कैप्सूल धुंधला: औचित्य और तकनीक - जीवविज्ञान - 2025

धुंधला कैप्सूल एक अंतर धुंधला तकनीक है जो कुछ बैक्टीरिया और खमीर कैप्सूल बुलाया आसपास के तनाव polysaccharide संरचना की संपत्ति है। इसका उपयोग नैदानिक ​​प्रयोगशालाओं में कैप्सूलेटेड सूक्ष्मजीवों के कारण होने वाले कुछ विकृति के निदान में मदद करने के लिए किया जाता है।

इसका उपयोग स्वास्थ्य विज्ञान के छात्रों के लिए इस रूपात्मक संरचना के प्रदर्शन के लिए प्रयोगशालाओं को पढ़ाने में भी किया जाता है, जैसे कि: चिकित्सा, बायोएनालिसिस, नर्सिंग, या साइटोटेक्नोलॉजी, अन्य।

क्लेबसिएला न्यूमोनिया धब्बा कैप्सूल दाग के साथ। सफारी के साथ भारतीय स्याही विधि। स्रोत: А.А.В

सूक्ष्मजीवों में कैप्सूल की उपस्थिति को प्रदर्शित करने के लिए कई सरल तकनीकें हैं जो इसके अधिकारी हैं, ये हैं: नकारात्मक दाग, एंथोनी दाग ​​और एक प्रकार जो पिछले दो को जोड़ता है।

खमीर Cryptococcus neoformans की उपस्थिति पर संदेह होने पर मुख्य रूप से CSF नमूनों में नकारात्मक धुंधला का उपयोग किया जाता है। यह खमीर मेनिन्जाइटिस का एक आम कारण है।

यह तकनीक निग्रोसिन या भारत स्याही का उपयोग करती है और यह तैयारी की पृष्ठभूमि और सूक्ष्मजीव के अभेद्य कैप्सूल के बीच एक विपरीत बनाने पर आधारित है। पृष्ठभूमि गहरा हो जाता है और कैप्सूल रंगहीन होता है। इस तरह, यह संरचना सामने आई है।

एंथोनी तकनीक के बारे में, यह कहा जा सकता है कि इसका उपयोग ज्यादातर प्रयोगशालाओं में क्लेबसिएला निमोनिया, स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया और नेसेरिया मेनिटिडिडिस जैसे बैक्टीरिया में पॉलीसैकराइड संरचना को प्रदर्शित करने के लिए शिक्षण प्रयोगशालाओं में किया जाता है।

नैदानिक ​​उद्देश्यों के लिए इस तकनीक का उपयोग बहुत दुर्लभ है, क्योंकि अन्य नियमित परीक्षण हैं जो इन सूक्ष्मजीवों की पहचान करने की अनुमति देते हैं।

आधार

कैप्सूल एक पॉलीसैकराइड प्रकृति की एक मजबूत संरचना है। यह फागोसाइटोसिस से सूक्ष्मजीवों की रक्षा करता है, और इसलिए घुसना एक कठिन संरचना है।

यही कारण है कि कैप्सूल दाग विपरीत पर आधारित हैं। रंगकर्मी तैयारी के निचले हिस्से को दाग देते हैं जबकि कैप्सूल रंगहीन रहता है।

इसलिए, इन तकनीकों के साथ कैप्सूल आसानी से पहचानने योग्य है। यदि सूक्ष्मजीव में कैप्सूल नहीं है, तो यह इस तरह के रंग के साथ अलग नहीं होगा, क्योंकि सब कुछ एक ही रंग से दाग होगा।

कैप्सूल को रंगने के लिए उपयोग की जाने वाली सभी तकनीकों में अलग-अलग रंगों और प्रक्रियाओं का उपयोग करने के बावजूद एक ही तर्क है।

तकनीक बराबर

-अंथनी का दाग

एंथनी का दाग क्रिस्टल वायलेट को दाग के रूप में इस्तेमाल करता है। इससे बैक्टीरिया का शरीर और पृष्ठभूमि बैंगनी हो जाएगा।

दूसरी ओर, 20% कॉपर सल्फेट का उपयोग किया जाता है। यह एक धोने के समाधान के रूप में कार्य करता है, अर्थात्, यह तैयारी से अतिरिक्त वायलेट क्रिस्टल को निकालता है, जिससे कैप्सूल स्पष्ट हो जाते हैं लेकिन बैक्टीरिया के शरीर या पृष्ठभूमि के बिना रंग खो देते हैं।

सामग्री

- इंद्रधनुषी दूध।

- फिसल पट्टी।

- 1% वायलेट क्रिस्टल।

- 20% कॉपर सल्फेट।

- ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप।

- विसर्जन तेल।

प्रक्रिया

इस तकनीक में निम्न शामिल हैं:

1. 36 घंटे के लिए इंद्रधनुषी दूध में सूक्ष्मजीव की खेती करें।
2. एक स्लाइड के अंत में संस्कृति की एक बूंद रखें और उसके बगल में, वायलेट ग्लास की एक बूंद रखें, मिलाएं और दूसरी स्लाइड के अंत के साथ फैलाएं।
3. हवा सूखी और गर्मी में सेट न करें।
4. 20% कॉपर सल्फेट घोल से धोएं, हवा को सूखने दें।
5. विसर्जन उद्देश्य के साथ एक माइक्रोस्कोप के नीचे देखें। प्रसार के सिरों की ओर खोजें।

यह महत्वपूर्ण है कि गर्मी का उपयोग न तो ठीक करने के लिए करें और न ही सूखने के लिए, क्योंकि यह कैप्सूल को नुकसान पहुंचाता है। इसके अलावा पानी से न धोएं।

व्याख्या

इंद्रधनुषी दूध एक उत्कृष्ट संस्कृति माध्यम है क्योंकि यह एक प्रमुख कैप्सूल विकसित करने के लिए सूक्ष्मजीव के लिए आवश्यक पोषक तत्व प्रदान करता है।

दूसरी ओर, इंद्रधनुषी दूध एक गाढ़ा और कॉम्पैक्ट तल बनाएगा जो बैक्टीरिया के शरीर के साथ बैंगनी रंग का होगा, लेकिन सूक्ष्मजीव को घेरने वाला कैप्सूल बेरंग रहेगा। इसलिए, जीवाणु शरीर के चारों ओर एक स्पष्ट प्रभामंडल देखा जाता है।

एंथोनी के दाग के साथ दागे गए क्लेबसिएला निमोनिया के सूक्ष्म अवलोकन पर ग्राफिक प्रतिनिधित्व। स्रोत: लेखक द्वारा निर्मित एमएससी। मारिएला गिल।

फायदा

यह प्रदर्शन करने के लिए एक सरल तकनीक है। फिक्सिंग की आवश्यकता नहीं है।

इसके अलावा, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि अन्य संस्कृति मीडिया का उपयोग किया जा सकता है, लेकिन दूध माध्यम को पसंद किया जाता है क्योंकि इसमें अधिक प्रमुख कैप्सूल प्रदान करने का लाभ है।

नुकसान

यह नकारात्मक धुंधला होने की तुलना में थोड़ा अधिक श्रम गहन तकनीक है, और इसके दृश्य के लिए पूरी तरह से सूखने की तैयारी की प्रतीक्षा करने की आवश्यकता होती है।

-Negative धुंधला हो जाना

सामग्री

- स्लाइड स्लाइड

- सूक्ष्मजीव के साथ संस्कृति का माध्यम।

- चीनी स्याही या निग्रोसिन।

- ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप।

- शारीरिक खारा समाधान।

प्रक्रिया

Coverslip पर शारीरिक खारा की एक बूंद रखें और माइक्रोबियल संस्कृति का एक छोटा सा हिस्सा भंग। यह महत्वपूर्ण है कि तैयारी बहुत मोटी नहीं है। फिर चीनी स्याही या निग्रोसिन और मिश्रण की एक बूंद रखें।

एक आवरण शीट को तब तरल के अतिप्रवाह के बिना तैयारी पर रखा जाता है। यह माइक्रोस्कोप के तहत पहले 10X उद्देश्य पर ध्यान केंद्रित करके और फिर 40X में जाकर देखा जाता है।

इस तकनीक का उपयोग सीधे CSF नमूनों पर भी किया जा सकता है। यही है, माइक्रोबियल संस्कृति की एक बूंद रखने के बजाय, सीएसएफ की एक बूंद रखी जाती है।

फायदा

यह प्रदर्शन करने के लिए एक सरल विधि है और एक ही समय में सस्ती है। इसे तैयारी को ठीक करने या सुखाने की आवश्यकता नहीं है।

नुकसान

नुकसान यह है कि यह तैयारी सूखने से पहले एक माइक्रोस्कोप के तहत मनाया जाना चाहिए, क्योंकि अगर ऐसा होता है तो सूक्ष्मजीव अनुबंध करेंगे, जो दृश्य को मुश्किल बना देगा।

दूसरी ओर, गलत सकारात्मक हो सकता है यदि विश्लेषक अनुभवहीन है, क्योंकि ल्यूकोसाइट्स अक्सर खमीर के साथ भ्रमित होते हैं।

चीनी स्याही या निग्रोसिन तकनीक के साथ खमीर कैप्सूल के अवलोकन को क्रिप्टोकोकस नवोफॉर्मन्स के एक पूर्व निदान निदान के रूप में माना जाना चाहिए जब तक कि यह संस्कृति के साथ प्रदर्शित न हो।

ऐसा इसलिए है क्योंकि अन्य यीस्ट हैं जो मेनिन्जाइटिस का कारण हो सकते हैं और क्रिप्टोकोकस नियोफोर्मंस ही नहीं, जैसे कि जीनस कैंडिडा और रोडोडोटुला, साथ ही क्रिप्टोकोकस की अन्य प्रजातियां।

व्याख्या

यदि कैप्सूलेटेड सूक्ष्मजीव होते हैं, तो एक अंधेरे पृष्ठभूमि दिखाई देगी, जिसमें तरल में तैरते पारदर्शी शरीर होते हैं, जो कैप्सूल की उपस्थिति को उजागर करते हैं।

Cryptococcus neoformans कैप्सूल चीनी स्याही से सना हुआ। स्रोत: फोटो क्रेडिट: सामग्री प्रदाता (ओं): सीडीसी / डॉ। लीनोर गली

-भारतीय स्याही तकनीक

इस तकनीक को निग्रोसिन के साथ भी किया जा सकता है। यह पहले बताई गई तकनीकों का एक संयोजन है। इस तकनीक में क्रिस्टल वायलेट और भारतीय स्याही या निग्रोसिन का उपयोग किया जाता है।

बैक्टीरियल शरीर क्रिस्टल वायलेट से बैंगनी हो जाता है क्योंकि यह नकारात्मक रूप से चार्ज किया जाता है, जबकि निग्रोसिन स्मीयर के नीचे रंग देता है। यदि बैक्टीरिया में एक कैप्सूल है, तो यह सूक्ष्मजीव के आसपास एक पारदर्शी प्रभामंडल के रूप में दिखाई देगा।

क्रिस्टल वायलेट को इनमें से किसी भी रंग से बदला जा सकता है: सफ़ारीन, बेसिक फ़्यूचिन या मिथाइलीन नीला।

सामग्री

- वायलेट ग्लास।

- निग्रोसिन या भारतीय स्याही।

- स्लाइड स्लाइड

- माइक्रोस्कोप।

प्रक्रिया

- एक संस्कृति माध्यम में सूक्ष्मजीव की खेती।

- एक स्लाइड के अंत में संस्कृति की एक बूंद रखें और उसके बगल में, भारतीय स्याही या निग्रोसिन क्रिस्टल की एक बूंद रखें, मिलाएं और दूसरी स्लाइड के अंत के साथ फैलाएं।

- हवा सूखी और गर्मी को ठीक न करें।

- 1 मिनट के लिए एक वायलेट क्रिस्टल समाधान के साथ कवर करें, आसुत जल से धोएं लेकिन बहुत नाजुक (नरम जेट), इसे खुली हवा में सूखने दें।

- विसर्जन उद्देश्य के साथ माइक्रोस्कोप के नीचे देखें। प्रसार के सिरों की ओर खोजें।

व्याख्या

एक बैंगनी जीवाणु शरीर और एक अंधेरे पृष्ठभूमि को देखा जाएगा। कैप्सूल, यदि मौजूद है, तो बैक्टीरिया के आसपास बेरंग दिखाई देगा।

संदर्भ

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