मध्यम सिम: नींव, तैयारी और उपयोग - जीवविज्ञान - 2025

सिम मध्यम एक semisolid और अंतर अगर, विशेष रूप से Enterobacteriaceae कुछ बैक्टीरिया की पहचान, विशेष रूप से मदद करने के लिए बनाया है। यह ट्रिप्टीन, पेप्टोन, आयरन सल्फेट, अमोनियम सल्फेट, सोडियम थायोसल्फेट और अगर से बना है।

यह माध्यम तीन महत्वपूर्ण परीक्षणों के निष्पादन की अनुमति देता है: हाइड्रोजन सल्फाइड (एच ₂ एस) का उत्पादन, इण्डोल और गतिशीलता का गठन, इसलिए संक्षिप्त सिम। इसकी महान उपयोगिता के कारण, यह एक जीवाणु विज्ञान प्रयोगशाला में अनुपस्थित नहीं हो सकता है।

A. वाणिज्यिक सिम माध्यम B. सिम H2S (-), इंडोल (-) और मोटिलिटी (+) टेस्ट और सिम H2S (+), इंडोल (-), मोटेलिटी (+) टेस्ट। स्रोत: लेखक एमएससी द्वारा ली गई तस्वीर। मारिएलासा गिल बी। मोगलोयजा

अन्य मीडिया के विपरीत, कुछ बैक्टीरिया की संचलन क्षमता का पता लगाने के लिए यह अर्ध-ठोस होना चाहिए। इस अर्थ में, यह परीक्षण एंटरोबैक्टीरिया के लिए बहुत अच्छी तरह से काम करता है, लेकिन गैर-किण्वन ग्राम-नकारात्मक छड़ में नहीं, जहां अन्य तरीकों को प्राथमिकता दी जाती है, जैसे कि लटकती हुई बूंद।

सिम माध्यम कुछ विशिष्ट गुणों को अलग करने की अनुमति देता है जो दूसरों के संबंध में कुछ बैक्टीरिया की विशेषता रखते हैं। उदाहरण के लिए, एस्चेरिचिया कोलाई एच ₂ एस (-), इंडोल (+) और गतिशीलता (+) होने से प्रतिष्ठित है, जबकि प्रोटीज मिराबिलिस एच ₂ एस (+), इंडोल (-), गतिशीलता (+) है।

आधार

यह एक संस्कृति माध्यम है जिसे विभेदक माना जाता है, क्योंकि इसका उपयोग उन सूक्ष्मजीवों के बीच अंतर करता है जो उन लोगों से हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन करने में सक्षम हैं जो ऐसा नहीं करते हैं; यह उन लोगों पर भी प्रकाश डालता है, जो ट्रिप्टोफैन से इंडोल बनाते हैं, जो नहीं करते हैं और अंत में मोटर से मोटाइल बैक्टीरिया को अलग करते हैं।

शक्ति का स्रोत

किसी भी संस्कृति माध्यम की तरह, इसमें ऐसे तत्व होते हैं जो आवश्यक पोषक तत्व प्रदान करते हैं ताकि गैर-मांग वाले सूक्ष्मजीव विकसित हो सकें। इन तत्वों को पेप्टोन और ट्रिप्टीन द्वारा दर्शाया जाता है।

इस माध्यम का मूल्यांकन करने वाली विशेषताओं की उपस्थिति या अनुपस्थिति का निरीक्षण करने में सक्षम होने के लिए माध्यम में सूक्ष्मजीव का विकास आवश्यक है।

हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन

एग्रीमेंट सिम का अक्षर S हाइड्रोजन सल्फाइड (H ₂ S) के उत्पादन को संदर्भित करता है । हाइड्रोजन सल्फाइड बनाने में सक्षम बैक्टीरिया सोडियम थायोसल्फेट से सल्फर लेगा।

एक बार H ₂ S -colourless gas- बनने के बाद, यह माध्यम में मौजूद लौह नमक के साथ प्रतिक्रिया करता है, जिससे फेरस सल्फाइड बनता है, जो स्पष्ट रूप से दिखाई देता है (काला अवक्षेप)। बैक्टीरिया जो एच ₂ एस नहीं बनाते हैं, मूल रंग (बेज) के माध्यम को छोड़ दें।

काले अवक्षेप की उपस्थिति गतिशीलता की व्याख्या में बाधा डाल सकती है। हालांकि, अधिकांश एच ₂ एस- उत्पादन एंटरोबैक्टीरिया को साल्मोनेला, प्रोटीन और सिट्रोबैक्टीरिया जैसे सकारात्मक रूप से प्रेरित माना जाता है। इसके अलावा, काला अवक्षेप जो लगभग पूरे माध्यम को कवर करता है, सकारात्मक गतिशीलता का सुझाव देता है।

इंडोल गठन

संक्षिप्त सिम का दूसरा अक्षर "I" है, जो इंडोल के गठन का प्रतिनिधित्व करता है।

इस अर्थ में, ट्रिप्टिन, पोषक तत्व का स्रोत होने के अलावा, एक और मौलिक कार्य को पूरा करता है। यह पेप्टोन ट्रिप्टोफैन नामक एक एमिनो एसिड में समृद्ध है, इसलिए, यह बैक्टीरिया को दिखा सकता है जो ट्रिप्टोफैन का उत्पादन करते हैं।

यह एंजाइम अमीनो एसिड ट्रिप्टोफैन को साफ करने के लिए जिम्मेदार है, जिसके परिणामस्वरूप इंडोल (रंगहीन पदार्थ), पाइरुविक एसिड और अमोनियम का निर्माण होता है।

इसीलिए, इस प्रतिक्रिया को दर्शाने के लिए, एक खुलासा पदार्थ (एरलिच के अभिकर्मक या कोवैक के अभिकर्मक) को जोड़ना आवश्यक है। या तो इण्डोल के साथ प्रतिक्रिया करता है, अगर की सतह पर लाल-फुचिया रिंग के आकार का पदार्थ बनाता है। यदि फ्यूशिया रिंग दिखाई देती है, तो इंडोल टेस्ट को सकारात्मक रूप में व्याख्यायित किया जाता है।

बैक्टीरिया जो इस एंजाइम के अधिकारी नहीं हैं, वे अंगूठी नहीं बनाएंगे और इसे एक नकारात्मक इण्डोल परीक्षण के रूप में व्याख्या किया गया है।

यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि इंडोल टेस्ट की व्याख्या अंतिम होनी चाहिए, क्योंकि एक बार अभिकर्मक जोड़ने के बाद, माध्यम बादल बन जाता है, जिससे गतिशीलता की कल्पना करना मुश्किल हो जाता है।

गतिशीलता

अंत में सिम शब्द के अक्षर "M" का अर्थ है गतिशीलता। गतिशीलता का मूल्यांकन करने के लिए, यह माध्यम रणनीतिक रूप से अर्ध-ठोस है, क्योंकि यह विशेषता यह सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक है कि जीवाणु आंदोलन हो या नहीं। फ्लैगेल्ला के शिकार बैक्टीरिया वे हैं जो इस सकारात्मक परीक्षण को देते हैं।

एक सकारात्मक परीक्षण स्पष्ट होगा जब टर्बिडिटी देखी जाती है, दोनों प्रारंभिक इनोकुलम में, और इसके आसपास। जबकि, नॉनमोटाइल बैक्टीरिया केवल प्रारंभिक इनोकुलम के मार्ग में विकसित होते हैं।

तैयारी

मध्यम सिम

निर्जलित माध्यम का 30 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। मिश्रण को 5 मिनट तक खड़े रहने के लिए छोड़ दिया जाता है और फिर उबलने के लिए गर्म किया जाता है, जब तक पूरी तरह से भंग न हो जाए।

15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर कपास की टोपी और आटोक्लेव के साथ परीक्षण ट्यूबों में मिश्रण को वितरित करें। आटोक्लेव से ट्यूब रैक निकालें और इसे एक ऊर्ध्वाधर स्थिति में जमने दें, ताकि माध्यम एक ब्लॉक के आकार में हो।

इसके संरक्षण के लिए इसे इसके उपयोग तक रेफ्रिजरेटर में रखा जाता है। तैयार माध्यम में 7.3 must 0.2 का अंतिम पीएच होना चाहिए।

माध्यम को टीका लगाने के समय, यह कमरे के तापमान पर होना चाहिए। बीच का रंग बेज है।

कोवाक की अभिकर्मक

150 मिलीलीटर एमाइल या आइसोमाइल या ब्यूटाइल अल्कोहल को मापें। (उल्लिखित तीन में से एक का उपयोग करें)।

पी-डाइमिथाइलिनोबेंज़लडिहाइड के 10 ग्राम को भंग करें। फिर धीरे-धीरे 50 मिलीलीटर सांद्र हाइड्रोक्लोरिक एसिड मिलाएं।

रेडी-टू-यूज़ रिऐजेंट बेरंग या हल्का पीला है। इसे एक एम्बर बोतल में रखा जाना चाहिए और एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाना चाहिए। यदि यह गहरे भूरे रंग का हो जाए तो उपयोग न करें; यह इंगित करता है कि यह क्षतिग्रस्त है। इस अभिकर्मक को पसंद किया जाता है जब यह एंटरोबैक्टीरिया के लिए आता है।

एर्लिच का अभिकर्मक

पी-डाइमिथाइलामिनोबेंज़ाल्डिहाइड के 2 ग्राम का वजन करें और 190 मिलीलीटर पूर्ण एथिल अल्कोहल में भंग करें और 40 मिलीलीटर केंद्रित हाइड्रोक्लोरिक एसिड के साथ धीरे-धीरे मिलाएं। कोवैक की अभिकर्मक उसी तरह से स्टोर करें। अहर्लिच के अभिकर्मक का उपयोग गैर-किण्वन और अवायवीय जीवाणुओं के लिए किया जाता है।

अनुप्रयोग

जीवाणुरोधी प्रयोगशालाओं में सिम माध्यम का अत्यधिक उपयोग किया जाता है। इसका लाभ यह है कि एंटरोबैक्टीरिया की पहचान में एक ही ट्यूब में तीन आवश्यक विशेषताओं को देखा जा सकता है।

बोया

इस माध्यम को बोने का सही तरीका सुई का उपयोग करना है, जिसके साथ अध्ययन किए जाने वाले शुद्ध कॉलोनी के एक हिस्से को मध्यम के केंद्र में लिया और डाला जाता है। एक अकेला लंड प्रदर्शन किया जाना चाहिए। पंचर ट्यूब के नीचे तक नहीं पहुंचना चाहिए, सही बात यह है कि केवल दो तिहाई गहराई को कवर करना है।

इनोकुलम को दोहराने की सिफारिश नहीं की जाती है, क्योंकि इससे सकारात्मक गतिशीलता की झूठी व्याख्या हो सकती है। टीका मध्यम को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एरोबिक रूप से ऊष्मायन किया जाता है।

एक बार समय समाप्त होने के बाद, यह देखा जाता है कि एच ₂ एस का उत्पादन किया गया था या नहीं और गतिशीलता पढ़ी जाती है या नहीं । अंत में इंडोल का पता चला है, एर्लिच या कोवाक के अभिकर्मक की 3 से 4 बूंदों को मिलाकर, धीरे से मिलाएं और व्याख्या करें।

स्रोत: कोनमैन ई, एलन एस, जैंडा डब्ल्यू, श्रेकेनबर्गर पी, विन्न डब्ल्यू (2004)। माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोसिस। 5 वां संस्करण। संपादकीय पानामेरिकाना एसए अर्जेंटीना।

क्यूए

बाँझपन नियंत्रण के रूप में, एक या दो ट्यूबों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एक ओवन में बिना टीकाकरण के ऊष्मायन किया जाता है। यह उम्मीद की जाती है कि इस समय के बाद कोई वृद्धि या रंग परिवर्तन नहीं होता है।

गुणवत्ता नियंत्रण के रूप में, ज्ञात प्रमाणित उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है, जैसे: एस्चेरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, एंटरोबैक्टर एरोजेनस एटीसीसी 13048, क्लेबसिएला न्यूमोनिया एटीसीसी 13883, साल्मोनेला टायमिम्यूरियम एटीसीसी 14028, शिगेला सोननेई एटीसीसी 29930, प्रोटीन वल्गेरिस एटी 461515।

अपेक्षित परिणाम हैं: एस्चेरिचिया कोलाई एच ₂ एस नकारात्मक, इंडोल और सकारात्मक गतिशीलता, एंटरोबैक्टर एरोजेन केवल सकारात्मक गतिशीलता, साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एच ₂ एस और सकारात्मक गतिशीलता, नकारात्मक इंडोल के साथ। प्रोटीन वल्गरिस सभी सकारात्मक, जबकि क्लेबसिएला निमोनिया और शिगेला सभी नकारात्मक हैं।

सीमाएं

-मोरगेनेला मोर्गनी के कुछ अन्य उपभेदों के अलावा, मेलेनिन के उत्पादन के कारण इस माध्यम में एक भूरा वर्णक पैदा कर सकता है, यह फेरस सल्फाइड के अवक्षेपण के साथ भ्रमित नहीं होना चाहिए। अनुभवहीन पेशेवरों में यह स्थिति एच ₂ एस परीक्षण की व्याख्या में गलत सकारात्मक उत्पन्न कर सकती है ।

-स्ट्रीट एरोबिक बैक्टीरिया केवल ट्यूब की सतह पर बढ़ेगा, जिससे गतिशीलता की व्याख्या करना मुश्किल हो जाएगा।

संदर्भ

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2. नियोजन प्रयोगशालाएँ। सिम मीडियम। पर उपलब्ध: foodsafety
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