सरल धुंधला क्या है? बेहतर सुविधाएँ - जीवविज्ञान - 2025

एकल धुंधला तो यह सरल कहा जाता है, एक धुंधला प्रक्रिया त्वरित और आसान जिसमें एक डाई इस्तेमाल किया जाता है। यह मुख्य रूप से एक नमूने में मौजूद कोशिकाओं के आकारिकी और संगठन को निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है।

कोशिकाएं स्वाभाविक रूप से रंगहीन होती हैं, इसलिए माइक्रोस्कोप के नीचे देखे जाने पर उन्हें किसी तरह से दिखाई देना आवश्यक है।

मानव मेथिल कोशिकाएं सरल मेथिलीन नीले धुंधला द्वारा दागी जाती हैं।

यह उजागर करना महत्वपूर्ण है कि साधारण धुंधला में उपयोग किए जाने वाले रंजक एक सकारात्मक चार्ज (cationic) के साथ बुनियादी होना चाहिए, ताकि वे सहज रूप से सेल की दीवार और साइटोप्लाज्म से बंध सकें।

इन सेलुलर संरचनाओं को नकारात्मक रूप से चार्ज किया जाता है। यही कारण है कि धनात्मक रूप से आवेशित डाई कोशिकाओं की ओर आकर्षित होती है और उन्हें अनायास बांध देती है। इस प्रकार, एक नमूने में मौजूद सभी कोशिकाएं जल्दी से दाग जाती हैं।

डाई का इस्तेमाल साधारण धुंधला में किया जाता है

कई बुनियादी दाग ​​हैं जिनका उपयोग माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में किया जा सकता है। सबसे अधिक उपयोग किया जाता है:

- मेथिलीन ब्लू।

- क्रिस्टल बैंगनी।

- मैलाकाइट हरी।

- बेसिक फुचिन।

ये सभी डाई बैक्टीरिया में अच्छी तरह से काम करते हैं क्योंकि उनके पास सकारात्मक रूप से चार्ज किए गए (cationic) रंग आयन (क्रोमोफोरस) होते हैं।

इन दागों में से अधिकांश के लिए धुंधला समय अपेक्षाकृत कम है। वे आम तौर पर डाई की आत्मीयता के आधार पर 30 सेकंड से 2 मिनट तक होते हैं।

यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि साधारण धुंधला द्वारा एक नमूना लेने से पहले, इसे बढ़ाया जाना चाहिए और ग्लास स्लाइड (स्लाइड) पर तय किया जाना चाहिए; विस्तारित और निश्चित नमूने को स्मीयर कहा जाता है।

सरल धुंधला करने के लिए 6 कदम

चरण 1

स्लाइड को एक धुंधला रैक पर रखें और वांछित दाग लागू करें। इसी समय कार्य करते हैं।

आम तौर पर साधारण धुंधला कुछ सेकंड से लेकर कुछ मिनट तक इस्तेमाल किए गए दाग पर निर्भर करता है।

अवलोकन

इस चरण में डाई का उपयोग करने के लिए अनुशंसित समय से अधिक नहीं होना महत्वपूर्ण है, क्योंकि क्रिस्टल शीट पर बन सकते हैं, जो कि "कलाकृतियों" के रूप में जाना जाता है जो कोशिकाओं के आकारिकी को विकृत करते हैं।

चरण 2

ध्यान से एक बोतल से आसुत जल के साथ, या धीरे-धीरे बहते नल के पानी के साथ स्लाइड से धब्बा धो लें, जब तक कि अपवाह स्पष्ट न हो जाए। यह आमतौर पर 5-10 सेकंड लेता है।

अवलोकन

स्मीयर पर सीधे पानी की धारा को लागू न करें, जिससे बचने के लिए उसी नमूने के बल को नुकसान हो।

यदि आपके पास आसुत जल नहीं है, तो आप बिना किसी समस्या के नल के पानी का उपयोग कर सकते हैं क्योंकि यह धुंधला के परिणाम को प्रभावित नहीं करेगा।

चरण 3

एक दिशा में और बिना रगड़ के शोषक पेपर तौलिये के साथ स्लाइड को ब्लॉट करें। सुनिश्चित करें कि स्लाइड के नीचे साफ है।

चरण 4

माइक्रोस्कोप के तहत दाग धब्बा का निरीक्षण करें। उस क्षेत्र का ठीक से पता लगाने के लिए सबसे दूर के उद्देश्यों के साथ शुरू करें जिसे आप अधिक विस्तार से देखना चाहते हैं। नमूना के करीब और करीब पाने के उद्देश्य को बदलें।

अवलोकन

उच्च आवर्धन (सामान्य रूप से 100X) के साथ उद्देश्य के उपयोग के लिए, विसर्जन तेल का उपयोग किया जाना चाहिए, क्योंकि इससे प्रकाश को बेहतर ढंग से प्रवेश करने में मदद मिलती है और छवि तेज दिखाई देती है। यह एक coverslip का उपयोग करने के लिए आवश्यक नहीं है।

चरण 5

अंत में, एक उपयुक्त कंटेनर में सभी नमूनों का निपटान करें जिसे "बायोझार्ड" ठीक से लेबल किया गया है।

संदर्भ

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