंत होता है। 6-10 मिनट के लिए प्रक्रिया को दोहराया जाता है। अंत में, इसे पानी से धोया जाता है और 30 सेकंड के लिए 0.5% सफारी के साथ काउंटरस्टैंड किया जाता है। बेसिली दाग ​​लाल और बीजाणु हरा।

ग्राम-हकर का दाग

एक धब्बा बैक्टीरिया के निलंबन के साथ बनाया जाता है और गर्मी में तय किया जाता है। 1 मिनट के लिए क्रिस्टल वायलेट के साथ स्लाइड को कवर करें। फिर लुगोल को 1 मिनट के लिए एक मोर्डेंट घोल के रूप में रखा जाता है। इसके बाद, इसे एसीटोन अल्कोहल के साथ प्रक्षालित किया जाता है और अंत में 30 सेकंड के लिए सफ़रनिन के साथ मुकाबला किया जाता है।

ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया दाग धब्बेदार बैंगनी और ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया लाल।

कुछ प्रयोगशालाओं ने संशोधित ग्राम-कोपेलॉफ़ तकनीक को अपनाने के लिए ग्राम-हकर तकनीक का उपयोग करना बंद कर दिया है। उत्तरार्द्ध में, सफ़रिनिन को मूल फुकसिन द्वारा प्रतिस्थापित किया जाता है। इसका कारण यह है कि सफ़रिनिन कमजोर रूप से लेगियोनेला, कैम्पिलोबैक्टर और ब्रुसेला जेनेरा की प्रजातियों पर दाग लगाते हैं।

हिस्टोलॉजी के क्षेत्र में तकनीक

कुलचिट्स्की सेल धुंधला (एंटरोक्रोमफिन्स)

जठरांत्र संबंधी मार्ग से ऊतक वर्गों को चांदी क्लोराइड के साथ दाग दिया जाता है। फिर इसे सोडियम थायोसल्फेट के साथ विघटित किया जाता है और अंत में सफ़रिन से उलट दिया जाता है।

कुलचिट्स्की कोशिकाएं काले-भूरे दानों की उपस्थिति से प्रतिष्ठित होती हैं।

ऑस्टियोआर्थराइटिस का दाग

क्योंकि सफ़रनाइन का एक सकारात्मक चार्ज है, यह ग्लाइकोसामिनोग्लाइकेन्स के कार्बोक्सिल और सल्फेट समूहों को बहुत अच्छी तरह से बांधता है। ये प्रोटीओग्लिएकन्स का हिस्सा हैं जो आर्टिकुलर कार्टिलेज बनाते हैं। इस अर्थ में, जब सफारी ओ के साथ धुंधला हो जाता है, तो यह पहचानना संभव है कि उपास्थि का नुकसान हुआ है या नहीं।

कार्टिलाजिनस ऊतक के नुकसान को मैनकिन स्केल का उपयोग करके मापा जा सकता है या ऑस्टियोआर्थराइटिस स्केल भी कहा जा सकता है।

तकनीक को नीचे समझाया गया है: हिस्टोलॉजिकल सेक्शन को वीगर्ट के लोहे के हेमटॉक्सिलिन समाधान के साथ एक ट्रे में डुबोया जाता है, फिर एसिड अल्कोहल से गुजरता है और पानी से धोया जाता है।

तेजी से हरे रंग में शीट को डुबो कर रंग प्रक्रिया जारी रखें, इसे एसिटिक एसिड से धोया जाता है और अब इसे सफारी ओ में विसर्जित कर दिया जाता है। इस प्रक्रिया को पूरा करने के लिए आरोही क्रम में विभिन्न सांद्रता में अल्कोहल का उपयोग कर इसे निर्जलित किया जाता है। अंतिम चरण के नमूने को स्पष्ट करने के लिए xylene या xylene की आवश्यकता होती है।

स्लाइड्स को माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जा सकता है।

इस तकनीक के साथ, नाभिक पर काले, हड्डी के हरे और उपास्थि होते हैं, जहां प्रोटिओग्लीकेन्स लाल पाए जाते हैं।

मैक्रोलेगा की पहचान के लिए दाग

2003 में पेरेज़ एट अल ने मैक्रोलेगा को डाई करने के लिए एक सरल और सस्ती तकनीक का प्रस्ताव दिया। नमूने पैराफिन हिस्टोलॉजिकल अनुभागों में तैयार किए जाते हैं। वर्गों को 1% ग्लिसरीन के साथ तय किया गया है, जिससे उन्हें पूरी तरह से सूखने की अनुमति मिलती है। फिर इसे पैराफिन को निकालने के लिए ज़ाइलोल में रखा जाता है।

खंड को प्रत्येक में 2 मिनट के लिए एकाग्रता (अवरोही क्रम) के विभिन्न डिग्री में इथेनॉल युक्त ट्रे की एक श्रृंखला के माध्यम से पारित करके पुनर्जन्म किया जाता है।

इसके बाद, यह 5% के लिए 3: 1% 1 के साथ 1% सफ़रिन का मिश्रण होता है, जिसमें 1% टोलिडीन नीला होता है, दोनों 50% इथेनॉल के साथ तैयार होते हैं। पिकरिक एसिड की तीन बूंदें मिश्रण में डाली जाती हैं, जो मॉर्डन का काम करती हैं।

फिर इसे अल्कोहल ट्रे के माध्यम से फिर से निर्जलित किया जाता है, लेकिन इस बार आरोही तरीके से। अंत में, यह xylol के साथ rinsed है और नमूना को देखने के लिए कनाडा के बालसम के साथ तैयार किया जाता है।

विषाक्तता

सौभाग्य से, सफारी एक डाई है जो इसे संभालने वालों के लिए खतरे का प्रतिनिधित्व नहीं करता है। यह एक हानिरहित colorant है, यह कार्सिनोजेनिक नहीं है और यह ज्वलनशील नहीं है।

त्वचा या म्यूकोसा के साथ सीधे संपर्क क्षेत्र में मामूली जटिलताओं का कारण बन सकता है, बड़ी जटिलताओं के बिना। इसके लिए, प्रभावित क्षेत्र को बहुत सारे पानी से धोने की सिफारिश की जाती है।

संदर्भ

1. गार्सिया एच। Colorante safranina O. तकनीशियन स्वास्थ्य में, 2012; 1 (2): 83-85। पर उपलब्ध: medigraphic.com
2. गिल एम। ग्राम दाग: नींव, सामग्री, तकनीक और उपयोग। 2019। उपलब्ध नहीं है: lifeder.com
3. गिल एम। बीजाणु धुंधला: औचित्य, तकनीक और उपयोग। 2019। उपलब्ध नहीं है: lifeder.com
4. सफ्रिना। " विकिपीडिया, एक निशुल्क विश्वकोश। 7 मार्च 2017, 10:39 यूटीसी। 3 अगस्त 2019, 20:49 en.wikipedia.org
5. पेरेज़-कोरटेज़ एस, वेरा बी, सानचेज़ सी। ग्रेसीलिरोपिस टेन्यूफ्रोन और ग्रेसिलिरिया चिलेंसिस (रोडोफाइटा) की संरचनात्मक व्याख्या में उपयोगी धुंधला तकनीक। एक्ट बॉट। Venez। 2003; 26 (2): 237-244। पर उपलब्ध: scielo.org।
6. एलीका चर्च, पेराल्टा एस्तेर लीलिया, अल्वारेज़ एल्बा, मिल्लिन जे, माटोस मडयू। जाइलम वाहिकाओं की कार्यक्षमता और लिफ़्सनिया ज़ाइली उप-प्रजाति की उपस्थिति का संबंध। xyli। रेव्ह वेज प्रोटेक्शन। 2007; 22 (1): 65-65। पर उपलब्ध: scielo.sld