चमकीला हरा अगर: औचित्य, तैयारी और उपयोग - जीवविज्ञान - 2025

शानदार हरी अगर चयनात्मकता के उच्च स्तर के साथ एक ठोस संस्कृति माध्यम है। यह विशेष रूप से जीनस साल्मोनेला के उपभेदों के अलगाव के लिए उपयोग किया जाता है, हालांकि कुछ अपवाद भी हैं, जैसे कि टाइफी और पैराटाइफी प्रजातियां जो इस माध्यम पर नहीं बढ़ती हैं।

जीनस साल्मोनेला की खोज मल, पानी या खाद्य नमूनों में अक्सर होती है। इस अर्थ में, यह माध्यम बहुत उपयोगी हो सकता है। इस आगर को 1925 में क्रिस्टेंसन, लेस्टर और जर्गेंस द्वारा बनाया गया था, बाद में इसे कॉफ़मैन द्वारा संशोधित किया गया था।

चमकीला हरा अगर। किण्वन और गैर-किण्वन कालोनियों क्रमशः। स्रोत: एमजे रिचर्डसन / अदृश्य संसारों की प्रदर्शनी - 2012geograph.org.uk/photo/2815842 क्रिएटिव कॉमन्स लाइसेंस।

यह जानवरों के ऊतकों के पेप्टिक पाचन और कैसिइन के अग्नाशयी पाचन से प्लुरिप्टोन से बना है, इसमें खमीर निकालने, सोडियम क्लोराइड, लैक्टोज, सूक्रोज, फिनोल लाल, चमकदार हरे और अगर-अग्र भी शामिल हैं।

यह ज्यादातर बैक्टीरिया के लिए एक अमानवीय वातावरण होने की विशेषता है, साल्मोनेला के विकास के पक्ष में है, हालांकि कुछ कोलीफॉर्म इसमें कमजोर पड़ने में सक्षम हैं।

यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि शिगेला जीनस इस माध्यम पर नहीं बढ़ता है, और न ही साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम, न ही साल्मोनेला पैराटीफी। इसलिए, यदि आप इन सूक्ष्मजीवों को अलग करना चाहते हैं, तो अन्य मीडिया का उपयोग किया जाना चाहिए, जैसे कि एक्सएलडी अगर, दूसरों के बीच।

आधार

चमकीला हरा अगर

माध्यम बनाने वाले प्रत्येक घटक एक विशिष्ट कार्य को पूरा करते हैं जो अगर की विशेषताओं और गुणों को निर्धारित करता है।

प्लुरपेप्टोन्स और यीस्ट एक्सट्रैक्ट उन पोषक तत्वों का स्रोत हैं जिनसे सूक्ष्मजीव अपने विकास के लिए आवश्यक नाइट्रोजन और खनिज लेते हैं। लैक्टोज और सुक्रोज सूक्ष्मजीवों के लिए ऊर्जा के स्रोत हैं जो उन्हें किण्वित करने में सक्षम हैं।

ब्राइट ग्रीन एक निरोधात्मक पदार्थ है जो ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास और ग्राम नकारात्मक सूक्ष्मजीवों की एक बड़ी संख्या को रोकता है।

सोडियम क्लोराइड माध्यम को आसमाटिक स्थिरता प्रदान करता है। जबकि फिनोल लाल पीएच संकेतक है, यह कार्बोहाइड्रेट किण्वन से एसिड उत्पादन का पता लगाने पर रंग बदल जाता है।

लैक्टोज और सुक्रोज की गैर-किण्वन कालोनियां इस माध्यम पर एक गुलाबी या पारदर्शी सफेद रंग में, एक लाल पृष्ठभूमि पर बढ़ती हैं। उदाहरण के लिए, जीनस साल्मोनेला के बैक्टीरिया।

जबकि इस माध्यम पर बढ़ने में सक्षम लैक्टोज या सुक्रोज किण्वन जीवाणु हरे-पीले रंग की पृष्ठभूमि पर पीले-हरे या पीले-हरे रंग की कॉलोनियों का विकास करते हैं। उदाहरण के लिए, एस्चेरिचिया कोलाई और क्लेबसिएला निमोनिया।

चमकीला हरा अगर (बीजीए) वेरिएंट

चमकीले हरे अगर के अन्य रूप हैं; नोवोबोसिन ब्रिलियंट ग्रीन ग्लूकोज (एनबीजी) आगर और नोवोबोसिन ब्रिलियंट ग्रीन ग्लिसरॉल लैक्टोज (एनबीजीएल) आगर।

नोवोबोसिन ब्राइट ग्रीन ग्लूकोज आगर

इसमें ट्राइप्टिसेज़ सो एगर, फेरिक अमोनियम साइट्रेट, सोडियम थायोसल्फेट पेंटाहाइड्रेट, फिनोल रेड, ग्लूकोज, ब्राइट ग्रीन, नोवोबोसिन और डिस्टिल्ड वॉटर शामिल हैं।

इसका उपयोग मल के नमूनों से साल्मोनेला कालोनियों के अलगाव के लिए किया जाता है।

इस मामले में, चमकीले हरे और नवोबोसिन निरोधात्मक पदार्थ हैं जो ग्राम सकारात्मक बैक्टीरिया और कुछ ग्राम नकारात्मक सूक्ष्मजीवों के विकास को रोकते हैं।

सोडियम थायोसल्फेट सल्फाइड का स्रोत है और फेरिक साइट्रेट लोहे का स्रोत है, दोनों एक काले फेरिक सल्फाइड अवक्षेप के गठन के माध्यम से हाइड्रोजन सल्फाइड उत्पादन को प्रकट करने के लिए आवश्यक है।

ग्लूकोज किण्वित कार्बोहाइड्रेट है और फिनोल लाल पीएच संकेतक है।

इस माध्यम पर, साल्मोनेला कालोनियों का विकास एक काले केंद्र के साथ होता है, जो लाल रंग के प्रभामंडल से घिरा होता है और इसके बाद एक स्पष्ट दृश्य क्षेत्र दिखाई देता है। Citrobacter freundii के कुछ उपभेदों साल्मोनेला के समान कालोनियों का उत्पादन करते हैं।

नोवोबोसीन ब्रिलियंट ग्रीन ग्लिसरॉल लैक्टोज आगर (NBGL)

इस माध्यम में ट्रायप्टिसेज़ सोया अगर, फेरिक अमोनियम साइट्रेट, सोडियम थायोसल्फेट, लैक्टोज, ग्लिसरॉल, चमकीला हरा, नोवोबीसिन और डिस्टिल्ड वॉटर शामिल हैं।

इस माध्यम और पिछले एक के बीच का अंतर यह है कि ग्लूकोज लैक्टोज द्वारा प्रतिस्थापित किया जाता है और ग्लिसरॉल और फिनोल लाल का उपयोग नहीं किया जाता है।

हाइड्रोजन सल्फाइड के उत्पादन के कारण, साल्मोनेला प्रजातियों को अलग करने के लिए भी माध्यम का उपयोग किया जाता है, कालोनियों का विकास काला होता है।

केवल उपनिवेश जो ग्लिसरॉल या लैक्टोज से एसिड का उत्पादन नहीं करते हैं वे पर्याप्त एच ₂ एस उत्पादन प्राप्त करते हैं, क्योंकि कम पीएच एच ₂ एस गठन के साथ हस्तक्षेप करता है । इसके परिणामस्वरूप अधिकांश प्रजातियों के लिए रंगहीन कालोनियों का उत्पादन होता है । प्रोटीन और सिट्रोबैक्टीरिया।

तैयारी

व्यावसायिक रूप से प्राप्त निर्जलित माध्यम का वजन 58 ग्राम है। इसे एक लीटर पुनर्वितरित पानी में जोड़ें। मिक्स करें, कुछ मिनट खड़े रहें, और पूरी तरह से भंग होने तक मिश्रण को गर्मी स्रोत पर रखें।

-15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव, नसबंदी के समय से अधिक न हो।

इसे आराम करें और बाँझ पेट्री डिश में गर्म परोसें। अंतिम पीएच 6.9। 0.2 होना चाहिए।

उपयोग करने तक फ्रिज में जमना और स्टोर करें। बोने से पहले प्लेटों को कमरे का तापमान लेना चाहिए।

-पाउडर माध्यम रंग में हरा होता है और तैयार किया गया एक नारंगी-भूरा या लाल-हरा रंग होता है, जो पीएच और वाणिज्यिक कंपनी पर निर्भर करता है। एक बहुत ही भूरे रंग का संकेत है कि अगर गर्म था।

-यदि एगर जम गया है, तो इसे फिर से भरने की सिफारिश नहीं की जाती है, क्योंकि माध्यम बिगड़ जाता है।

उपयोग / अनुप्रयोग

इस माध्यम का उपयोग मल के नमूनों और अन्य खाद्य पदार्थों से जीनस साल्मोनेला के उपभेदों को खोजने के लिए किया जाता है।

क्योंकि यह एक जगह पर अमानवीय वातावरण है, अगर प्रत्यक्ष नमूने का उपयोग किया जाता है, तो प्रचुर मात्रा में इनोकुलम बोना उचित है। अन्यथा, इस माध्यम में बुवाई से पहले नमूनों का संवर्धन और संवर्धन किया जाना चाहिए।

जैसा कि साल्मोनेला के कुछ उपभेदों को बाधित किया जाता है या कठिनाई के साथ बढ़ता है, साल्मोनेला के लिए अन्य चयनात्मक अगर के साथ इस माध्यम का साथ देना उचित है।

एक विशिष्ट साल्मोनेला विशेषता वाली प्रत्येक कॉलोनी को इसकी निश्चित पहचान के लिए जैव रासायनिक परीक्षणों में प्रस्तुत किया जाना चाहिए।

क्यूए

चमकीले हरे अगरर माध्यम के अच्छे प्रदर्शन का परीक्षण करने के लिए, एटीसीसी उपभेदों का उपयोग इस पर उनके विकास का निरीक्षण करने के लिए किया जा सकता है।

गुणवत्ता नियंत्रण के लिए उपयोग किए जाने वाले सबसे लगातार उपभेद हैं: साल्मोनेला एंटरिटिडिस एटीसीसी 13076, साल्मोनेला टायफिम्यूरियम एटीसीसी 14028, प्रोटीज मिराबिलिस एटीसीसी 43071, क्लेबसिएला न्यूमोनिया एटीसीसी 700603, एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, शिगेला फ्लेक्सनेरी एटीसीसी 12022, टीएएफ 12022।

पहले 3 को लाल रंग की पृष्ठभूमि पर गुलाबी या पारदर्शी सफेद रंग की उपनिवेश देना चाहिए। अच्छे विकास के साथ साल्मोनेला और छोटे या नियमित विकास के साथ प्रोटीन।

क्लेबसिएला और एस्चेरिचिया के लिए, पीले रंग की पृष्ठभूमि वाली पीले-हरे रंग की कालोनियों की उम्मीद की जाती है और शिगेला और स्टैफिलोकोकस के मामले में उन्हें बाधित किया जाना चाहिए।

निर्जलित माध्यम को कमरे के तापमान पर, एक सूखी जगह में संग्रहित किया जाना चाहिए, क्योंकि मध्यम बहुत हीड्रोस्कोपिक है।

संदर्भ

1. लेबरटोरियो डिफेंको फ्रांसिस्को सोरिया मेलगुइज़ो एसए ब्रिलियंट ग्रीन एगर। 2009
2. ब्रिटानिया प्रयोगशाला। ब्राइट ग्रीन आगर। 2015।
3. बीडी प्रयोगशाला। बीडी ब्रिलियंट ग्रीन आगर। 2013।
4. कोनमैन ई, एलन एस, जैंडा डब्ल्यू, श्रेकेनबर्गर पी, विन्न डब्ल्यू (2004)। माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोसिस। (5 वां संस्करण)। अर्जेंटीना, संपादकीय पानामेरिकाना एसए
5. फोर्ब्स बी, साहम डी, वीसफेल्ड ए। 2009. बेली एंड स्कॉट माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोसिस। 12 एड। अर्जेंटीना। संपादकीय पानामेरिकाना एसए